梁皓趙云杰金磊涂艷陳波

雄激素受體在雄性激素源性脫發(fā)患者的表達(dá)觀察*

梁皓①趙云杰①金磊①涂艷①陳波①

目的：了解雄激素受體（AR）在雄性激素源性脫發(fā)（AGA）患者頂部表皮、毛囊、皮脂腺、汗腺中的表達(dá)情況。方法：選取26例雄性激素源性脫發(fā)患者頂部、枕部以及10例非脫發(fā)者的頂部頭皮標(biāo)本，用免疫組織化學(xué)檢測表皮、毛囊、皮脂腺、汗腺中AR的表達(dá)。結(jié)果：脫發(fā)患者頭頂部毛囊、皮脂腺、汗腺AR表達(dá)均明顯強(qiáng)于枕部和非脫發(fā)者枕部，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；脫發(fā)患者枕部毛囊、皮脂腺、汗腺AR表達(dá)與非脫發(fā)者頂部AR表達(dá)比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；所有標(biāo)本表皮中AR均為陰性。結(jié)論：AR 在AGA患者頭頂部毛囊、皮脂腺、汗腺的高表達(dá)，可能是AGA重要原因之一。

雄性激素受體； 雄性激素源性脫發(fā)

雄性激素源性脫發(fā)（Androgenetic alopecia，AGA）是臨床最常見的脫發(fā)性疾病，表現(xiàn)為前額發(fā)際逐漸后退，頂部頭發(fā)逐漸稀疏脫落。脫發(fā)不僅嚴(yán)重影響患者的外在形象，而且從心理上也給患者帶來了無盡的煩惱，越來越受到人們的重視[1]。國內(nèi)流行病學(xué)調(diào)查顯示，本病在我國男性的患病率為15.73%～19.75%，女性患病率為2.73%～4.69%，其病因還不完全清楚，治療也一直是個棘手的問題[2-3]。為探索AGA的發(fā)病原因，從而為防治提供依據(jù)，筆者對26例雄性激素源性脫發(fā)患者頂部和枕部頭皮以及10例非脫發(fā)者頂部頭皮標(biāo)本，采用免疫組化法檢測雄性激素受體（androgen receptor，AR）在表皮、毛囊、皮脂腺、汗腺的表達(dá)水平，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2013年1月-2014年1月本院皮膚科門診就診的AGA患者26例，均為男性，年齡2l～49歲，平均（30.38±2.25）歲，病程3個月～3年。選取本院神經(jīng)外科手術(shù)的非脫發(fā)患者，共10例，均為男性；年齡20～48歲，平均（29.83±1.69）歲。兩組研究對象的性別、年齡比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經(jīng)本院倫理委員會通過。

1.2 入選和排除標(biāo)準(zhǔn) 入選的AGA患者均具有典型臨床癥狀，符合AGA診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）近半年內(nèi)系統(tǒng)或局部使用過抗脫發(fā)藥物；（2）頭皮有細(xì)菌、真菌等感染性疾病。（3）伴嚴(yán)重心、肝、腎病、糖尿病及腫瘤等疾病者。

1.3 取材部位及方法 取AGA患者枕部和頂部皮膚標(biāo)本，每塊標(biāo)本約2 mm×2 mm×6 mm大小，甲醛固定，深低溫下保存，以備檢測。非脫發(fā)者頂部頭皮取自本院神經(jīng)外科手術(shù)的非脫發(fā)患者廢棄頂部皮膚標(biāo)本。

1.4 試劑 鼠單克隆抗人AR抗體購自上海長嘉生物工程有限公司；免疫組織化學(xué)染色二步法的試劑盒購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。

1.5 檢測方法 采取免疫組化化學(xué)二步法檢測AR在AGA患者頂部、枕部和非脫發(fā)者頂部表皮、毛囊、皮脂腺、汗腺的表達(dá)，具體操作步驟按照鼠單克隆抗人AR抗體和免疫組織化學(xué)二步法的試劑盒說明書操作。

1.6 結(jié)果判定 AR定位在細(xì)胞核[5]。染色結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)參考半定量積分法：在光學(xué)顯微鏡下見細(xì)胞核出現(xiàn)棕黃色或棕褐色為陽性細(xì)胞[6]。根據(jù)陽性細(xì)胞平均百分比進(jìn)行評分（A）：＜10%計(jì)0分，10%～25%計(jì)1分，25%～50%計(jì)2分，＞50%計(jì)3分。染色程度評分（B）：無著色計(jì)0分，淺黃色計(jì)1分，棕黃色計(jì)2分，棕褐色計(jì)3分。A+B得分0～2分者為陰性表達(dá)，3～6分者為陽性表達(dá)。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 15.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料比較采用 χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

所有標(biāo)本中表皮AR表達(dá)均為陰性。26例AGA患者中20例頂部毛囊AR表達(dá)陽性，表達(dá)率76.92%，5例枕部毛囊AR陽性，表達(dá)率19.23%，10例非脫發(fā)者頂部毛囊AR表達(dá)陽性2例，表達(dá)率20.00%，三組標(biāo)本間毛囊AR表達(dá)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ χ2=20.29，P＜0.05）。AGA患者頂部毛囊AR表達(dá)與枕部毛囊AR表達(dá)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ χ2=15.10，P＜0.05），與非脫發(fā)者頂部毛囊AR表達(dá)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=7.60，P＜0.05）。AGA患者枕部毛囊AR表達(dá)與非脫發(fā)者頂部毛囊AR表達(dá)比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.17，P＞0.05）。

26例AGA患者中有21例頂部皮脂腺、汗腺AR表達(dá)陽性，表達(dá)率均為80.77%；5例枕部皮脂腺、汗腺AR陽性，表達(dá)率19.23%。10例非脫發(fā)者頂部皮脂腺、汗腺AR表達(dá)陽性2例，表達(dá)率20.00%，三組標(biāo)本間皮脂腺、汗腺AR表達(dá)有顯著差異（ χ2=22.93，P＜0.05）。AGA患者頂部皮脂腺、汗腺AR表達(dá)與枕部皮脂腺、汗腺AR表達(dá)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ χ2=17.31，P＜0.05），與非脫發(fā)者頂部皮脂腺、汗腺AR表達(dá)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ χ2=9.08，P＜0.05）。AGA患者枕部皮脂腺、汗腺AR表達(dá)與非脫發(fā)者頂部皮脂腺、汗腺AR表達(dá)比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ χ2=0.17，P＞0.05）。

3 討論

AGA的病因及發(fā)病機(jī)制尚未完全明了。譚鳳明等[7]報道67.57%的AGA患者有家族遺傳史，遺傳在雄激素性脫發(fā)的發(fā)病過程中起重要作用，一般認(rèn)為是常染色體顯性遺傳[8]。近幾年研究有了一定進(jìn)展，特別是對于AR基因研究，AR基因位于Xq11.2-q12，長約90 kb，是第一個發(fā)現(xiàn)的與雄激素脫發(fā)發(fā)生相關(guān)的基因，也是迄今為止唯一經(jīng)鑒定的雄激素脫發(fā)危險基因[9]。有報道AR基因可發(fā)生缺失、剪接位點(diǎn)突變等改變，致靶器官對睪丸或雙氫睪酮無應(yīng)答[10]。AR是甾體激素受體超家族的一員，作為雄激素誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄因子介導(dǎo)雄激素在體內(nèi)的活動[11]。雄激素為固醇類化合物，男性主要來自睪丸，少量由腎上腺皮質(zhì)合成；女性主要由腎上腺皮質(zhì)合成，卵巢也分泌少量。睪酮是人體分泌的主要雄激素，它在體內(nèi)經(jīng)5α-還原酶作用可轉(zhuǎn)化為活性更高的二氫睪酮（DHT），后者與其受體結(jié)合形成雄激素-受體復(fù)合物后進(jìn)入細(xì)胞核，在核內(nèi)控制毛發(fā)生長基因的表達(dá)，使頭發(fā)的生長期縮短，頭皮毛囊逐漸萎縮、微小化，終毛轉(zhuǎn)變?yōu)殡ッ罱K引起脫發(fā)。

筆者用免疫組化方法對毛囊中的AR受體進(jìn)行檢測，患者頭頂部AR表達(dá)明顯強(qiáng)于枕部和非脫發(fā)者頂部（P＜0.05），并且毛囊上皮細(xì)胞中幾乎沒有AR受體，而AR受體存在于屬真皮細(xì)胞的毛乳頭細(xì)胞上，提示毛乳頭是毛囊中雄激素作用的主要靶點(diǎn)，這與Inui等[12]用反轉(zhuǎn)錄聚合酶反應(yīng)（RT-PCR）的方法發(fā)現(xiàn)AGA脫發(fā)患者局部皮膚乳頭雄性激素受體比健康人高是一致的。毛乳頭細(xì)胞是一種具有廣泛生物學(xué)特性和功能的細(xì)胞，具有在體內(nèi)外條件下重建毛囊的功能，其功能的異常變化是導(dǎo)致毛囊周期失衡和脫發(fā)現(xiàn)象的主要起始因素[13]。毛乳頭細(xì)胞中的AR受體可能與睪酮、二氫睪酮結(jié)合后導(dǎo)致轉(zhuǎn)化生長因子（TGF-β）與胰島素生長因子（IGF-1）轉(zhuǎn)錄水平的變化，還可能使毛乳頭細(xì)胞自分泌抑制因子，導(dǎo)致頭皮毛囊微型化成毳毛毛囊，最后引起脫發(fā)[14-15]。雄激素通過AR所介導(dǎo)的細(xì)胞效應(yīng)還不十分清楚，需要進(jìn)一步全面深入研究。

筆者還發(fā)現(xiàn)AGA患者頭頂部皮脂腺、汗腺AR表達(dá)較強(qiáng)，與枕部和非脫發(fā)者頂部AR表達(dá)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），而表皮細(xì)胞中幾乎沒有AR表達(dá)，筆者推測AR頭頂部皮脂腺、汗腺中高表達(dá)，在AGA過程中也起著一定作用。有研究發(fā)現(xiàn)小鼠觸須毛囊上1/3切除后可促進(jìn)毛囊生長，這可能是因?yàn)榍谐糠职ㄆぶ?，皮脂腺對毛發(fā)生長有抑制作用[16]。皮脂腺、汗腺中的AR與雄激素結(jié)合，可能是通過促進(jìn)了皮脂腺、汗腺過多分泌，導(dǎo)致原存在于皮膚上的正常菌群，如糠秕孢子菌等大量繁殖，或過量的皮脂，通過原來存在于皮膚上的非致病菌如痤瘡丙酸桿菌等作用，分解出游離脂肪酸，引發(fā)毛囊周圍炎性細(xì)胞浸潤，誘導(dǎo)和加速毛發(fā)脫落，值得進(jìn)一步研究證實(shí)。

[1]肖瑋.植發(fā)患者美容心理的分析與探討[J].中外醫(yī)學(xué)研究，2011，9（5）：101.

[2]中華醫(yī)學(xué)會皮膚性病學(xué)分會.中國雄激素性禿發(fā)診療共識（2009）[J].中華皮膚科雜志，2009，42（10）：663-664.

[3]張大維.雄激素源性脫發(fā)治療進(jìn)展[J].中國美容醫(yī)學(xué)，2009，18 （12）：1832-1833.

[4]趙辨.中國臨床皮膚病學(xué)[M].南京：江蘇科技出版社，2010，1186.

[5] Matsumoto T，Shiina H，Kawano H，et al.Androgen receptor functions in male and female physiology[J].J Steroid Biochem Mol Biol，2008，109（3）：236-241.

[6] Sawant N，Chikhalkar S，Mehta V，et al.Androgenetic alopecia：quality-of-life and associated lifestyle patterns[J].Int J Trichology，2010，2（2）：81-85.

[7]譚鳳明，侯顯曾，張濱岳，等.男性型脫發(fā)148例臨床分析[J].廣東醫(yī)學(xué)，2012，33（13）：1896-1897.

[8]張鑫.雄激素性脫發(fā)的病因和發(fā)病機(jī)制研究進(jìn)展[J].中國麻風(fēng)皮膚病雜志，2008，24（9）：716-717.

[9] Hillmer A M，F(xiàn)laquer A，Hanneken S，et al.Genome-wide scan and fine-mapping linkage study of androgenetic alopecia reveals a locus on chromosome 3q26[J].Am J Hum Genet，2008，82（3）：737-743.

[10]石思雄，盧凱，陳光彪，等.AIS大家系的AR突變效應(yīng)分析[J].中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2014，11（6）：81-83.

[11]廖金鳳，段西凌.雄激素性脫發(fā)的病因病機(jī)[J].臨床合理用藥，2013，6（5）：174-175.

[12] Inui S，Itami S.Molecular basis of androgenetic alopecia：from androgen to paracrine mediators through dermal papilla[J].J Dermatol Sci，2011，61（1）：1-6.

[13]劉官智，伍津津.毛乳頭細(xì)胞生物學(xué)特性和功能研究進(jìn)展[J].國際皮膚性病學(xué)雜志，2009，35（5）：324-325.

[14] Kitagawa T，Matsuda K，Inui S，et al.Keratinocyte growth inhibition through the modification of Wnt signaling by androgen in balding dermal papilla cells[J].Clin Endocrinol Metab，2009，94（4）：1288-1294.

[15] Hamada K，Randall V A.Inhibitory autocrine factors produced by the mesenchyme-derived hair follicle dermal papilla may be a key to male pattern baldness[J].Br J Dermatol，2006，154（4）：609-618.

[16] Robinson M，Reynolds A J，Jahoda C A.Hair cycle stage of the mouse vibrissa follicle determines subsequent fiber growth and follicle behavior in vitro[J].J Invest Dermatol，1997，108（4）：495-500.

The Observation of Androgen Receptor Expression in Androgenetic Alopecia Patients

/LIANG Hao，ZHAO Yun-jie，J IN Lei，et al.//Medical Innovation of China，2014，11（18）：060-062

Objective：To investigate AR expression in the top of epidermis， hair follicle and sebaceous gland，sudoriferous gland.Method：The top and the occipital scalp of AGA patients （n=26） and the top scalp of non-alopecia people （n=10） as specimens were obtained， and AR expressions in the epidermis， hair follicle and sebaceous gland，sudoriferous gland were studied by immunohistochemistry method.Result：AR expressions of hair follicle， sebaceous

Androgen receptor； Androgenetic alopecia

10.3969/j.issn.1674-4985.2014.18.020

2014-04-09） （本文編輯：蔡元元）

江西省衛(wèi)生廳科技計(jì)劃（20132060）

①江西省九江市第一人民醫(yī)院 江西 九江 332000

梁皓

gland， sudoriferous gland on the top of AGA patients were stronger than the occipital of AGA patients and the top of nonalopecia（P＜0.05）； AR expressions of hair follicle， sebaceous gland， sudoriferous gland in the occipital of AGA patients had no significant difference with the top of non-alopecia（P＞0.05）. All samples were negative for AR in epidermis. Conclusion：AR expressions on the top of hair follicle and sebaceous gland， sudoriferous gland in AGA patients may be one of the key factors leading to AGA.

First-author’s address：The First People’s Hospital of J iujiang City，J iujiang 332000，China