王川紅

鄭州市婦幼保健院產(chǎn)科，河南鄭州 450000

宮頸癌屬于比較常見(jiàn)的婦科惡性腫瘤，好發(fā)年齡為15～44歲，在近些年來(lái)，該病的發(fā)病率呈現(xiàn)逐年上升的總體趨勢(shì)，而且以局部浸潤(rùn)與淋巴轉(zhuǎn)移狀態(tài)作為最為主要的轉(zhuǎn)移方式[1]。相關(guān)醫(yī)學(xué)研究證明，人乳頭瘤病毒(HPV)的感染屬于引發(fā)宮頸癌的第一因素，并且還以16型和18型HPV(即HPV16/18型)為最常見(jiàn)。在HPV發(fā)病早期，通常蛋白E6和E7是導(dǎo)致宮頸癌癌變的關(guān)鍵，而E6蛋白又會(huì)造成活化狀態(tài)的Rap-GTP水平增高，結(jié)果導(dǎo)致腫瘤的最終發(fā)生[2]。為了探討SIP A1在正常宮頸組織與宮頸癌組織中的表達(dá)，并且深入分析HPV16/18 E6與SIP A1和宮頸癌浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移等方面的關(guān)系和影響，本文進(jìn)行了深入的研究，取得了較好的研究效果，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究選擇自2010年10月—2013年9月間本院婦科住院的宮頸癌患者共251例做為研究組，患者的年齡在25～69歲之間，平均年齡為（46.27±5.87）歲。全部的患者都已經(jīng)完成廣泛子宮切除聯(lián)合盆腔淋巴結(jié)切除術(shù)，經(jīng)過(guò)手術(shù)以后的腫瘤病理檢查，明確屬于盆腔淋巴結(jié)已轉(zhuǎn)移的患者共65例，患者共186例。并選取了在同時(shí)期內(nèi),因?yàn)樽訉m肌瘤進(jìn)行子宮切除手術(shù)的279例患者獲得正常宮頸組織石臘標(biāo)本做為對(duì)照組，該組患者的年齡在26～70歲之間，平均年齡年齡為（45.62±6.45）歲。該兩組患者在年齡方面對(duì)比，其差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2 方法

本研究運(yùn)用三去污劑法來(lái)提取在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期內(nèi)的宮頸癌細(xì)胞株的總蛋白，包括HT3、C33A、HeLa和SiHa以及CaSki等，之后則采用Western blot法來(lái)檢測(cè)SIPA1蛋白與HPV16/18 E6蛋白的水平。以上細(xì)胞株運(yùn)用DMEM培養(yǎng)基，置于37℃環(huán)境下的5%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)。另外運(yùn)用Envision法來(lái)進(jìn)行正常宮頸組與宮頸癌組織中的SIP A1和HPV16/18 E6的表達(dá)的檢測(cè)，全部結(jié)果均由3位病理學(xué)專(zhuān)家進(jìn)行獨(dú)立的判斷并決定。

1.3 觀察指標(biāo)

通過(guò)計(jì)算SIPA1與HPV16/18 E6在正常的宮頸組織與宮頸癌組織中所表達(dá)的陽(yáng)性率，以此探討SIP A1的表達(dá)和HPV16/18 E6指標(biāo)的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

研究資料采用SPSS 18.0軟件包進(jìn)行處理。計(jì)數(shù)資料運(yùn)用χ2檢驗(yàn)，組間數(shù)據(jù)的相關(guān)性研究則運(yùn)用Spearman秩和進(jìn)行相關(guān)分析，以P＜0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。有之則表示有明顯的差異，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

SIP A1在正常宮頸組織和宮頸癌組織中表達(dá)的陽(yáng)性率分別為86.2%(56/65)和57.8%(145/251)，兩組陽(yáng)性率之間比較，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=12.93，P＜0.01)。HPV16/18 E6 在正常宮頸組織和宮頸癌組織中的陽(yáng)性率分別為27.7%(18/65)和78.9%(198/251)，兩組陽(yáng)性率之間比較，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=36.85，P<0.01)。HPV16/18 E6陰性的HT3和C33A細(xì)胞株中的SIP A1蛋白呈現(xiàn)陽(yáng)性表達(dá)，而HPV16/18 E6陽(yáng)性的SiHa和HeLa及CaSki細(xì)胞株中沒(méi)有SIP A1蛋白表達(dá)，表明SIPA1表達(dá)與HPV16/18 E6表達(dá)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。

3 討論

人乳頭瘤病毒（HPV）感染屬于引發(fā)宮頸癌疾病的主要因素，而HPV E6和E7早期蛋白也是導(dǎo)致宮頸癌的關(guān)鍵條件，同時(shí)，E6蛋白除了能夠明顯抑制P53功能以外，還能夠有效地降解E6 TP1造成活化狀態(tài)的Rap水平的升高，從而促使了各類(lèi)腫瘤的最終發(fā)生。SIP A1在近些年來(lái)才被發(fā)現(xiàn)，和腫瘤浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移有著密切關(guān)系的基因，又屬于Rap1-GTP酶激活蛋白，在長(zhǎng)期以來(lái)，SIP A1基因一直被認(rèn)為發(fā)揮著抑制癌癥基因的功能[3]。有相關(guān)研究[4]證明，Rap1和細(xì)胞能黏附與轉(zhuǎn)移相關(guān)的因子，以活化形式Rap1來(lái)促進(jìn)細(xì)胞間的黏附連接，并且非活化形式的Rap1-GAP也可以有效地對(duì)黏附連接的形成產(chǎn)生阻止作用，甚至能夠讓已經(jīng)完成的黏附連接受到損害，從而又積極參與到人體腫瘤細(xì)胞的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移過(guò)程。

本研究結(jié)果顯示，運(yùn)用Western blot方法進(jìn)行檢驗(yàn)，在HPV16/18 E6陰性中的HT3和C33A細(xì)胞株中，SIP A1蛋白指標(biāo)呈現(xiàn)為陽(yáng)性，但是通過(guò)Envision方法進(jìn)行檢測(cè)以后，SIP A1在正常的宮頸組織中，其陽(yáng)性率卻顯著地高于宮頸癌組織陽(yáng)性率，并且，HPV16/18 E6蛋白在正常的宮頸組織中的陽(yáng)性率又顯著的低于宮頸癌組織，這種表現(xiàn)從細(xì)胞學(xué)與組織學(xué)上，這充分說(shuō)明SIP A1和HPV 16/18 E6蛋白的表達(dá)呈現(xiàn)著負(fù)相關(guān)關(guān)系，并且表達(dá)水平與盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。張莉華研究[5]認(rèn)為，SIP A1的表達(dá)水平和宮頸癌中盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有著密切關(guān)聯(lián)，該表達(dá)水平如果低下或者是沒(méi)有表達(dá)，就會(huì)提示宮頸癌盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的風(fēng)險(xiǎn)。

通過(guò)本研究結(jié)果還可以看出，HPV16/18 E6蛋白在患者宮頸癌的發(fā)生與發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用，而SIP A1和E6蛋白之間所存在著的負(fù)相關(guān)關(guān)系，又大大拓展了宮頸癌組織對(duì)于E6蛋白功能的作用，這又將使其對(duì)有關(guān)宮頸癌的轉(zhuǎn)移機(jī)制的研究方向更為清晰[6]。因此，可能會(huì)成為醫(yī)學(xué)界對(duì)宮頸癌轉(zhuǎn)移傾向進(jìn)行預(yù)測(cè)的一個(gè)主要指標(biāo)，有著較大的臨床研究和應(yīng)用價(jià)值。

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