董紅，施幽林，龍明生

(湖北醫(yī)藥學院附屬十堰東風口腔醫(yī)院，湖北十堰442000)

·循證醫(yī)學·

口腔鱗癌組織中PTEN的表達及其意義的Meta分析

董紅，施幽林，龍明生

(湖北醫(yī)藥學院附屬十堰東風口腔醫(yī)院，湖北十堰442000)

目的探討PTEN在口腔鱗癌中的表達及其臨床意義。方法計算機檢索Cochrane Library、Embase、PubMed、CNKI、VIP、萬方、CBM等數(shù)據(jù)庫，按照納入與排除標準選擇研究文獻，并對文獻進行異質(zhì)性檢驗，以病例組及對照組比值比(OR值)為效評價應指標，然后應用RevMan5.0.1軟件對各研究原始數(shù)據(jù)進行Meta分析。結(jié)果最終進入Meta分析的文獻13篇，其中口腔鱗癌組710例，正?？谇火つそM323例。Meta分析結(jié)果顯示：PTEN在口腔鱗癌組與正?？谇火つφ战M[OR=0.03，95%CI(0.01，0.06)]、口腔鱗癌高、中分化組與低分化組[OR=5.08，95%CI(2.16，11.95)]、口腔鱗癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組與非淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組[OR=0.27，95%CI(0.09，0.85)]的表達差異均有統(tǒng)計學意義。結(jié)論基于目前相關研究，PTEN蛋白表達的下調(diào)在口腔鱗癌的發(fā)生、發(fā)展中起著重要作用，其表達的異?？勺鳛榕袛囝A后的參考指標之一。

口腔鱗癌；PTEN；Meta分析

口腔鱗狀細胞癌(Oral squamous cell carcinoma，OSCC)是口腔頜面部最常見的惡性腫瘤之一，對其發(fā)病機制及影響因素仍不十分了解。PTEN(Phosphatase and tensin homology deleted on chromo-some 10)是1997年發(fā)現(xiàn)的一種新抑癌基因[1]，與多種惡性腫瘤的發(fā)生和發(fā)展密切相關[2-3]，其表達下調(diào)促進腫瘤發(fā)展。在口腔鱗癌中也有PTEN表達異常的報道[4]，但PTEN能否成為口腔鱗癌預后指標尚待進一步探討。本研究擬通過Meta分析，對國內(nèi)、外多個運用免疫組化檢測OSCC組織中PTEN蛋白表達的文獻進行系統(tǒng)評價，進一步明確PTEN在口腔鱗癌中表達的意義，以期為口腔鱗癌的診斷、預后和治療提供參考。

1 資料與方法

1.1 文獻檢索通過Cochrane圖書館、PubMed、Embase、CNKI、維普、萬方、CBM等數(shù)據(jù)庫檢索1993年1月至2013年4月間公開發(fā)表的文獻，收集國內(nèi)、外關于PTEN與口腔鱗癌相關性的病例對照研究，并文獻追溯及手工檢索相關雜志、會議論文集、學位論文匯編等。檢索詞：英文數(shù)據(jù)庫：“OSCC OR oral squamous cell carcinoma”AND“PTEN”。中文數(shù)據(jù)庫：口腔鱗狀細胞癌、PTEN。語種限制為英文或中文。

1.2 文獻納入標準(1)病例組為病理診斷為口腔鱗癌的組織標本，對照組為正?？谇火つそM織(Normal oral mucosa tissue，NOM)；(2)各文獻研究方法相似，檢測方法為免疫組化；(3)提供病例組和對照組的例數(shù)，陽性率等具體數(shù)據(jù)。

1.3 排除標準(1)確定發(fā)表年限以外發(fā)表的國內(nèi)外文獻；(2)無對照組或?qū)φ战M為非正?？谇火つそM織；(3)重復報道、無法提取數(shù)據(jù)、質(zhì)量較差等無法利用的文獻研究。

1.4 統(tǒng)計學方法所有入選文獻及數(shù)據(jù)均由兩位研究者獨立分析和提取，遇有異議由兩位研究者討論后決定。采用RevMan 5.1.0軟件進行分析。資料為計數(shù)資料，采用比數(shù)比(OR)和95%的可信區(qū)間(CI)表達。數(shù)據(jù)合并時首先進行異質(zhì)性檢驗，若異質(zhì)性檢驗P＞0.1或I2≤50%，可以認為各個研究間無異質(zhì)性，采用固定效應模型(Fixed effect model)計算合并效應值；反之采用隨機效應模型(Rando effects model)。Meta分析結(jié)果以森林圖展示，潛在的發(fā)表偏倚用漏斗圖(Funnel plot)表示。

2 結(jié)果

2.1 文獻檢索結(jié)果文獻檢索流程見圖1。納入文獻的基本特征見表1。

圖1 文獻檢索流程圖

2.2 Meta分析結(jié)果

2.2.1 納入資料710例口腔鱗癌組織標本中PTEN陽性表達數(shù)為407例，而正?？谇火つφ战M323例中PTEN陽性表達數(shù)為323例。經(jīng)異質(zhì)性檢驗P=0.77，I2=0%，采用固定效應模型，Meta分析結(jié)果顯示：OR(95%CI)為0.03(0.01，0.06)，P＜0.000 01，表明PTEN在口腔鱗癌中陽性表達下調(diào)，且與正?？谇火つそM陽性表達比較差異有顯著統(tǒng)計學意義，見圖2。

表1 納入文獻的基本特征

圖2 PTEN蛋白在OSCC組與NOM組中陽性表達的META分析森林圖

2.2.2 PTEN在口腔鱗癌不同組織學分級中的表達共納入9篇文獻[6-9,11-13,15,17]，其中高分化組197例中141例陽性表達、中分化組211例中124例陽性表達，低分化組128例中陽性表達40例。將OSCC高、中分化組合并，再與低分化組進行比較分析。通過異質(zhì)性檢驗，高、中分化組與低分化組的各研究間有統(tǒng)計學異質(zhì)性(P=0.001，I2=69%)，采用隨機效應模型。結(jié)果顯示，兩組PTEN表達差異有統(tǒng)計學意義[OR=5.08，95%CI(2.16，11.95)，P=0.000 2＜0.001]。

2.2.3 PTEN在口腔鱗癌有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中的表達共納入6篇文獻[5,11-12,14,16-17]，其中淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組120例，非淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組208例。各研究間有統(tǒng)計學異質(zhì)性(P=0.002，I2=73%)，故采用隨機效應模型進行Meta分析。結(jié)果顯示，兩組PTEN表達差異有統(tǒng)計學意義[OR=0.27，95%CI(0.09，0.85)，P=0.02＜0.05]。

2.3 發(fā)表偏倚的評價PTEN在OSCC和正?？谇火つそM織中表達的Meta分析漏斗圖結(jié)果顯示，大部分研究在漏斗中軸附近或較對稱地分布在中軸兩邊，資料明顯呈大致倒“V”型分布，說明本研究受發(fā)表偏倚的影響程度較小，結(jié)論可靠，見圖3。

2.4 敏感性分析采用隨機效應模型對納入資料進行分析，OR(95%CI)為0.04(0.02～0.10)，合并效應量的檢驗結(jié)果Z=7.63，P＜0.000 01；去除研究中權重最大的Nisreen Sherif資料，結(jié)果：OR(95%CI)為0.03(0.01～0.06)，合并效應量的檢驗結(jié)果Z=8.91，P＜0.000 01；去除研究中權重最小的王君資料，結(jié)果：OR(95%CI)為0.04(0.02～0.10)，合并效應量的檢驗結(jié)果Z=7.63，P＜0.000 01，與剔除前結(jié)果基本一致，表明PTEN在OSCC組織中表達下調(diào)的分析結(jié)果具有好的穩(wěn)定性。

圖3 PTEN在OSCC組織中表達的Meta分析漏斗圖

3 討論

PTEN于1997年被發(fā)現(xiàn)，是迄今發(fā)現(xiàn)的第一個具有磷酸酶活性的抑癌基因。它定位于人類細胞第10q23染色體上，共有9個外顯子，mRNA長度為5.5 kb，主要功能區(qū)位于N端，由1 209個核苷酸編碼403個氨基酸組成的一條多肽鏈。該基因誘導腫瘤細胞凋亡，抑制腫瘤細胞的侵襲、分化、轉(zhuǎn)移。人類許多惡性腫瘤的發(fā)生與此基因密切相關。PTEN基因的突變和部分或全部丟失已經(jīng)在各種組織來源的腫瘤中被頻繁報道[18]，其結(jié)構、功能異常廣泛存在于人類多種惡性腫瘤中。近年來，頭頸鱗癌遺傳分析表明，5%～10%腫瘤中存在PTEN異常，Lee等[5]用免疫組化法對PTEN蛋白在OSCC的表達進行了研究，41例舌癌中有12例PTEN蛋白表示缺失，提示PTEN在口腔鱗癌的發(fā)生、發(fā)展中起著一定作用。

本研究通過Meta分析的方法，綜合分析了PTEN蛋白的表達在口腔鱗癌與正?？谇火つそM織之間的表達差異。結(jié)果顯示，PTEN在正?？谇火つづc口腔鱗癌組織中PTEN蛋白表達差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.000 01)，這一研究結(jié)果進一步表明口腔鱗癌組織中有PTEN蛋白表達異常，PTEN蛋白陽性表達的下調(diào)可能與口腔鱗癌的發(fā)生、發(fā)展有關。

本研究還分析了PTEN陽性表達與口腔鱗癌的組織學分化程度、淋巴結(jié)有無轉(zhuǎn)移之間的相關性。PTEN在各級OSCC中的表達差異無統(tǒng)計學意義，而在OSCC高分化、中分化組與低分化組比較后，發(fā)現(xiàn)差異具有統(tǒng)計學意義，提示低分化的OSCC與PTEN的關系比較密切。這與Squarize等[19]的研究結(jié)果相一致。另外，本研究還發(fā)現(xiàn)PTEN蛋白表達下調(diào)與口腔鱗癌轉(zhuǎn)移有相關性，有淋巴轉(zhuǎn)移PTEN蛋白表達明顯低于無淋巴轉(zhuǎn)移的口腔鱗癌，在有淋巴轉(zhuǎn)移的口腔鱗癌中PTEN蛋白的表達缺少或減弱，可能與抑制細胞粘附和遷移能力顯著降低有關。這與Won等[20]應用免疫組化染色方法，檢測的PTEN蛋白表達缺失與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關結(jié)果相一致。

綜上所述，通過Meta分析，在當前研究的基礎上，初步明確了PTEN在口腔鱗癌組織中陽性表達下調(diào)與正?？谇火つそM織相比較，差異具有統(tǒng)計學意義，提示PTEN在OSCC發(fā)生、發(fā)展過程中可能起著重要作用，這對于OSCC的診斷、治療及預后判斷具有重要意義。但本次Meta分析僅涉及單因素研究，未考慮到PTEN與其他因素的交互作用，一些混雜因素的影響也難以避免。所納入的13項研究，結(jié)果基本上均為陽性結(jié)果。因此本研究可能存在偏倚，所以有必要針對PTEN表達與口腔鱗癌的關系進行更深入的研究，以期得到更科學可靠的結(jié)論。

[1]Li J,Yen C,Liaw D,et al.PTEN,a putative protein tyrosine phosphatase gene mutated in human brain,breast,and ptostate cancer [J].Science,1997,275(5308):1943-1947.

[2]Hong TM,Yang PC,Peck K,et al.Profiling the downstream genes of tumor suppressor PTEN in lung cancer cells by complementary DNAmicroarray[J].Am J Respir CellMol Biol,2000,23(3): 355-363.

[3]Rhei E,Kang L,Bogomolniy F,et al.Mutation analysis of the putative tumor suppressor gene PTEN/MMAC1 in primary breast carcinomas[J].Cancer Res,1997,57(17):3657-3663.

[4]Squarize CH,Castilho RM,Santos Pinto D Jr.Immunohistochemical evidence of PTEN in oral squamous cell carcinoma and its correlation with the histological malignancy grading system[J].J Oral Pathol Med,2002,31(7):379-384.

[5]Lee JI,Soria JC,Hassan KA,et al.Loss of PTEN expression as a prognostic marker for tongue cancer[J].Arch Otolaryn Gol,Head Neck Surg,2001,127:1441-1445.

[6]李新青,唐海闊,吳江,等.抑癌基因PTEN在口腔鱗癌組織中表達及意義[J].醫(yī)學研究通訊,32(10):42-43.

[7]朱傳鳳,周健,王元銀,等.抑癌基因PTEN在口腔鱗癌中的表達及其意義[J].安徽醫(yī)科大學學報,2004,39(6):455-457.

[8]王鯤,黃克強.口腔鱗癌抑癌基因PTEN蛋白的表達[J].武警醫(yī)學,16(10):736-738.

[9]王穎,周傳香,高文信.PTEN、p53在口腔黏膜白斑和口腔鱗癌組織中的表達及意義[J].口腔醫(yī)學研究,2005,21(2):169-173.

[10]謝思明,沈麗佳,殷操,等.抑癌基因PTEN與PIP3、細胞周期蛋白Dl在口腔鱗癌中的表達及其相關性分析[J].中華口腔醫(yī)學雜志,2006,41(7):407-411.

[11]王君,郭福君,張建麗,等.Survivin和PTEN蛋白在口腔鱗狀細胞癌中的表達[J].河南醫(yī)科大學學報,2008,26(3):173-175.

[12]周鐵軍,向麗,龔莉,等.口腔鱗癌中PTEN基因表達與微血管密度的相關性研究[J].瀘州醫(yī)學院學報,2008,31(3)：248-4.

[13]殷操,謝思明,沈麗佳,等.DJ-1和PTEN在口腔鱗癌及癌前病變中的檢測及意義[J].廣東牙病防治,2011,19(11):563-565.

[14]方冬冬,顏雨春,楊全全.口腔鱗癌組織中PTEN、COX-2表達和MVD測定及意義[J].安徽醫(yī)科大學學報,2011,46(7):682-684.

[15]Alyasiri NS,Mehdi SJ,Alam MS,et al.PTEN-mediated AKT activation contributes to the reduced apoptosis among Indian oral squamous cell carcinoma patients[J].J Cancer Res Clin Oncol,2011,28 (10):103-109.

[16]彭為,黎春暉,聶敏海,等.細胞角蛋白19和抑癌基因PTEN在口腔鱗癌中的表達研究[J].瀘州醫(yī)學院學報,2012,35(1): 14-17.

[17]Rahmani A,Alzohairy M,Babiker AY,et al.Clinicopathological significance of PTEN and BCL2 expression in oral squamous cell carcinoma[J].Int J Clin Exp Pathol,2012,5(8):965-971.

[18]Kang YH,Lee HS,Kim WH.Promoter methylation and silencing of PTEN in gastric carcinoma[J].Lab Invest,2002,82(3):285-291.

[19]Squarize CH,Castilho RM,Santos Pinto D Jr.Immunohistochemical evidence of PTEN in oral squamous cell carcinoma and its correlation with the histological malignancy grading system[J].J Oral Pathol Med,2002,31(7):379-384.

[20]Won HS,Jung CK,Chun SH,et al.Difference in expression of EGFR,pAkt,and PTEN between oropharyngeal and oral cavity squamous cellc arcinoma[J].Oral Oncology,2012,48:985-990.

Meta-analysis of expression and clinical significance of PTEN in oral squamous cell carcinoma.

DONG Hong, SHI You-lin,LONG Ming-sheng.Shiyan Dongfeng Stomatiogical hospital Affiliated to Hubei University of Medicine, Shiyan 442000,Hubei,CHINA

ObjectiveTo investigate the expression and significance of Phosphatase and tensin homology deleted on chromo-some 10(PTEN)in oral squamous cell carcinoma(OSCC).MethodsThe published studies were searched in the Cochrane Library,Embase,PubMed,CNKI et al.Revman5.0.1 software was adopted to analyze the correlation of PTEN and OSCC.ResultsA total of 13 case-control studies were included in the study,the case group (OSCC group)was 710 cases and the control group was 323 cases(i.e.normal oral mucosa tissue,NOM).The meta analysis of results showed that the expression of PTEN in oral squamous cell carcinoma was more significantly different than normal tissue[OR(95%CI)]at 0.03(0.01,0.06)].PTEN was related to differentiated degree,lymph node metastasis(P＜0.05)of OSCC positively.ConclusionThe over expression of PTEN is closely related to occurrence and development of OSCC,which may be valuable to the diagnosis,treatment,and prognosis of OSCC.

Oral squamous cell carcinoma;PTEN;Meta analysis

R739.8

A

1003—6350（2014）01—0125—04

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.01.0048

2013-06-09)

龍明生。E-mail：longmingsheng74@163.com