吳 丹， 余永紅

(1.江西省藥品審評(píng)中心,江西南昌 330046;2.江西省食品藥品檢驗(yàn)所,江西南昌 330029)

殼聚糖膠囊大鼠30天喂養(yǎng)試驗(yàn)研究

吳 丹1， 余永紅2

(1.江西省藥品審評(píng)中心,江西南昌 330046;2.江西省食品藥品檢驗(yàn)所,江西南昌 330029)

[目的]觀察殼聚糖膠囊30 d喂養(yǎng)大鼠產(chǎn)生的毒性。[方法]設(shè)低(0.83 g/kg·bw)、中(1.67 g/kg·bw)、高(3.33g/kg·bw)劑量組與對(duì)照組，連續(xù)喂養(yǎng)大鼠30 d觀察動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育狀況、體重變化、平均進(jìn)食量，計(jì)算食物利用率、臟器重量及臟器/體重比值，分析血常規(guī)指標(biāo)和血生化指標(biāo)，并進(jìn)行大體解剖和組織病理分析。[結(jié)果]30 d喂養(yǎng)試驗(yàn)期間，動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育良好，各指標(biāo)與對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異(P>0.05)。大體解剖和組織病理分析未見(jiàn)與樣品有關(guān)的異常改變。[結(jié)論]樣品30 d喂養(yǎng)對(duì)大鼠未產(chǎn)生明顯毒副作用。

殼聚糖；膠囊；大鼠； 毒性;喂養(yǎng)試驗(yàn)

甲殼素是地球上第二大可再生資源[1]。甲殼素脫除乙?；蟮漠a(chǎn)物是殼聚糖，其化學(xué)名稱(chēng)為(1,4)-2-氨基-2-脫氧-β-D-葡聚糖[2]。殼聚糖具有增進(jìn)結(jié)腸功能、維持血清中脂質(zhì)的正常含量、降低飯后葡萄糖導(dǎo)致的生理反應(yīng)、抑制食欲、吸附膽汁酸、抗癌、降脂及降膽固醇、增強(qiáng)免疫力、保護(hù)胃腸、抗凝血等作用[3-4]，近年來(lái)已被廣泛用于保健食品開(kāi)發(fā)。殼聚糖膠囊為口服固體制品，其功效成分D-氨基葡萄糖鹽酸鹽含量大于85.1 g/100g。筆者設(shè)低、中、高3個(gè)劑量組與對(duì)照組，連續(xù)喂養(yǎng)大鼠30 d殼聚糖膠囊，觀察動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育狀況、體重變化、平均進(jìn)食量，計(jì)算食物利用率、臟器重量及臟器/體重比值，分析血常規(guī)指標(biāo)和血生化指標(biāo)，并進(jìn)行大體解剖和組織病理分析，觀察殼聚糖膠囊30 d喂養(yǎng)大鼠產(chǎn)生的毒性。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

1.1.1 受試物。殼聚糖膠囊內(nèi)容物由深圳某科技發(fā)展有限公司提供，人體口服推薦量為0.033 3 g/kg·bw(以成人體重60kg計(jì))。

1.1.2 試驗(yàn)動(dòng)物。清潔級(jí)SD大鼠由江西中醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科技中心提供。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)為SCXK(贛)2005-0001。

1.1.3 主要儀器。全自動(dòng)血液分析儀、全自動(dòng)生化分析儀。

1.2 方法

1.2.1 試驗(yàn)方法。將雌雄各40只SD大鼠隨機(jī)分成4組，低(0.83 g/kg·bw)、中(1.67 g/kg·bw)、高(3.33 g/kg·bw)劑量組(分別相當(dāng)于人體推薦量的25、50、100倍)和對(duì)照組；按體重的10%換算成飼料量，低、中、高劑量樣品分別以0.83%、1.67%、3.33%的比例與飼料混合，對(duì)照組喂食基礎(chǔ)飼料；動(dòng)物分籠飼養(yǎng)，自由攝食飲水，每天觀察動(dòng)物狀況，每周加食2次，記錄給食量和剩食量，并稱(chēng)重，計(jì)算攝食量和食物利用率。30 d后禁食16 h采血，禁食前、后(采血前)稱(chēng)重；以摘眼球方式采血，每只采血2份，1份做血常規(guī)檢測(cè)，1份做生化檢測(cè)，采血后經(jīng)頸椎脫臼將動(dòng)物處死并解剖，對(duì)肝、腎、脾、睪丸進(jìn)行稱(chēng)重，計(jì)算臟/體比值，取肝、腎、脾、胃、十二指腸、睪丸、卵巢作病理切片檢查。在對(duì)各劑量組動(dòng)物作大體檢查未發(fā)現(xiàn)明顯病變和生化指標(biāo)改變時(shí)，僅進(jìn)行高劑量組及對(duì)照組動(dòng)物主要臟器的組織病理學(xué)檢查[5]。

1.2.2 統(tǒng)計(jì)方法。利用SPSS11.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)檢驗(yàn)和方差齊性檢驗(yàn)，如果數(shù)據(jù)為正態(tài)分布的方差齊性，則采用單因素方差分析進(jìn)行組間比較；如果非正態(tài)分布或方差不齊，改用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行分析[6]。

2 結(jié)果與分析

觀察發(fā)現(xiàn)，各試驗(yàn)組動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育良好，行為正常，未見(jiàn)中毒和死亡。對(duì)80只大鼠作大體解剖觀察發(fā)現(xiàn)，各主要器官的尺寸、外觀形態(tài)、色澤等未見(jiàn)異常。對(duì)高劑量組及對(duì)照組大鼠做鏡檢發(fā)現(xiàn)，肝臟、腎臟、胃腸、脾臟及睪丸(卵巢)未見(jiàn)明顯的組織病理學(xué)變化。試驗(yàn)結(jié)果表明，各劑量組的平均進(jìn)食量、大鼠體重、周食物利用率、總食物利用率與對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異(P>0.05)(表1～2)；各劑量組雌雄大鼠的血常規(guī)指標(biāo)和生化指標(biāo)與對(duì)照組比較，無(wú)顯著性差異(表3～4)。各劑量組大鼠禁食后體重、肝、腎、脾、睪丸重量和肝/體、脾/體、腎/體、雄鼠睪/體比值與對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異(表5～6)。

3 結(jié)論

30 d喂養(yǎng)試驗(yàn)期間，各試驗(yàn)組動(dòng)物生長(zhǎng)正常，各劑量組體重、增重、食物利用率與對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異(P>0.05)，說(shuō)明受試物對(duì)大鼠的正常生長(zhǎng)發(fā)育和食物的吸收代

表1 殼聚糖膠囊對(duì)大鼠體重的影響

注：表中數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤。

表2 殼聚糖膠囊對(duì)大鼠食物利用率的影響

注：表中數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤。

表3 殼聚糖膠囊對(duì)大鼠血常規(guī)指標(biāo)的影響

注：表中數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤。HGB為血紅蛋白；RBC為紅細(xì)胞總數(shù)；HCT為紅細(xì)胞壓積；PLT為血小板數(shù)；WBC為白細(xì)胞計(jì)數(shù)；LYM為淋巴細(xì)胞；NEUT為中性粒細(xì)胞；MO為單核細(xì)胞；EO為嗜酸性粒細(xì)胞；BA為嗜堿性粒細(xì)胞。

表4 殼聚糖膠囊對(duì)大鼠生化指標(biāo)的影響

注：表中數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤。ALT為谷丙轉(zhuǎn)氨酶；AST為谷草轉(zhuǎn)氨酸；TP為總蛋白；ALB為白蛋白；TC為膽固醇；TG為甘油三酯；BUN為尿素氮；Cr為肝酐；GLU為血糖。

表5 殼聚糖膠囊對(duì)大鼠體重及臟器重量的影響 g

注：表中數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤。

表6 殼聚糖膠囊對(duì)大鼠臟器/體重比值的影響 %

注：表中數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤。

謝無(wú)明顯影響；大鼠的血常規(guī)、血生化指標(biāo)、臟器重量及臟器/體重比值與對(duì)照組比較，無(wú)顯著性差異(P>0.05)，臟器組織未出現(xiàn)明顯異常病理學(xué)改變?？梢?jiàn)在該試驗(yàn)條件下，受試物30 d喂養(yǎng)對(duì)大鼠未產(chǎn)生明顯毒副作用。

[1] 郭開(kāi)宇，趙謀明．甲殼素/殼聚糖的研究進(jìn)展及其在食品工業(yè)中的應(yīng)用[J]．食品與發(fā)酵工業(yè)，2000，26(1)：59-64．

[2] 馬寧，汪琴，孫勝玲，等．甲殼素和殼聚糖化學(xué)改性研究進(jìn)展[J]．化學(xué)進(jìn)展，2004，16(4) ：643-653．

[3] 李樹(shù)品，康戰(zhàn)燕，蘇學(xué)艷．殼聚糖與人體生理機(jī)能調(diào)節(jié)[J]．山東科學(xué)，1998，11(1)：57-62．

[4] 劉麗紅．殼聚糖及其衍生物在醫(yī)藥中的應(yīng)用[J]．福建化工，2001(1)：13-14．

[5] 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部．保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范[S]．北京：中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部，2003：961-1001．

[6] 王瑩，徐藝玫，杜勇，等．月見(jiàn)草油軟膠囊大鼠30天喂養(yǎng)試驗(yàn)觀察[J]．疾病預(yù)防控制通報(bào)，2013(4)：89-91．

Thirty Days Feeding Experiment of Chitosan Capsule on Rats

WU Dan et al

(Jiangxi Provincial Center for Drug Evaluation, Nanchang, Jiangxi 330046)

[Objective] To evaluate the toxicology and safety of chitosan capsule. [Methods] Setting low (0.83 g/kg·bw), medium (1.67 g/kg·bw) and high (3.33 g/kg·bw) dose groups and control group; feeding rats for 30 days; observing growth of rats, body weight change and the average intake; calculating food utilization rate, organ weight, and organ/body weight ratio; analyzing biochemical indexes and blood routine indexes; performing gross anatomy and histopathological analysis. [Results] During the experiment, there were no significant differences between the control group and experimental group (P>0.05). There were no abnormal changes associated with chitosan capsules in gross anatomy and histopathological analysis. [Conclusion] There is no obvious side effect of chitosan capsule on rats.

Chitosan; Capsule; Rat; Toxicology; Feeding experiment

吳丹(1983- )，女，江西臨川人，主管技師，碩士，從事保健食品研究。

2014-05-04

S 816.4

A

0517-6611(2014)15-04671-02