李艷艷，陳麗雄，乞素冬，王俊斌，楊鳳梅，趙 遠(yuǎn)，魯帥堯，禹文海，和占龍

(中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所，云南省重大傳染病疫苗研發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，昆明 650118)

恒河猴屬非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物，其在親緣關(guān)系上和人類非常接近，與人類的遺傳物質(zhì)同源性高達(dá)75%～98.5%，由于其在遺傳學(xué)、生理學(xué)、解剖學(xué)和代謝等方面與人類高度相似，因而為人類心腦血管、神經(jīng)系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)、傳染性疾病等的研究提供了理想的模型動(dòng)物。另外，非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物是開展實(shí)驗(yàn)心理研究的良好素材，通過對(duì)獼猴、猩猩等的情緒與個(gè)性特征研究，有助于理解人類情緒[1]。近年來國(guó)內(nèi)外有關(guān)于大鼠、小鼠斷奶期間行為變化及抑郁癥方面的研究和報(bào)道較多[2-3]，對(duì)恒河猴，金絲猴行為學(xué)及情緒方面的研究也有相關(guān)報(bào)道[4-5]。本文通過對(duì)離乳后的人工飼養(yǎng)期嬰猴的行為進(jìn)行觀察及分析，旨在了解嬰猴離乳期的行為特點(diǎn)，探討嬰猴早期斷奶后心理和行為的變化及可能的機(jī)制，指導(dǎo)和提高嬰猴斷奶期間的飼養(yǎng)管理水平，同時(shí)為研究人類嬰幼兒早期斷奶后心理和行為的變化，開展心理學(xué)、行為學(xué)等方面的評(píng)估實(shí)驗(yàn)提供研究思路和模型。

1 材料和方法

1.1 研究對(duì)象

動(dòng)物來源： 2012年出生的嬰猴共290只，其中雄性147只，雌性143只，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào): SCXK(滇)2010-0006；實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào): SYXK(滇)2010-0009。在出生后4～5個(gè)月離乳，隨機(jī)分籠，每籠2只。一日五餐，自由飲水，另外添加水果及牛奶。溫度在18℃～25℃之間，濕度控制在40%～70%之間，滿足基本的動(dòng)物福利要求。

1.2 研究方法

采用隨意取樣和時(shí)間記錄法[6]，于每天上午9:00～10:00，下午2:00～3:00，晚上8：00～9：00之間，由2名實(shí)驗(yàn)人員分別觀察和記錄出現(xiàn)的全部行為，將記錄的結(jié)果進(jìn)行分析和匯總，試驗(yàn)期為6個(gè)月。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

應(yīng)用 SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析，P< 0.05為差異顯著，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 嬰猴的行為分類

在整個(gè)觀察期間共出現(xiàn)7種行為，分別為團(tuán)抱、吸手指、吸同伴身體、踱步、吸生殖器、爬跨動(dòng)作、吸腳趾。離乳后1個(gè)月，出現(xiàn)團(tuán)抱(團(tuán)抱個(gè)體占嬰猴總數(shù)的比例為17.24%)、吸手指(2.76%)、吸同伴身體(0.69%)3種行為。團(tuán)抱及吸手指行為在第2、3個(gè)月均顯著增加(P< 0.05)，在隨后的4～6月增加較平穩(wěn)，無顯著性差異；吸同伴身體的行為于2月顯著上升(P< 0.05)，3～6月雖有增加趨勢(shì)，但差異不顯著。第2個(gè)月，新增踱步(0.34%)、吸生殖器(1.37%)、爬跨動(dòng)作(3.45%)行為。踱步、吸生殖器的行為于第3個(gè)月顯著上升(P< 0.05)，3～6月無顯著差異；爬跨行為隨時(shí)間的延長(zhǎng)稍有增加，但無明顯變化。吸腳趾行為(0.69%)出現(xiàn)在離乳后第3個(gè)月，其比例未隨時(shí)間的變化而發(fā)生改變。至第6個(gè)月，各行為的比例分別為59.31%、11.03%、5.86%、1.38%、3.45%、4.14%、0.69%(圖1)。

注：同種行為各月間比較，標(biāo)記中不含相同字母表示差異顯著(P < 0.05)。

2.2 團(tuán)抱行為

Wada等[7]將團(tuán)抱行為定義為非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物在休息或睡眠過程中，個(gè)體間通過相互擁抱、擠坐及其它肢體接觸而形成組合單位的一類行為。本研究中隨機(jī)分組為雌-雄同籠(53籠)、雌-雌同籠(49籠)、雄-雄同籠(43籠)3種情況，整個(gè)觀察階段出現(xiàn)雌-雄團(tuán)抱、雌-雌團(tuán)抱、雄-雄團(tuán)抱3種模式，雄-雄同籠的嬰猴團(tuán)抱行為發(fā)生率顯著低于另外兩種模式，雌-雌同籠團(tuán)抱發(fā)生率與雌-雄同籠比較，1月差異不顯著，2～6顯著高于雌-雄同籠(P< 0.05)。雌-雌團(tuán)抱第1個(gè)月發(fā)生率為19.44%，且2、3月顯著升高(P< 0.05)，3～6無顯著變化，第6個(gè)月發(fā)生率為83.33%；離乳后1個(gè)月，雌-雄團(tuán)抱發(fā)生率為18.75%，于2、3月顯著增加(P< 0.05)，3～6月呈上升趨勢(shì)，但差異不顯著，6月增加至53.75%；雄-雄團(tuán)抱發(fā)生率在第2月顯著增加，且3～6月顯著高于1、2月(P< 0.05)，3～6月變化不顯著(圖2)。

注：同種系列各月間比較，* P < 0.05；相同月份各系列間比較，# P < 0.05。

2.3 吸手指行為

雌性，雄性嬰猴均于離乳第1個(gè)月出現(xiàn)吸手指行為，其發(fā)生率分別為2.80%，2.72%，差異不顯著；雌、雄性嬰猴該行為發(fā)生率均隨時(shí)間的變化而增加，2月雌性嬰猴顯著低于雄性，3～6月雌性嬰猴均顯著高于雄性(P< 0.05)。雌性嬰猴發(fā)生率于2、3月顯著增加(P< 0.05)，3～6月有增加趨勢(shì)，但無顯著差異，第6個(gè)月雌性嬰猴的發(fā)生率為13.29 %；第2、3個(gè)月雄性嬰猴吸手指行為的發(fā)生率較1月顯著增加(P< 0.05)，3～6月改變不明顯(圖3)。

注：同種系列各月間比較，* P < 0.05；相同月份各系列間比較，# P < 0.05。

2.4 吸同伴身體部位的行為

吸同伴身體部位的行為包括吸食同伴的耳朵、頰囊、手臂、肚皮，生殖器等。離乳后第1個(gè)月即觀察到該種行為，且1至6個(gè)月雌性嬰猴出現(xiàn)該行為的比率均顯著高于雄性(P< 0.05)。雌性該行為發(fā)生率在1月(1.41%)至6月(9.09%)逐月顯著增加(P< 0.05)；雄性嬰猴于第2個(gè)月發(fā)生該行為(2.04%)，隨時(shí)間改變發(fā)生率稍有上升，無顯著差異(圖4)。

注：同種系列各月間比較，* P < 0.05；相同月份各系列間比較，# P < 0.05。

注：同種系列各月間比較，* P < 0.05；相同月份各系列間比較，# P < 0.05。

2.5 爬跨行為

在離乳后第2個(gè)月出現(xiàn)爬跨行為并伴有臀部沖刺動(dòng)作，分為雌-雄異性爬跨，雄-雄同性爬跨兩種情況，異性爬跨發(fā)生率(10.03%)顯著高于同性爬跨(6.79%)(P< 0.05)；在3月同性爬跨發(fā)生率顯著增加至13.79%，3～6月的觀察階段各發(fā)生率未發(fā)生明顯改變，同性爬跨顯著高于異性爬跨(P< 0.05)(圖5)。

2.6 踱步行為

雄性、雌性嬰猴分別于第2、3個(gè)月出現(xiàn)踱步行為，整個(gè)觀察階段雄性嬰猴的發(fā)生率均顯著高于雌性嬰猴(P< 0.05)，如圖6所示。雄性嬰猴該行為的發(fā)生率于3月顯著上升至2.04%，且顯著高于雌性嬰猴的發(fā)生率(P< 0.05)。

2.7 吸腳趾行為

雌性、雄性嬰猴均在第3個(gè)月出現(xiàn)吸腳趾行為，其發(fā)生率(0.70%，0.68%)無顯著性差異，且未隨時(shí)間的延長(zhǎng)而發(fā)生明顯改變(圖7)。

3 討論

行為對(duì)一個(gè)物種個(gè)體的生存、交流、建立社會(huì)關(guān)系以及維持種群發(fā)展都具有重要的作用[8]。嬰幼兒階段是個(gè)體發(fā)育的最初階段，這一時(shí)期，嬰幼兒的行為經(jīng)歷了從無到有、從簡(jiǎn)單到復(fù)雜的過程，神經(jīng)系統(tǒng)和心理也得到不斷的發(fā)育。研究嬰幼兒行為發(fā)生對(duì)研究成年個(gè)體行為和群體行為有重要意義[9]。母嬰分離是人 類生命早期應(yīng)激事件，發(fā)生于生命早期的負(fù)性應(yīng)激事件與個(gè)體成年期抑郁癥的發(fā)生密切相關(guān)，國(guó)內(nèi)外大多研究認(rèn)為母嬰分離能夠?qū)π律鷥旱纳窠?jīng)系統(tǒng)發(fā)育產(chǎn)生重大影響[10]，動(dòng)物研究也證實(shí)，早期不良應(yīng)激如母愛剝奪可誘發(fā)個(gè)體焦慮，精神分裂，抑郁樣行為[11]等。本研究中，對(duì)離乳后的嬰猴行為進(jìn)行為期6個(gè)月的觀察記錄，觀察到團(tuán)抱、踱步、吸腳趾、吸手指、吸生殖器、吸同伴身體，爬跨等7種行為。

團(tuán)抱行為在非人靈長(zhǎng)類中廣泛存在，在環(huán)境和社會(huì)因素的影響下，會(huì)呈現(xiàn)出多種模式。經(jīng)觀察發(fā)現(xiàn)，離乳后第1月即出現(xiàn)團(tuán)抱行為，在7種行為中發(fā)生率最高，可能是嬰猴通過團(tuán)抱來緩解因?qū)π颅h(huán)境存在恐懼而產(chǎn)生脅迫感。嬰猴團(tuán)抱時(shí)會(huì)用手輕輕地拍同伴的背部，并伴有上半身前后搖擺，類似于人類安撫情緒的擁抱。推測(cè)，團(tuán)抱行為除了具有保持體溫、預(yù)防天敵等作用外，可能也是一種傳遞感情的方式。馮曉麗[12]等將這種下肢不動(dòng)，上半身前后運(yùn)動(dòng)的行為定義為刻板行為。前3個(gè)月，出現(xiàn)團(tuán)抱行為的嬰猴個(gè)體顯著增加，4～6月趨于平穩(wěn)。雌性同籠的個(gè)體團(tuán)抱行為發(fā)生率顯著高于異性同籠，異性同籠顯著高于雄性同籠。提示恒河猴嬰猴發(fā)生團(tuán)抱行為可能受到性別的影響，本結(jié)果與齊曉光[13]的報(bào)道一致。

注：同種系列各月間比較，* P < 0.05；相同月份各系列間比較，# P < 0.05。

注：同種系列各月間比較，* P < 0.05；相同月份各系列間比較，# P < 0.05。

吸腳趾、吸手指、吸生殖器、吸同伴身體可歸類為吮吸行為。嬰幼兒階段吮吸需求非常強(qiáng)烈。當(dāng)吮吸需求得不到滿足，家庭破裂等造成的心理緊張，抑郁癥等都會(huì)引起嬰幼兒異常的吮吸行為。本文中嬰猴出現(xiàn)了多種吮吸行為，這可能與生活環(huán)境改變，同時(shí)母愛被剝奪兩種因素對(duì)嬰猴的情緒及心理造成嚴(yán)重的沖擊，嬰猴以吮吸這種異常的行為作為心理防衛(wèi)機(jī)制，來緩解內(nèi)心的焦慮。每種行為在整個(gè)觀察階段都呈逐漸增加的趨勢(shì)，雌性嬰猴吸同伴身體及吸手指的行為顯著高于雄性嬰猴，得出雌性嬰猴更易發(fā)生吮吸行為，可能是雌性更易受到負(fù)性應(yīng)激的影響。

有報(bào)道稱，川金絲猴嬰猴在4月齡時(shí)就出現(xiàn)了爬跨行為。本文中發(fā)現(xiàn)恒河猴嬰猴在離乳后第2個(gè)月，即約7月齡時(shí)出現(xiàn)爬跨行為，表現(xiàn)為雌雄異性、雄雄同性爬跨。雄性嬰猴采取雙手放在被爬跨者的腰部，雙腳扣住被爬跨者的腳踝的姿勢(shì)，伴有臀部沖刺動(dòng)作，這與任寶平的觀察結(jié)果相一致[14]。這種發(fā)生在嬰幼年動(dòng)物之間的爬跨行為，是無目的、不具有繁殖意義的行為。

離乳后第2個(gè)月觀察到部分雄性嬰猴來回沿著相同的路線踱步，無目的的不斷重復(fù)，雄性嬰猴較雌性嬰猴更易發(fā)生踱步。可能與離乳對(duì)嬰猴的情緒造成負(fù)面影響有關(guān)[15-16]。

母愛剝奪可導(dǎo)致恒河猴行為異常[17]，主要表現(xiàn)為自傷行為，刻板行為等抑郁樣行為?？贪逍袨榘▉砘仵獠?，吮吸手指或腳趾，緊緊抓住自己身體的某一部位，身體來回?fù)u晃等[12]。這與本研究觀察到的結(jié)果基本一致。出現(xiàn)此種行為可能與以下幾種機(jī)制有關(guān)。Kraemer[18]發(fā)現(xiàn)，幼兒時(shí)期的獼猴在不良生長(zhǎng)環(huán)境飼養(yǎng)，會(huì)改變其內(nèi)分泌，從而影響了其成年后的性格和行為。大量研究表明生命早期的母嬰分離可引起幼兒出現(xiàn)抑郁樣行為，而抑郁癥神經(jīng)內(nèi)分泌的改變表現(xiàn)為下丘腦-垂體-腎上腺軸(HPA軸)功能亢進(jìn)，從而改變垂體促腎上腺皮質(zhì)激素和血漿皮質(zhì)醇的合成與釋放，引起一系列的神經(jīng)生化改變，同時(shí)對(duì)大腦邊緣系統(tǒng)造成器質(zhì)性損害，尤其是損害海馬結(jié)構(gòu)，增加行為的異常[19]。其次，生命早期豐富環(huán)境能促進(jìn)腦發(fā)育與腦功能，對(duì)神經(jīng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)產(chǎn)生持久的影響，而早期應(yīng)激將影響關(guān)鍵時(shí)期腦發(fā)育，持續(xù)改變大腦結(jié)構(gòu)和內(nèi)分泌等指標(biāo)，限制海馬神經(jīng)的發(fā)生。腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF) 減少，5-羥色胺(5-HT)及5-羥色胺受體在大腦海馬中的表達(dá)減少，引起海馬抑制HPA軸活性的功能失效[20]，使HPA軸活性長(zhǎng)期改變是導(dǎo)致經(jīng)歷母嬰分離動(dòng)物出現(xiàn)行為異常的主要原因。本研究中發(fā)現(xiàn)雌性嬰猴更易發(fā)生刻板行為，這與臨床報(bào)道的女性更容易抑郁相符?？赡苁且?yàn)樵谪?fù)性應(yīng)激情況下雌激素影響下丘腦-垂體-腎上腺軸的平衡，使女性HPA軸活性增強(qiáng)，腎上腺過度增生，腎上腺皮質(zhì)激素濃度上升[21]。另有研究發(fā)現(xiàn)血小板內(nèi)5-羥色胺濃度有性別差異，女性低于男性，這是否是引起是雌性嬰猴更易發(fā)生刻板行為的另一個(gè)原因，還需進(jìn)一步的研究證實(shí)[22]。

動(dòng)物行為及行為的機(jī)制是了解生物學(xué)組成部分、生理學(xué)、組織形態(tài)學(xué)、生態(tài)學(xué)、遺傳學(xué)和進(jìn)化論等學(xué)科所必不可少的知識(shí)。通過對(duì)人工飼育恒河猴嬰猴離乳階段的行為觀察和分析，初步獲得和了解其一些常見的行為特點(diǎn)及規(guī)律。報(bào)道稱生命早期應(yīng)激可能影響成年后抑郁癥的發(fā)生，關(guān)于嬰猴成年后其行為是否會(huì)發(fā)生變化還有待進(jìn)一步研究。本研究初步探討了嬰猴離乳后出現(xiàn)異常行為的可能機(jī)制，不僅可以指導(dǎo)和提高嬰猴斷奶期間的飼養(yǎng)管理技術(shù)，同時(shí)也為研究人類嬰幼兒早期斷奶后心理和行為的變化，開展心理學(xué)、行為學(xué)等方面的評(píng)估實(shí)驗(yàn)提供較好的研究思路和模型。

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