羅小娟 曹 科 陳運生 黃寶興 肖麗霞 馬東禮 周家秀

·論著·

干式化學法檢測健康兒童青少年血清電解質和空腹血糖參考區(qū)間與相應的傳統(tǒng)參考區(qū)間差別不大

羅小娟1曹 科1陳運生1黃寶興1肖麗霞1馬東禮1周家秀2

目的 建立深圳地區(qū)3月齡至18周歲健康人群干式化學法血清K+、Na+、Cl-、總鈣(TCa)、總二氧化碳(TCO2)、空腹血糖(FBG)的參考區(qū)間值。方法 根據(jù)兒童青少年生長發(fā)育規(guī)律分為3月齡至3歲、～6歲、～12歲和～18歲組。標本來源為健康體檢常規(guī)檢測后的剩余標本。采用美國強生公司VITROS 350干式化學分析儀檢測血清K+、Na+、Cl-、TCa、TCO2和FBG水平，比較不同年齡組和不同性別間的差異，并確定6項檢測指標在3月齡至18歲健康人群中的參考區(qū)間值。結果 1 898名兒童青少年合格標本進入分析，其中男1 033名,女865名。3月齡至3歲組163名，～6歲組791名，～12歲組613名，～18歲組331名。①各年齡組男童TCa檢測結果均低于女童，～6歲組男童FBG檢測結果高于女童，差異均有統(tǒng)計學意義(P均<0.05)，其余各組不同性別間差異均無統(tǒng)計學意義(P均﹥0.05)。Na+、Cl-、TCa和FBG在同性別不同年齡組間差異均有統(tǒng)計學意義(P均<0.05)，K+和TCO2在同性別不同年齡組間差異均無統(tǒng)計學意義(P均﹥0.05)。②K+、Na+、Cl-、TCa、TCO2和FBG在3月齡至18歲健康人群中的參考區(qū)間值(P2.5～P97.5)分別為3.4～4.9、134～147、98～110、2.18～2.60、19～28和3.6～6.0 mmol·L-1。③空腹血糖受損(IFG)總檢出率為2.3%(男2.9%，女1.6%)。3月齡至3歲組未檢出IFG，～6歲、～12歲和～18歲組IFG檢出率分別為1.0%、3.4%和4.5%。各年齡組間IFG檢出率差異均有統(tǒng)計學意義(P均﹤0.05)，同一年齡組間男童IFG檢出率均高于女童(P均<0.05)。結論 以深圳地區(qū)3月齡至18歲健康兒童為人群的干式化學法血清K+、Na+、Cl-、TCa、TCO2和FBG的參考區(qū)間值在不同性別和年齡總體差別不大，與既往國內外相關研究差別不大。

電解質； 空腹血糖； 干式化學法； 參考區(qū)間值； 兒童； 青少年

血清鉀離子(K+)、鈉離子(Na+)、氯離子(Cl-)、總鈣(TCa)和總二氧化碳(TCO2)是判斷人機體水電解質和酸堿平衡紊亂的常規(guī)項目，空腹血糖(FBG)是判斷糖代謝情況及診斷糖尿病的標準。臨床實驗室檢測結果的解釋嚴重依賴于可靠的參考區(qū)間值[1]，而檢驗項目的參考區(qū)間值受種族、年齡、性別和生長發(fā)育等影響而存在差異[2]。在兒童和青少年中，多種檢測指標隨年齡的增長差異顯著[3～5]。Colantonio等[5]建立了加拿大多種族的40個常規(guī)生化指標(包括TCa和TCO2等)兒科參考區(qū)間值，但該研究僅對年齡和性別分組，未設立不同種族間的參考區(qū)間值。目前，中國所采用的多數(shù)檢測項目參考區(qū)間值主要來源于《全國臨床檢驗操作規(guī)程》等教科書、廠家說明書、國外文獻或自身實驗室小樣本研究，而教科書和廠家說明書引用的多為歐美人群的研究結果。隨著檢驗技術的發(fā)展和生活水平的提高，同時考慮到人種差異，以上參考區(qū)間值很可能已不適用于中國人群，為解決中國人群參考區(qū)間值標準缺乏的問題，2010年在國家衛(wèi)生部支持下，中華醫(yī)學會檢驗醫(yī)學分會啟動了“中國人群重要常規(guī)臨床檢驗項目參考區(qū)間的建立”研究，現(xiàn)已基本完成和公布了中國成人血清酶、電解質、蛋白質、血常規(guī)的參考區(qū)間值[2]，但尚未涉及兒科參考區(qū)間值的研究。目前，國內僅見兒童電解質和血糖的個別報道。在本課題組前期對學齡前健康兒童研究基礎上[6]，參照美國臨床和實驗室標準化協(xié)會(CLSI)的C28-A3文件[7]程序，于2011年9月至2013年8月采集3月齡至18歲健康人群靜脈血標本，建立深圳地區(qū)健康兒童和青少年干式化學法血清K+、Na+、Cl-、TCa、TCO2和FBG的參考區(qū)間值，為兒科疾病的診斷、治療和監(jiān)測提供參考。

1 方法

1.1 年齡分組 本研究根據(jù)兒童的生長發(fā)育規(guī)律[8]將兒童和青少年按年齡分為3月齡至3歲、～6歲、～12歲和～18歲組。

1.2 樣本量 按照CLSI C28-A3的文件[7]關于建立參考區(qū)間值的要求，每組至少需要240名健康兒童，男女各120名。

1.3 研究對象來源 3月齡至3歲和3～18歲研究對象取自我院兒童保健科體檢兒童，3～18歲研究對象也取自深圳市5個區(qū)(福田、南山、羅湖、寶安、龍崗)中小學和幼兒園集體健康體檢的兒童和青少年。

1.4 研究對象納入標準 體格發(fā)育評估在同年齡同性別P5～P95。

1.5 研究對象排除標準 ①正在治療性服用藥物，如抗生素、解熱鎮(zhèn)痛藥和抗結核病藥物等；②罹患心血管疾病，神經(jīng)肌肉病，血液病，肝膽疾病，糖尿病，腎病，佝僂病，自身免疫性疾病，過敏性疾病，甲狀腺功能亢進，甲狀腺功能減低，腫瘤，先天畸形(多指等)，營養(yǎng)、消化、吸收不良等疾病，骨骼肌損傷，各種外傷和疼痛；③體格檢查心臟、肺部聽診異常，扁桃體、肝、脾、淋巴結腫大，體溫異常；④有嗜煙及酗酒等不良習慣。

1.6 標本采集和運送 ①健康體檢要求體檢者于清晨空腹安靜坐姿或仰臥位抽取2 mL靜脈血置于帶分離膠的干燥管。②我院兒童保健科體檢兒童在我院采集靜脈血后送檢驗科后離心，學校體檢兒童在現(xiàn)場采血離心后避光冷藏送至我院檢驗科。離心血標本肉眼可見溶血、黃疸或脂血為不合格標本，不進入分析。需要說明的是，本研究血清電解質和空腹血糖參考區(qū)間值的測定所需血標本均來自于健康體檢的剩余標本。

1.7 實驗室檢測

1.7.1 儀器與試劑 美國強生VITROS 350干式化學分析系統(tǒng)，儀器配套校準品和試劑,質控品為美國伯樂BIO-RAD雙水平的質控血清。美國BD公司生產(chǎn)一次性真空采血器、真空采血管(內含促凝劑和血清分離膠)。

1.7.2 質量控制 儀器經(jīng)校準后每天用雙水平室內質控血清測定，所有實驗項目均在控，并參加國家衛(wèi)生部臨床檢驗中心的室間質量評價，符合質控要求。

1.7.3 檢測項目 所有血標本均要求采集離心后4 h內完成血清K+、Na+、Cl-、TCa、TCO2和FBG檢測?？崭寡鞘軗p(IFG)參照1999年WHO和國際糖尿病聯(lián)盟(IDF)標準[9]：FBG≥6.1 mmol·L-1且<7.0 mmol·L-1。

2 結果

2.1 一般情況 本研究共采集1 947份標本，其中49份為不合格標本，1 898名3月齡至18歲兒童青少年合格血標本納入分析，其中男1 033名,女865名,中位年齡5.9歲。每份合格標本均完成6項指標檢測。3～18歲兒童中1 381名來自學校，354名來自我院。3月齡至3歲組163名(男85名)，～6歲組791名(男428名)，～12歲組613名(男341名)，～18歲組331名(男179名)。其中3月齡至3歲組未達到設計時樣本量要求。

2.2 不同性別和年齡組各項指標檢測結果 如表1所示，血清K+、Na+、Cl-、TCa、TCO2和FBG在各年齡組不同性別間檢測結果均呈非正態(tài)分布。各年齡組男童TCa檢測結果均低于女童，～6歲組男童FBG檢測結果高于女童，差異均有統(tǒng)計學意義(P均<0.05)，其余各組不同性別間差異均無統(tǒng)計學意義(P均﹥0.05)。Na+、Cl-、TCa和FBG在同性別不同年齡組間差異均有統(tǒng)計學意義(P均<0.05)，K+和TCO2在同性別不同年齡組間差異均無統(tǒng)計學意義(P均﹥0.05)。各檢測項目與年齡spearman相關性分析顯示，K+和TCO2與年齡均無相關性(K+：r=-0.008,P=0.749;TCO2：r=-0.039,P=0.143)，Na+和FBG與年齡呈正相關(Na+:r=0.095,P=0.000;FBG:r=0.130,P=0.000)，TCa和Cl-與年齡呈負相關(TCa:r=-0.055,P=0.027;Cl-:r=-0.181,P=0.000)。

表1 3月齡至18周歲兒童和青少年不同性別和年齡組各項指標檢測結果[M(P25, P75)，mmol·L-1]

Tab 1 Reference intervals of six items for 1898 healthy children aged from 3 months to 18 years in different gender and age groups[M(P25, P75)，mmol·L-1]

GenderK+Na+1)Cl-1)TCa1)TCO2FBG1)3monthsto3yearsMale(n=85)4．3(3．9，4．4)140(136，141)103(99，105)2．37(2．24，2．47)2)20(18，24)4．7(4．0，5．4)Female(n=78)4．1(3．7，4．3)141(137，142)104(100，106)2．45(2．36，2．51)2)21(19，23)4．7(3．9，5．3)Total(n=163)4．2(3．7，4．4)139(137，141)103(102，105)2．42(2．32，2．48)20(19，23)4．7(3．9，5．5)-6yearsMale(n=428)4．2(4．0，4．4)141(140，143)106(105，107)2．43(2．37，2．49)2)24(23，26)4．9(4．7，5．1)2)Female(n=363)4．2(4．0，4．4)142(140，143)106(105，107)2．45(2．39，2．51)2)25(23，26)4．8(4．5，5．0)2)Total(n=791)4．2(4．0，4．4)142(140，143)106(105，107)2．44(2．39，2．50)24(23，26)4．8(4．6，5．1)-12yearsMale(n=341)4．0(3．7，4．3)140(138，143)104(102，106)2．35(2．28，2．43)2)23(21，27)5．0(4．5，5．4)Female(n=272)4．1(3．9，4．4)142(139，144)106(103，107)2．39(2．32，2．47)2)23(22，25)5．0(4．7，5．5)Total(n=613)4．0(3．8，4．3)141(138，143)105(102，107)2．36(2．30，2．44)23(22，25)5．0(4．6，5．5)-18yearsMale(n=179)4．1(3．8，4．8)142(140，144)104(102，105)2．38(2．31，2．44)2)23(22，24)5．2(4．6，5．5)Female(n=152)4．1(4．0，4．4)144(143，145)105(104，107)2．42(2．36，2．48)2)24(23，25)4．8(4．3，5．5)Total(n=331)4．1(3．9，4．8)143(140，145)104(102，106)2．40(2．33，2．46)23(22，25)5．2(4．5，5．5)TotalMale(n=1033)4．1(3．9，4．3)141(139，143)105(103，107)2．40(2．33，2．46)24(22，25)4．9(4．6，5．3)Female(n=865)4．2(4．0，4．4)142(140，144)106(104，107)2．44(2．37，2．50)24(23，25)4．8(4．5，5．1)Total(n=1898)4．1(3．9，4．4)141(139，143)105(104，107)2．41(2．35，2．48)24(22，25)4．9(4．6，5．3)

Notes 1) Comparison among different groups in same gender,P<0.05; 2) Comparion among different genders in same group,P<0.05

2.3 深圳地區(qū)健康兒童和青少年各項指標參考區(qū)間值 考慮到各項指標結果在不同年齡組或不同性別間差異不大，且從臨床應用角度出發(fā)，本研究參考區(qū)間值的建立不分年齡組和性別。血清K+、Na+、Cl-、TCa、TCO2和FBG在深圳地區(qū)3月齡至18歲健康人群中的參考區(qū)間值(P2.5～P97.5)分別為3.4～4.9、134～147、98～110、2.18～2.60、19～28和3.6～6.0 mmol·L-1(表2)。

2.4 不同性別和年齡組IFG檢出率比較 IFG總檢出率為2.3%(男2.9%，女1.6%)。3月齡至3歲組未檢出IFG，～6歲、～12歲和～18歲組IFG檢出率分別為1.0%(男1.4%，女0.6%)、3.4%(男4.1%，女2.6%)和4.5%(男5.6%，女3.3%)。各年齡組間IFG檢出率差異均有統(tǒng)計學意義(P均﹤0.05)，同一年齡組間男童IFG檢出率均高于女童(P均<0.05)。

3 討論

實驗數(shù)據(jù)用于臨床判斷健康與否，有賴于準確的實驗結果和適宜的參考區(qū)間值[5]，不恰當?shù)膮⒖紖^(qū)間值常導致誤診、誤治，故實驗室建立參考區(qū)間值工作意義重大[10]。近年來，圍繞建立兒童青少年血清電解質、FBG等檢測項目參考區(qū)間值，國外學者已相繼完成了相對系統(tǒng)的研究[1,5,11]；國內僅見個別報道[12,13]， 分別采用全血檢測血糖和血鈣，未見干式化學法檢測參考區(qū)間值的報道。隨著生化檢驗技術的發(fā)展，干式化學方法因具有簡便、靈活、快速、試劑保存時間長、維護簡單、無交叉污染、衛(wèi)生環(huán)保、抗干擾能力強、重復性好、線性范圍寬和結果準確等優(yōu)點[14,15]，成為目前主流的檢測技術。

本研究6項檢測指標參考區(qū)間值與廠家說明書[16]、國內成人[2,17]及國外兒童[11,18,19]參考區(qū)間值相比較，雖然部分項目在不同年齡或性別之間檢測結果有一定差異，但差異較小，建立的最終參考區(qū)間值與傳統(tǒng)參考區(qū)間值基本一致，可能與以下因素有關：①機體對電解質、血糖有精密的調節(jié)系統(tǒng)，使其在較窄范圍內保持穩(wěn)定；②目前電解質、血糖主流檢測技術成熟，方法較一致，結果可比性強；③對比的研究樣本量均較大，減少了抽樣誤差。本研究部分項目與國內其他地區(qū)結果比較有一定差異，如TCa檢測結果遠高于鄭州地區(qū)[13](采用Bohui-5100型原子吸收光譜法檢測全血鈣)，略高于重慶地區(qū)[20](采用日立-50型原子吸收光譜法檢測血清鈣)，與浙江地區(qū)[21]結果相近(貝克曼CX4生化分析儀偶氮胂Ⅲ比色法檢測血清鈣)。因血液鈣幾乎存在于血漿中，紅細胞內僅含微量血鈣，使用全血標本檢測血鈣，結果低于血清或血漿鈣；深圳與浙江同處于沿海發(fā)達地區(qū)，海產(chǎn)品豐富，鈣攝入較多，可能導致血鈣水平高于內陸重慶地區(qū)；也可能干式化學與濕化學檢測血鈣差異小于原子吸收光譜法有關。由此可見，標本類型、檢測方法、飲食習慣的不同可能會導致參考區(qū)間值的差異。

本研究結果顯示，雖然電解質、血糖在機體保持相對恒定，但也會隨年齡的變化而波動，Na+和FBG隨年齡增長有升高趨勢，而TCa和Cl-隨年齡增長有下降趨勢，與既往研究結果[12,13,22]一致?？赡芘c生長發(fā)育過程中胰島素抵抗、激素調節(jié)和飲食結構的變化等因素有關。而FBG高于2002全國[22]和2004年北京[12]研究結果，與2014年石家莊城市學齡兒童研究[23]結果相近?？赡芘c生活水平的快速提高、飲食方式的不同及改變等因素有關。按照WHO制定的IFG判斷標準，本研究深圳地區(qū)IFG總檢出率為2.3%，男童高于女童，且隨年齡增長檢出率增加。

本研究的不足之處和局限性：①因1～3月齡嬰兒極少至我院健康體檢，所以未納入這部分人群；②在分組方面，若能將嬰幼兒組分為3月齡至1歲(嬰兒組)和～3歲(幼兒組)會更合理，但因嬰幼兒組樣本量較小，未再作細分；③以肉眼判斷溶血、黃疸或脂血不合格標本，結果可能存在一定的不準確性。

致謝：感謝深圳市5個區(qū)(福田、南山、羅湖、龍崗、寶安)婦幼保健院和我院兒童保健科醫(yī)生，同時感謝為本課題提供大力幫助的各學校的老師。

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(本文編輯：張萍)

There is no significant difference in the reference intervals of children and adolescents serum electrolyte and fasting blood-glucose between dry chemistry analyzer and traditional methods

LUOXiao-juan1,CAOKe1,CHENYun-sheng1,HUANGBao-xing1,XIAOLi-xia1,MADong-li1,ZHOUJia-xiu2

(1DepartmentofClinicalLaboratory; 2DepartmentofChildrenHealthCare,ShenzhenChildren'sHospital,Shenzhen518038,China)

Corresponding Author：CAO Ke，E-mail:cocoa526878@126.com

ObjectiveTo investigate the reference intervals of serum kalium ion (K+), natrium ion (Na+), chlorine ion (Cl-), total calcium (TCa), total carbon dioxide (TCO2) and fasting blood glucose (FBG) among healthy children and adolescents(aged from 3 months to 18 years) by dry chemical system in Shenzhen.MethodsHealthy children and adolescents were divided into four groups by age according to the rule of growth and development: 3 months to 3 years, -6 years, -12 years and -18 years age groups. The serum was from the remaining specimens of routine physical examination after routine testing. Serum K+, Na+, Cl-, TCa, TCO2and FBG were detected by the VITROS 350 system, and the differences between different age groups and different genders were compared and the reference intervals of 6 items among healthy children and adolescents aged from 3 months to 18 years were established.ResultsA total of 1 898 qualified specimens from children and adolescents were recruited, including 1 033 males and 865 females, with 163, 791, 613 and 331 subjects for 3 months to 3 years group, -6 years group, -12 years group and -18 years group. ① TCa in boys was significantly lower than that in girls, but FBG of -6 years group in boys was significantly higher than that in girls, there was no significant difference between genders in other groups (P>0.05). Na+, Cl-,TCa and FBG significantly varied among age groups in each gender (P<0.05), however K+and TCO2did not (P>0.05). ②Reference intervals of serum K+, Na+, Cl-, TCa, TCO2and FBG were 3.4-4.9, 134-147, 98-110, 2.18-2.60, 19-28, 3.6-6.0 mmol·L-1respectively. ③The overall detection rate of IFG was 2.3% (2.9% for male and 1.6% for female).There was no detectale IFG in 3 months to 3 years group,the detection rate of IFG in -6 years, -12 years, -18 years groups was 1.0%, 3.4% and 4.5%, respectively, varying significantly among age groups (P<0.05), being more common in boys than that in girls (P<0.05).ConclusionReference intervals of serum K+, Na+, Cl-, TCa, TCO2and FBG are established by dry chemical system among healthy children and adolescents in Shenzhen. It has little difference in different ages, genders and previous studies of domestic and foreign.

Electrolyte; Fasting blood glucose; Dry chemical; Reference interval; Child; Adolescent

深圳市科技局資助項目：201203074；深圳市發(fā)改委重點實驗室資助項目：[2012]866

深圳市兒童醫(yī)院 1 檢驗科；2 兒童保健科 深圳，518038

曹科，E-mail:cocoa526878@126.com

10.3969/j.issn.1673-5501.2014.06.001

2014-09-03

2014-11-29)