曹臣 歐陽榮 張志國

牡丹皮飲片的有效期研究

曹臣 歐陽榮 張志國

目的 進行中藥材有效期方法研究。方法 選用易散失氣味、易變色的牡丹皮飲片作為研究對象 , 通過經(jīng)典恒溫實驗和留樣觀察實驗 , 用紫外色譜法測定其有效成分丹皮酚含量。推導出牡丹皮飲片中丹皮酚含量變化規(guī)律。結(jié)果 在經(jīng)典恒溫實驗中 , 丹皮酚含量變化符合一級反應(yīng)規(guī)律。牡丹皮在 20℃貯存 , 丹皮酚含量變化速度常數(shù) K20℃=1.194×10-4、該批牡丹皮的有效期為 226 d。經(jīng)典恒溫實驗推導的結(jié)果與留樣觀察有效成分含量的變化結(jié)果基本一致。結(jié)論 用經(jīng)典恒溫實驗預測牡丹皮飲片有效期的方法可行 , 得出有效期結(jié)論可靠。

牡丹皮；飲片 ；有效期

牡丹皮為毛茛科植物牡丹 (Paeonia suffruticosa Andr)的干燥根皮。具有清熱涼血 , 活血化瘀功能。用于治療溫毒發(fā)斑 ,吐血衄血 , 夜熱早涼 , 無汗骨蒸 , 經(jīng)閉痛經(jīng) , 癰腫瘡毒 , 跌撲傷痛。其主要化學成分 ：牡丹皮含酚類和單萜類 , 其中丹皮酚原苷和芍藥苷的含量最高 , 另外還含有揮發(fā)油以及苯甲酸、植物甾醇、蔗糖、葡萄糖、阿拉伯糖等。藥理研究證明丹皮酚具有鎮(zhèn)靜、催眠、抗驚厥、鎮(zhèn)痛、解熱和降溫藥理作用；抗血栓形成和抗動脈粥樣硬化 , 抗心律失常 , 降血壓藥理作用 ；免疫增強 , 抗炎 , 利尿藥理作用。因此丹皮酚是牡丹皮清熱涼血、活血化瘀功能的物質(zhì)基礎(chǔ) , 為牡丹皮的有效成分。

1 實驗儀器與材料

1. 1 儀器 超聲波清洗器 (昆山市淀山湖檢測儀器廠 )、萬分之一電子分析天平 (沈陽龍騰電子稱量儀器有限公司 )、UV-2501PC(日本島津 )。

1. 2 試劑 甲苯 (分析純 ), 注射用水。

1. 3 藥物 藥材 ：牡丹皮亙貨安徽產(chǎn) , 批號為 20120301。牡丹皮搶水洗 , 1 h 以后潤 1 次 , 放置 4 h, 切薄片 , 50℃烘干。

2 實驗方法與結(jié)果

2. 1 丹皮酚含量測定 紫外分光光度法 (2010 版藥典法 ) 取本品粗粉約 0.2 g, 精密稱定 , 用水蒸氣蒸餾 , 收集餾出液約450 ml, 加水至 500 ml, 搖勻。照分光光度法 (2010 版藥典附錄 VA), 在 247 nm 的波長處測定吸收度 , 按丹皮酚的吸收系數(shù)為 862 計算 , 即得。藥典規(guī)定本品按干燥品計算 , 含丹皮酚應(yīng)≥1.20%。

2. 2 經(jīng)典恒溫試驗 牡丹皮飲片樣品的制備 ：取牡丹皮飲片約 50 g, 用普通塑料袋包裝封口。置于電熱恒溫箱中 , 分別在 40、50、60、70℃下保存 , 選擇 4 個間隔時間。分別為70℃ 10、20、 30、40 h ；60℃ 20、40、60、80 h ；50℃ 40、80、120、160 h ；40℃ 80、160、240、320 h。取出用藥物粉碎機粉碎成粗粉備用。

牡丹皮含水量測定 ：依照藥典甲苯法 , 將所用玻璃儀器烘干 , 取本品粉末 20 g, 精密稱定 , 加無水甲苯 200 ml, 回流至上層液體清亮 , 讀取水的體積 , 計算含水量。

實驗結(jié)果 ：經(jīng)典恒溫實驗結(jié)果見表1, 表2。

表1 牡丹皮經(jīng)典恒溫實驗結(jié)果

表2 經(jīng)典恒溫實驗中丹皮酚的含量與時間的關(guān)系

當對數(shù)濃度與時間呈線性相關(guān)時 , 即 logC ＝ -Kt/2.303+ logC0 反應(yīng)為一級反應(yīng)。根據(jù) b 值得出各溫度下的速度常數(shù)K 值。然后根據(jù) Arrhenius 公式 , 計算出貯存條件下的速度常數(shù)K。

logK 對 1/T 進行回歸 , 求出回歸方程 ：

E 為活化能 , R 為氣體常數(shù) 8.319, A 為頻率因子 (見表3)。

藥典規(guī)定牡丹皮須置于陰涼處貯存即保存在 20℃以下。當溫度為 20℃時 , K20℃=1.194×10-4。

在 20℃下貯存 , 牡丹皮以干品計算 , 丹皮酚降至藥典規(guī)定的最低含量 1.2%, 經(jīng)歷的時間為 226 d, 即本批產(chǎn)品的有效期為 226 d, 結(jié)果見表3。

2. 3 留樣觀察 取牡丹皮飲片 50 g, 用普通塑料袋包裝并封口 , 置于恒溫箱中 20℃保存 , 分別于 1、2、3、6 個月、1 年后測定樣品的含水量和丹皮酚的含量。

牡丹皮留樣觀察結(jié)果與根據(jù)速度常數(shù)計算出丹皮酚含量比較見表4。

表3 牡丹皮中丹皮酚含量變化速度常數(shù)與溫度的關(guān)系

表4 牡丹皮留樣觀察結(jié)果

3 討論

3. 1 藥材有效期是在一定的貯藏條件下 , 其有效成分百分含量保持不低于藥典規(guī)定的期限。牡丹皮飲片 20℃貯存 , 其速度常數(shù)為 K20℃=1.194×10-4, 通過留樣觀察 , 計算的結(jié)果與實際測量值 , 0~6 個月丹皮酚含量二者基本相近 , 12 個月二者偏差稍大。在丹皮酚的含量 >1.2% 時 , 其降解符合一級反應(yīng) , 所得速度常數(shù)為 K20℃=1.194×10-4比較可靠。

3. 2 本實驗?zāi)档てげ捎盟芰洗b 50 g/包 , 與小袋分裝精制飲片的條件相似 , 可為其貯藏提供參考 , 建議牡丹皮切成飲片、制成小劑量包裝 , 不宜貯藏過久 , 保證在 200 d 左右用完。3. 3 本實驗曾嘗試用藥材牡丹皮亙貨做實驗 , 但由于亙貨造成的取樣誤差較大 , 掩蓋了由于溫度變化引起的含量改變 , 因此實驗不成功。若用藥材粉末作實驗 , 可消除含量不均造成的取樣誤差 , 但粉末與實際藥材狀態(tài)相距甚遠 , 并無實際意義。最后選用飲片做實驗時 , 反復多次實驗以消除取樣誤差。

3. 4 牡丹皮含有丹皮酚、揮發(fā)油 , 具有特殊的芳香氣 , 除注意嚴密包裝外 , 應(yīng)保持貯藏環(huán)境干燥陰涼 , 以免揮發(fā)“走氣”。由于牡丹皮含苯甲酸 , 有防腐作用 , 氣味能避蟲蛀 , 故不易遭受蟲害。但需防潮 , 以免發(fā)霉、變色。梅雨季前后可行日曬 ,保持干燥 , 即能安全貯藏。傳統(tǒng)經(jīng)驗證明 ：牡丹皮若與澤瀉同存 , 可避免其變色 , 也可防止?jié)蔀a生蟲。因此亦與其他藥材共貯 , 起防蟲作用。

牡丹皮含有多種成分 , 以丹皮酚外其他成分作指標 , 觀察其有效期 , 會有什么樣結(jié)果 , 期待進一步實驗。

Study on the validity of decoction pieces of cortex moudan

CAO Chen, OUYANG Rong, ZHANG Zhi- guo Department of Pharmaceutical, First Affiliated Hospital of Hunan College of Chinese Traditional Medicine, Changsha 410007, China

Objective To study the validity of Chinese traditional medicinal materials. Methods Classics constant temperature experiment and sample reserved experiment were used for study decoction pieces of cortex moudan, which was easy for cent loss and color change. Ultraviolet chromatography was used to determine the content of Paeonol. The change pattern of paeonol was deduced. Results In classics constant temperature experiment, the content change of paeonol met the regular pattern of one level. Stored in 20℃ , the validity of the pieces of cortex moudan was 226 d and the speed constant of paeonol is K20℃=1.194×10-4. The content change of paeonol by calculation was consistent with the results of sample reserved for observation. Conclusion It is feasible to apply classics constant temperature experiment to calculate the validity, and the result is reliable.

Cortex moudan; Decoction pieces; Validity

2014-05-08］

國家中醫(yī)藥管理局名老中醫(yī)藥專家傳承工作室建設(shè)項目

410007 湖南中醫(yī)藥大學附屬第一醫(yī)院藥學部

張志國