孫 雨,馬世春,魏 巍,肖開提·阿不都克里木,2,徐 一,董 浩,王曉英
(1.中國(guó)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,北京 102600;2.新疆動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,烏魯木齊,830001)
豬流行性感冒簡(jiǎn)稱豬流感,是由豬流感病毒引起的一種急性呼吸道傳染病,目前分離的豬流感病毒包括C型流感病毒和A型流感病毒H1N1、H1N2、H3N1、H3N2和H2N3等亞型。
豬流感病毒在分類上屬于正黏病毒科、流感病毒屬。在流感病毒屬中,A型流感病毒在豬群中普遍存在,是引起豬流感的主要病原,C型流感病毒只是偶爾在豬群中被分離,B型流感病毒目前尚無(wú)在豬群中分離的報(bào)道。來(lái)源于豬、禽和人流感病毒的基因可以跨越種間屏障重新組合[1]。
流感是豬群中普遍存在的一種疫病,病豬和帶毒豬是病毒的主要傳染源。有研究顯示,除流行于豬群中的流感病毒以外,禽和人流感病毒也可以向豬傳播。由于豬對(duì)禽源和人源流感病毒均易感,因此豬被認(rèn)為是人流感和禽流感病毒的混合器。豬流感是豬的一種地方流行性傳染病,臨床暴發(fā)多發(fā)生在氣溫變化較大時(shí)。豬流感病毒存在于病豬的鼻液、氣管、支氣管的滲出液和肺組織中,可通過(guò)飛沫經(jīng)呼吸道傳播。該病的流行特征是突然發(fā)生,潛伏期短,迅速波及全群,感染率可達(dá)100%,但死亡率通常不超過(guò)1%,各種年齡、性別、品種的豬都可以感染豬流感病毒[2]。
除豬、野豬可以自然感染豬流感病毒以外,人、家禽、火雞等感染豬流感病毒也時(shí)有發(fā)生,而且近年來(lái)有研究顯示水貂也可感染豬流感病毒。此外,小鼠、雪貂、豚鼠、雞和信鴿等多種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物也可以感染豬流感病毒[3]。豬是豬流感病毒的自然宿主,各種年齡、性別、品種的豬都可自然感染。同時(shí),豬也是禽、豬、人流感病毒的共同易感宿主,是流感病毒的貯存宿主和基因重排的“混合器”,在流感病毒的進(jìn)化和種間傳播中具有重要的作用。在人流感流行過(guò)后,雖然病毒及其變異株在人群中很快消失,但病毒仍有可能在豬群中長(zhǎng)期存在,并再次引起人類的感染。豬流感病毒對(duì)人與其他動(dòng)物的健康有著難以預(yù)測(cè)的影響,近年來(lái),國(guó)際上對(duì)于豬流感的研究給予了高度的重視[4]。
1918年美國(guó)、西班牙、匈牙利和中國(guó)就報(bào)道了豬流感的發(fā)生。其中暴發(fā)于西班牙的H1N1豬流感的動(dòng)物臨床癥狀與病理變化和人群中流行的流感有許多相似之處。1931年,美國(guó)學(xué)者Shop分離并鑒定了第1株豬流感病毒,也就是古典H1N1亞型豬流感病毒。在隨后的50年間,豬流感病毒保持著相對(duì)穩(wěn)定的周期流行性,是這一時(shí)期唯一的流行毒株[5]。1968年的類人H3N2亞型和1979年的類禽H1N1亞型流感病毒相繼傳入豬群,并建立了穩(wěn)定的遺傳譜系。這些不同來(lái)源的流感病毒在豬群中進(jìn)一步發(fā)生基因重排產(chǎn)生了多種類型的基因重排病毒。其中,重排H1N2豬流感病毒相繼在日本、法國(guó)、英國(guó)、美國(guó)和中國(guó)得到分離鑒定,而重排H3N2在美國(guó)、歐洲和中國(guó)的分離鑒定,使各種亞型的病毒呈現(xiàn)明顯的遺傳多樣性[6]。
豬流感是豬的一種呼吸系統(tǒng)疾病,發(fā)病豬通常表現(xiàn)經(jīng)典的流感癥狀,且在1~2周后迅速的恢復(fù)。豬感染流感病毒后的主要臨床癥狀是發(fā)熱(40 ℃以上),精神沉郁,食欲不振,發(fā)病豬扎堆、蜷縮、被毛粗亂,鼻部流出漿液性分泌物、打噴嚏、咳嗽和呼吸困難等,部分懷孕母豬出現(xiàn)流產(chǎn)癥狀[7]。豬感染流感病毒后,死亡率較低,但發(fā)病豬增重慢、生產(chǎn)力下降引起的經(jīng)濟(jì)損失較大。病毒引起豬的病理變化主要見于鼻、咽、喉、氣管和支氣管腔。病程發(fā)展較快,如無(wú)其他病原并發(fā)或繼發(fā)感染,通常1周左右可自行緩解。豬患流感病毒后容易與其他細(xì)菌病發(fā)生繼發(fā)感染。一般來(lái)說(shuō),胸膜肺炎放線桿菌、副豬嗜血桿菌、多殺性巴氏桿菌、豬2型鏈球菌等細(xì)菌都是常見的繼發(fā)感染細(xì)菌。感染期間如有其他病原并發(fā)或繼發(fā)感染可能導(dǎo)致發(fā)病豬病情惡化、病變加重,甚至引起死亡[8]。
豬流感是一種發(fā)病率高、死亡率低,以呼吸系統(tǒng)疾病為主的傳染病,其臨床表現(xiàn)差異較大,根據(jù)流行病學(xué)特征、臨床癥狀和病理變化,很難與豬的其他呼吸道疾病進(jìn)行區(qū)分,需要實(shí)驗(yàn)室診斷才能最終確診。豬流感的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)主要包括病毒的分離鑒定、病毒抗原和RNA檢測(cè)、血清抗體檢測(cè)等[9]。
3.1.1 病毒的分離
收集病豬的鼻腔和咽喉部的黏膜拭子,將其接種于9~11日齡雞胚或細(xì)胞如犬腎細(xì)胞、豬腎細(xì)胞中進(jìn)行分離。雞胚培養(yǎng)時(shí),收集接種后24~96 h死亡及96 h存活的雞胚,取雞胚的尿囊液和羊水。細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),豬流感病毒在細(xì)胞中的增殖會(huì)引起細(xì)胞發(fā)生病變,收集細(xì)胞培養(yǎng)液。將收集的樣品用雞的紅細(xì)胞檢測(cè)其活性,并進(jìn)一步用血凝抑制試驗(yàn)(HI)和神經(jīng)氨酸酶抑制試驗(yàn)(NI)鑒定病毒的血清亞型。病毒分離時(shí)獲得的病原是進(jìn)行確診和進(jìn)一步研究的基礎(chǔ)。
3.1.2 抗原檢測(cè)方法
目前用于檢測(cè)病毒抗原及核酸的方法主要包括:用于檢測(cè)肺組織、鼻上皮細(xì)胞和支氣管肺泡灌洗液的免疫熒光技術(shù),用于檢測(cè)固定組織的免疫組化技術(shù),用于細(xì)胞培養(yǎng)檢測(cè)和亞型分析的免疫過(guò)氧化物酶染色法,以及用于檢測(cè)抗原的ELISA和檢測(cè)核酸的RT-PCR和熒光RT-PCR技術(shù)[10]。
3.1.3 抗體檢測(cè)方法
用于檢測(cè)豬流感病毒抗體的檢測(cè)方法主要包括病毒中和試驗(yàn)、瓊脂免疫擴(kuò)散試驗(yàn)、ELISA以及血凝抑制試驗(yàn),其中血凝抑制試驗(yàn)是最為常用的血清學(xué)方法[11]。血凝抑制試驗(yàn)不僅可以鑒定感染病毒的亞型,同時(shí)可用于檢測(cè)同一亞型的一些抗原變異株的感染。該方法的缺點(diǎn)是敏感度較低、操作繁瑣、試劑缺乏標(biāo)準(zhǔn)化,同時(shí)對(duì)一些抗原變異太大的毒株抗體敏感性較低。血凝抑制的抗體檢測(cè)需要采集急性感染期和3~4周后恢復(fù)期的雙份血清,通過(guò)抗體滴度的增加(4倍以上)才能最終確診[12]。
3.2.1 預(yù)防措施
豬流感是養(yǎng)豬場(chǎng)中普遍存在的一種傳染病,雖然該病自身對(duì)豬的危害并不嚴(yán)重,但是容易與其他疾病混合感染,造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。對(duì)豬流感的防控重點(diǎn)應(yīng)該以預(yù)防為主,減少該病的發(fā)生和流行。同時(shí)加強(qiáng)豬群的飼養(yǎng)管理和豬場(chǎng)的日常衛(wèi)生管理,增強(qiáng)豬只的抵抗力,防止疫病的傳入。在歐美一些國(guó)家,疫苗已被廣泛用于豬流感的防控,且顯著降低了豬流感的發(fā)病率和疾病帶來(lái)的經(jīng)濟(jì)損失。目前市場(chǎng)上銷售的豬流感疫苗主要是針對(duì)經(jīng)典毒株H1N1和H3N2的兩種亞型單價(jià)和雙價(jià)疫苗。這些疫苗只能為抗原關(guān)系接近的病毒提供保護(hù),但是隨著病毒的不斷變異,這些疫苗對(duì)近些年來(lái)的流行毒株保護(hù)力較差[13]。加快生產(chǎn)疫苗毒株的更新以及生產(chǎn)自家疫苗成為生產(chǎn)者主要考慮的問(wèn)題。雖然接種疫苗可以減少豬只發(fā)病,但是并不能阻斷病毒的感染與釋放,因此更應(yīng)該注重豬場(chǎng)本身的日常管理與消毒措施。豬流感病毒在外界環(huán)境中抵抗力較低,生存周期較短,常用的消毒劑以及高溫措施均可以較好的殺滅病毒。同時(shí)對(duì)豬場(chǎng)實(shí)行嚴(yán)格的管理,控制好豬只的進(jìn)出,改善豬場(chǎng)的飼養(yǎng)條件也是防控本病的關(guān)鍵所在。
3.2.2 治療措施
對(duì)于生豬感染豬流感病毒,主要是保證病豬的休息和營(yíng)養(yǎng),同時(shí)可對(duì)發(fā)病豬場(chǎng)實(shí)施緊急免疫接種并加強(qiáng)管理,以阻止病毒在豬場(chǎng)內(nèi)和豬場(chǎng)間的傳播。此外,可以使用一些抗生素提高機(jī)體的抵抗力,避免繼發(fā)其他細(xì)菌性疾病。對(duì)人感染豬流感,使用抗病毒藥物可以有效減緩癥狀、減輕痛苦,防治流感并發(fā)癥的發(fā)生??共《舅幬飸?yīng)該在癥狀出現(xiàn)48 h內(nèi)服用,及時(shí)服用退燒類藥物和補(bǔ)充體液,必要時(shí)服用抗生素防止繼發(fā)感染[14]。
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