劉向東等

摘 要：該試驗(yàn)旨在研究常青白參顆粒對(duì)兔球蟲病的防治效果。選用（35±2）日齡仔兔80只，隨機(jī)分為4個(gè)處理組，每組20只，分別為空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、陽性藥物組和中藥防治組。采用人工接種球蟲孢子化卵囊的方法建立實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。

關(guān)鍵詞：常青白參顆粒；兔球蟲?。换瘜W(xué)藥物；藥效

中圖分類號(hào)：S858.291 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：2095-6835（2014）07-0123-02

兔球蟲病是嚴(yán)重危害養(yǎng)兔生產(chǎn)的寄生蟲病，是由艾美耳屬的多種球蟲寄生在腸道和肝臟上皮細(xì)胞內(nèi)引起的一種原蟲病。該病分布廣、傳染快、死亡率高，特別是4月齡內(nèi)的仔兔最易感染，而且對(duì)不同品種、年齡的兔都具有易感性。根據(jù)感染的種類和寄生的部位不同，可分為腸型、肝型和混合型，但在臨床上多見混合型。目前，對(duì)該病的控制主要采用藥物防治和疫苗接種兩種手段。用于防治球蟲病的藥物以化學(xué)藥物為主，但這些化學(xué)藥物的長(zhǎng)期使用易產(chǎn)生耐藥性，使畜產(chǎn)品化學(xué)藥物殘留而影響人類的健康。使用球蟲疫苗可以防治耐藥性的產(chǎn)生，但是，強(qiáng)毒苗和弱毒苗可能造成球蟲病原的擴(kuò)散和毒力返強(qiáng)，球蟲基因工程疫苗目前還處于實(shí)驗(yàn)室研究階段。藥物的毒性和殘留日益受到了人們的重視，一些毒性大、安全性低的化學(xué)合成抗球蟲藥物逐漸被淘汰，而且要研究生產(chǎn)一種新型的高效、低毒、安全的化學(xué)合成抗球蟲藥物十分困難，且費(fèi)用昂貴。中藥相對(duì)化學(xué)藥物有諸多優(yōu)點(diǎn)，比如毒副作用小、使用安全、不易產(chǎn)生耐藥性和藥物殘留等?，F(xiàn)已開發(fā)出許多有抗球蟲效果的中藥復(fù)方制劑和添加劑應(yīng)用于臨床。但由于制劑水平低下（主要以散劑為主）和組方龐大等原因，導(dǎo)致很多復(fù)方的臨床療效不明顯。山西有豐富的黨參資源，且潞黨參為黨參地道藥材。為了對(duì)黨參藥材進(jìn)行有效的開發(fā)和利用，課題組在中獸醫(yī)藥理論的指導(dǎo)下，結(jié)合球蟲病的發(fā)病特點(diǎn)，精選常山、青蒿、白頭翁、黨參4味中藥，研制成了防治兔球蟲病的新型中獸藥——常青白參顆粒。該試驗(yàn)以人工感染兔球蟲卵囊疾病為模型，研究了常青白參顆粒對(duì)兔球蟲病的防治效果。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)藥物

常青白參顆粒：由常山、青蒿、白頭翁、黨參4味中藥組成，由山西省新型中獸藥協(xié)同創(chuàng)新基地研制而成，規(guī)格為50 g/袋（1 g相當(dāng)于原生藥7.15 g）。

地克株利溶液：購(gòu)于四川齊金動(dòng)物藥業(yè)有限公司，規(guī)格為100 mL∶0.5 g。

1.2 攻毒用卵囊

試驗(yàn)所用的卵囊分離自山西臨汾某養(yǎng)兔場(chǎng)，按漂浮法收集卵囊，將收集到的卵囊經(jīng)3 000 r/min離心5 min，取沉淀物置于含有質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2.5%的重鉻酸鉀溶液的平皿中，29 ℃恒溫孵育3 d，卵囊孢子化后貯存于4 ℃的冰箱中備用。

1.3 試驗(yàn)動(dòng)物及分組設(shè)計(jì)

選用體重相近的（35±2）日齡斷奶幼兔80只，經(jīng)飽和鹽水漂浮法檢查，糞便中均無卵囊。隨機(jī)分為4個(gè)處理組，每組20只，分別為空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、陽性藥物組、中藥治療組?？瞻讓?duì)照組不感染球蟲卵囊，也不用藥。其余各組兔均經(jīng)口感染5×105個(gè)球蟲卵囊。模型對(duì)照組感染前后不用藥；陽性藥物組從感染當(dāng)天開始，在飲水中添加地克珠利溶液（每100 mL兌水500 L），連用14 d；中藥治療組從感染當(dāng)天開始，灌服常青白參顆粒（用純凈水稀釋，每50 g用水1 000 mL），10 mL/只，1次/d，連用14 d。

1.4 測(cè)定指標(biāo)與方法

球蟲感染當(dāng)天對(duì)所有的兔進(jìn)行稱重，隨后在球蟲感染14 d時(shí)，稱重、剖檢、取樣。

1.4.1 相對(duì)增重率

相對(duì)增重率（%）=給藥組或感染不投藥組平均增重率/不感染不投藥組平均增重×100%.

1.4.2 存活率

存活率（%）=組內(nèi)存活兔/組內(nèi)總兔數(shù)×l00%.

1.4.3 病變值

根據(jù)病變的嚴(yán)重程度，用Johnson標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行病變記分，具體記分方法為：腸道壁無肉眼可見病變者記為0分；腸道壁有少量散在的淤血點(diǎn)，腸道壁不增厚，內(nèi)容物正常者記為1分；腸道壁有較多的淤血點(diǎn)，腸道內(nèi)容物明顯帶血，腸道壁增厚，盲腸內(nèi)容物正常者記為2分；腸道有較多血液或有盲腸芯（血凝塊或灰白色干酪樣塊狀物）、腸道壁明顯增厚者記為3分：腸道充滿大量血液或盲腸芯很大，致使盲腸腫大或死亡者記為4分，對(duì)每只兔分別記分后算出各組的平均病變并記分，再按下式計(jì)算每組的病變值：病變值 = 組內(nèi)平均病變記分×10.

1.4.4 平均卵囊值

取1 g腸道內(nèi)容物于10 mL水中，充分?jǐn)嚢璩蓱乙汉?，用微量移液器吸? μL于載玻片上，在顯微鏡下計(jì)數(shù)卵囊數(shù)量，重復(fù)3次。用3次的平均數(shù)算出1 g腸道內(nèi)容物中的卵囊數(shù)，按下式算出克卵囊數(shù)（Oocyst pergram，OPG）：

克卵囊數(shù)=l g腸道內(nèi)容物的卵囊數(shù)×10. （1）

當(dāng)0≤OPG<0.1時(shí)，卵囊值為0；當(dāng)0.1≤OPG<1時(shí)，卵囊值為1；當(dāng)1≤OPG<6時(shí)，卵囊值為10；當(dāng)6≤OPG<11時(shí)，卵囊值為20；當(dāng)OPG≥11時(shí)，卵囊值為40.

1.4.5 抗球蟲指數(shù)

按以下方法計(jì)算藥物的抗球蟲指數(shù)（Anticoccidial Index，ACI）：抗球蟲指數(shù)（ACI）=（相對(duì)增重率+存活率）-（病變值+平均卵囊值）。

判定標(biāo)準(zhǔn)為：ACI≥180者為高效；180>ACI≥160者為中效；160>ACI≥120者為低效；ACI<120者為無效。

由表1可知，中藥治療組的相對(duì)增重率為92.48%，存活率為100%，抗球蟲指數(shù)為186.48，療效達(dá)到高效。陽性對(duì)照藥地克珠利的相對(duì)增重率為73.94%，存活率為95%，抗球蟲指數(shù)為146.94，療效僅為低效。試驗(yàn)結(jié)果表明，常青白參顆粒具有明顯的抗球蟲作用，其臨床療效優(yōu)于陽性對(duì)照藥地克珠利。

3 討論

該試驗(yàn)除了空白對(duì)照組外，其他試驗(yàn)組在球蟲感染后均表現(xiàn)出不同程度的臨床癥狀，比如精神不振、采食量減少、排血便等。模型對(duì)照組的相對(duì)增重率為46.25%，病變值為33，存活率為75%，抗球蟲指數(shù)為48.25，這表明人工感染模型成功建立。常青白參顆粒是課題組根據(jù)中獸醫(yī)學(xué)理論，結(jié)合球蟲病的發(fā)病特點(diǎn)以祛除病蟲、清熱解毒燥濕、涼血止血、益氣補(bǔ)血為治法，精選常山、青蒿、白頭翁、黨參4味藥，在現(xiàn)代中藥研究成果的基礎(chǔ)上，采用現(xiàn)代制藥技術(shù)研制而成的純中藥顆粒劑。方中常山苦、辛、寒，入肝、肺經(jīng)，抗瘧殺蟲、清熱利水，為治瘧要藥。青蒿苦、辛、寒，入肝、膽、腎經(jīng)，退虛熱、解暑熱，截瘧。白頭翁苦、寒，入大腸、肝、胃經(jīng)，清熱解毒、涼血止痢、殺蟲截瘧。青蒿、白頭翁為輔藥，協(xié)助常山抗瘧殺蟲，兼有清熱解毒、涼血止痢之效。黨參甘、平，入脾、肺經(jīng)，補(bǔ)脾益氣、生津補(bǔ)血。黨參作為佐藥，期藥效主要體現(xiàn)在以下兩方面：①呵護(hù)胃氣，克制前三味藥苦寒傷胃的副作用；②與前三味藥的祛邪功效形成互補(bǔ)，達(dá)到“祛邪兼扶正”的目的。該試驗(yàn)結(jié)果表明，常青白參顆粒的抗球蟲指數(shù)為186.48，具有明顯的抗球蟲作用，其臨床療效優(yōu)于陽性對(duì)照藥地克珠利。此試驗(yàn)結(jié)果為后續(xù)擴(kuò)大臨床試驗(yàn)提供了可靠的依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

[1]劉以民，彭光林.地克珠利、鹽霉素、氯苯胍對(duì)兔球蟲病的影響[J].中國(guó)養(yǎng)兔雜志，2008（11）：25-26.

[2]宋鴻雁，邵義祥.國(guó)內(nèi)兔球蟲病流行現(xiàn)狀及防控研究進(jìn)展[J].畜牧與獸醫(yī)，2013（9）：89-91.

[3]朱樓英，何忠平，余建國(guó).兔球蟲病藥物防治的進(jìn)展[J].福建畜牧獸醫(yī)，2010，32（3）：35-36.

[4]許金俊.動(dòng)物寄生蟲病學(xué)實(shí)驗(yàn)教程[M].南京：河海大學(xué)出版社，2007.

摘 要：該試驗(yàn)旨在研究常青白參顆粒對(duì)兔球蟲病的防治效果。選用（35±2）日齡仔兔80只，隨機(jī)分為4個(gè)處理組，每組20只，分別為空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、陽性藥物組和中藥防治組。采用人工接種球蟲孢子化卵囊的方法建立實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。

關(guān)鍵詞：常青白參顆粒；兔球蟲??；化學(xué)藥物；藥效

中圖分類號(hào)：S858.291 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：2095-6835（2014）07-0123-02

兔球蟲病是嚴(yán)重危害養(yǎng)兔生產(chǎn)的寄生蟲病，是由艾美耳屬的多種球蟲寄生在腸道和肝臟上皮細(xì)胞內(nèi)引起的一種原蟲病。該病分布廣、傳染快、死亡率高，特別是4月齡內(nèi)的仔兔最易感染，而且對(duì)不同品種、年齡的兔都具有易感性。根據(jù)感染的種類和寄生的部位不同，可分為腸型、肝型和混合型，但在臨床上多見混合型。目前，對(duì)該病的控制主要采用藥物防治和疫苗接種兩種手段。用于防治球蟲病的藥物以化學(xué)藥物為主，但這些化學(xué)藥物的長(zhǎng)期使用易產(chǎn)生耐藥性，使畜產(chǎn)品化學(xué)藥物殘留而影響人類的健康。使用球蟲疫苗可以防治耐藥性的產(chǎn)生，但是，強(qiáng)毒苗和弱毒苗可能造成球蟲病原的擴(kuò)散和毒力返強(qiáng)，球蟲基因工程疫苗目前還處于實(shí)驗(yàn)室研究階段。藥物的毒性和殘留日益受到了人們的重視，一些毒性大、安全性低的化學(xué)合成抗球蟲藥物逐漸被淘汰，而且要研究生產(chǎn)一種新型的高效、低毒、安全的化學(xué)合成抗球蟲藥物十分困難，且費(fèi)用昂貴。中藥相對(duì)化學(xué)藥物有諸多優(yōu)點(diǎn)，比如毒副作用小、使用安全、不易產(chǎn)生耐藥性和藥物殘留等?，F(xiàn)已開發(fā)出許多有抗球蟲效果的中藥復(fù)方制劑和添加劑應(yīng)用于臨床。但由于制劑水平低下（主要以散劑為主）和組方龐大等原因，導(dǎo)致很多復(fù)方的臨床療效不明顯。山西有豐富的黨參資源，且潞黨參為黨參地道藥材。為了對(duì)黨參藥材進(jìn)行有效的開發(fā)和利用，課題組在中獸醫(yī)藥理論的指導(dǎo)下，結(jié)合球蟲病的發(fā)病特點(diǎn)，精選常山、青蒿、白頭翁、黨參4味中藥，研制成了防治兔球蟲病的新型中獸藥——常青白參顆粒。該試驗(yàn)以人工感染兔球蟲卵囊疾病為模型，研究了常青白參顆粒對(duì)兔球蟲病的防治效果。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)藥物

常青白參顆粒：由常山、青蒿、白頭翁、黨參4味中藥組成，由山西省新型中獸藥協(xié)同創(chuàng)新基地研制而成，規(guī)格為50 g/袋（1 g相當(dāng)于原生藥7.15 g）。

地克株利溶液：購(gòu)于四川齊金動(dòng)物藥業(yè)有限公司，規(guī)格為100 mL∶0.5 g。

1.2 攻毒用卵囊

試驗(yàn)所用的卵囊分離自山西臨汾某養(yǎng)兔場(chǎng)，按漂浮法收集卵囊，將收集到的卵囊經(jīng)3 000 r/min離心5 min，取沉淀物置于含有質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2.5%的重鉻酸鉀溶液的平皿中，29 ℃恒溫孵育3 d，卵囊孢子化后貯存于4 ℃的冰箱中備用。

1.3 試驗(yàn)動(dòng)物及分組設(shè)計(jì)

選用體重相近的（35±2）日齡斷奶幼兔80只，經(jīng)飽和鹽水漂浮法檢查，糞便中均無卵囊。隨機(jī)分為4個(gè)處理組，每組20只，分別為空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、陽性藥物組、中藥治療組?？瞻讓?duì)照組不感染球蟲卵囊，也不用藥。其余各組兔均經(jīng)口感染5×105個(gè)球蟲卵囊。模型對(duì)照組感染前后不用藥；陽性藥物組從感染當(dāng)天開始，在飲水中添加地克珠利溶液（每100 mL兌水500 L），連用14 d；中藥治療組從感染當(dāng)天開始，灌服常青白參顆粒（用純凈水稀釋，每50 g用水1 000 mL），10 mL/只，1次/d，連用14 d。

1.4 測(cè)定指標(biāo)與方法

球蟲感染當(dāng)天對(duì)所有的兔進(jìn)行稱重，隨后在球蟲感染14 d時(shí)，稱重、剖檢、取樣。

1.4.1 相對(duì)增重率

相對(duì)增重率（%）=給藥組或感染不投藥組平均增重率/不感染不投藥組平均增重×100%.

1.4.2 存活率

存活率（%）=組內(nèi)存活兔/組內(nèi)總兔數(shù)×l00%.

1.4.3 病變值

根據(jù)病變的嚴(yán)重程度，用Johnson標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行病變記分，具體記分方法為：腸道壁無肉眼可見病變者記為0分；腸道壁有少量散在的淤血點(diǎn)，腸道壁不增厚，內(nèi)容物正常者記為1分；腸道壁有較多的淤血點(diǎn)，腸道內(nèi)容物明顯帶血，腸道壁增厚，盲腸內(nèi)容物正常者記為2分；腸道有較多血液或有盲腸芯（血凝塊或灰白色干酪樣塊狀物）、腸道壁明顯增厚者記為3分：腸道充滿大量血液或盲腸芯很大，致使盲腸腫大或死亡者記為4分，對(duì)每只兔分別記分后算出各組的平均病變并記分，再按下式計(jì)算每組的病變值：病變值 = 組內(nèi)平均病變記分×10.

1.4.4 平均卵囊值

取1 g腸道內(nèi)容物于10 mL水中，充分?jǐn)嚢璩蓱乙汉?，用微量移液器吸? μL于載玻片上，在顯微鏡下計(jì)數(shù)卵囊數(shù)量，重復(fù)3次。用3次的平均數(shù)算出1 g腸道內(nèi)容物中的卵囊數(shù)，按下式算出克卵囊數(shù)（Oocyst pergram，OPG）：

克卵囊數(shù)=l g腸道內(nèi)容物的卵囊數(shù)×10. （1）

當(dāng)0≤OPG<0.1時(shí)，卵囊值為0；當(dāng)0.1≤OPG<1時(shí)，卵囊值為1；當(dāng)1≤OPG<6時(shí)，卵囊值為10；當(dāng)6≤OPG<11時(shí)，卵囊值為20；當(dāng)OPG≥11時(shí)，卵囊值為40.

1.4.5 抗球蟲指數(shù)

按以下方法計(jì)算藥物的抗球蟲指數(shù)（Anticoccidial Index，ACI）：抗球蟲指數(shù)（ACI）=（相對(duì)增重率+存活率）-（病變值+平均卵囊值）。

判定標(biāo)準(zhǔn)為：ACI≥180者為高效；180>ACI≥160者為中效；160>ACI≥120者為低效；ACI<120者為無效。

由表1可知，中藥治療組的相對(duì)增重率為92.48%，存活率為100%，抗球蟲指數(shù)為186.48，療效達(dá)到高效。陽性對(duì)照藥地克珠利的相對(duì)增重率為73.94%，存活率為95%，抗球蟲指數(shù)為146.94，療效僅為低效。試驗(yàn)結(jié)果表明，常青白參顆粒具有明顯的抗球蟲作用，其臨床療效優(yōu)于陽性對(duì)照藥地克珠利。

3 討論

該試驗(yàn)除了空白對(duì)照組外，其他試驗(yàn)組在球蟲感染后均表現(xiàn)出不同程度的臨床癥狀，比如精神不振、采食量減少、排血便等。模型對(duì)照組的相對(duì)增重率為46.25%，病變值為33，存活率為75%，抗球蟲指數(shù)為48.25，這表明人工感染模型成功建立。常青白參顆粒是課題組根據(jù)中獸醫(yī)學(xué)理論，結(jié)合球蟲病的發(fā)病特點(diǎn)以祛除病蟲、清熱解毒燥濕、涼血止血、益氣補(bǔ)血為治法，精選常山、青蒿、白頭翁、黨參4味藥，在現(xiàn)代中藥研究成果的基礎(chǔ)上，采用現(xiàn)代制藥技術(shù)研制而成的純中藥顆粒劑。方中常山苦、辛、寒，入肝、肺經(jīng)，抗瘧殺蟲、清熱利水，為治瘧要藥。青蒿苦、辛、寒，入肝、膽、腎經(jīng)，退虛熱、解暑熱，截瘧。白頭翁苦、寒，入大腸、肝、胃經(jīng)，清熱解毒、涼血止痢、殺蟲截瘧。青蒿、白頭翁為輔藥，協(xié)助常山抗瘧殺蟲，兼有清熱解毒、涼血止痢之效。黨參甘、平，入脾、肺經(jīng)，補(bǔ)脾益氣、生津補(bǔ)血。黨參作為佐藥，期藥效主要體現(xiàn)在以下兩方面：①呵護(hù)胃氣，克制前三味藥苦寒傷胃的副作用；②與前三味藥的祛邪功效形成互補(bǔ)，達(dá)到“祛邪兼扶正”的目的。該試驗(yàn)結(jié)果表明，常青白參顆粒的抗球蟲指數(shù)為186.48，具有明顯的抗球蟲作用，其臨床療效優(yōu)于陽性對(duì)照藥地克珠利。此試驗(yàn)結(jié)果為后續(xù)擴(kuò)大臨床試驗(yàn)提供了可靠的依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

[1]劉以民，彭光林.地克珠利、鹽霉素、氯苯胍對(duì)兔球蟲病的影響[J].中國(guó)養(yǎng)兔雜志，2008（11）：25-26.

[2]宋鴻雁，邵義祥.國(guó)內(nèi)兔球蟲病流行現(xiàn)狀及防控研究進(jìn)展[J].畜牧與獸醫(yī)，2013（9）：89-91.

[3]朱樓英，何忠平，余建國(guó).兔球蟲病藥物防治的進(jìn)展[J].福建畜牧獸醫(yī)，2010，32（3）：35-36.

[4]許金俊.動(dòng)物寄生蟲病學(xué)實(shí)驗(yàn)教程[M].南京：河海大學(xué)出版社，2007.

摘 要：該試驗(yàn)旨在研究常青白參顆粒對(duì)兔球蟲病的防治效果。選用（35±2）日齡仔兔80只，隨機(jī)分為4個(gè)處理組，每組20只，分別為空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、陽性藥物組和中藥防治組。采用人工接種球蟲孢子化卵囊的方法建立實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。

關(guān)鍵詞：常青白參顆粒；兔球蟲??；化學(xué)藥物；藥效

中圖分類號(hào)：S858.291 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：2095-6835（2014）07-0123-02

兔球蟲病是嚴(yán)重危害養(yǎng)兔生產(chǎn)的寄生蟲病，是由艾美耳屬的多種球蟲寄生在腸道和肝臟上皮細(xì)胞內(nèi)引起的一種原蟲病。該病分布廣、傳染快、死亡率高，特別是4月齡內(nèi)的仔兔最易感染，而且對(duì)不同品種、年齡的兔都具有易感性。根據(jù)感染的種類和寄生的部位不同，可分為腸型、肝型和混合型，但在臨床上多見混合型。目前，對(duì)該病的控制主要采用藥物防治和疫苗接種兩種手段。用于防治球蟲病的藥物以化學(xué)藥物為主，但這些化學(xué)藥物的長(zhǎng)期使用易產(chǎn)生耐藥性，使畜產(chǎn)品化學(xué)藥物殘留而影響人類的健康。使用球蟲疫苗可以防治耐藥性的產(chǎn)生，但是，強(qiáng)毒苗和弱毒苗可能造成球蟲病原的擴(kuò)散和毒力返強(qiáng)，球蟲基因工程疫苗目前還處于實(shí)驗(yàn)室研究階段。藥物的毒性和殘留日益受到了人們的重視，一些毒性大、安全性低的化學(xué)合成抗球蟲藥物逐漸被淘汰，而且要研究生產(chǎn)一種新型的高效、低毒、安全的化學(xué)合成抗球蟲藥物十分困難，且費(fèi)用昂貴。中藥相對(duì)化學(xué)藥物有諸多優(yōu)點(diǎn)，比如毒副作用小、使用安全、不易產(chǎn)生耐藥性和藥物殘留等。現(xiàn)已開發(fā)出許多有抗球蟲效果的中藥復(fù)方制劑和添加劑應(yīng)用于臨床。但由于制劑水平低下（主要以散劑為主）和組方龐大等原因，導(dǎo)致很多復(fù)方的臨床療效不明顯。山西有豐富的黨參資源，且潞黨參為黨參地道藥材。為了對(duì)黨參藥材進(jìn)行有效的開發(fā)和利用，課題組在中獸醫(yī)藥理論的指導(dǎo)下，結(jié)合球蟲病的發(fā)病特點(diǎn)，精選常山、青蒿、白頭翁、黨參4味中藥，研制成了防治兔球蟲病的新型中獸藥——常青白參顆粒。該試驗(yàn)以人工感染兔球蟲卵囊疾病為模型，研究了常青白參顆粒對(duì)兔球蟲病的防治效果。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)藥物

常青白參顆粒：由常山、青蒿、白頭翁、黨參4味中藥組成，由山西省新型中獸藥協(xié)同創(chuàng)新基地研制而成，規(guī)格為50 g/袋（1 g相當(dāng)于原生藥7.15 g）。

地克株利溶液：購(gòu)于四川齊金動(dòng)物藥業(yè)有限公司，規(guī)格為100 mL∶0.5 g。

1.2 攻毒用卵囊

試驗(yàn)所用的卵囊分離自山西臨汾某養(yǎng)兔場(chǎng)，按漂浮法收集卵囊，將收集到的卵囊經(jīng)3 000 r/min離心5 min，取沉淀物置于含有質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2.5%的重鉻酸鉀溶液的平皿中，29 ℃恒溫孵育3 d，卵囊孢子化后貯存于4 ℃的冰箱中備用。

1.3 試驗(yàn)動(dòng)物及分組設(shè)計(jì)

選用體重相近的（35±2）日齡斷奶幼兔80只，經(jīng)飽和鹽水漂浮法檢查，糞便中均無卵囊。隨機(jī)分為4個(gè)處理組，每組20只，分別為空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、陽性藥物組、中藥治療組?？瞻讓?duì)照組不感染球蟲卵囊，也不用藥。其余各組兔均經(jīng)口感染5×105個(gè)球蟲卵囊。模型對(duì)照組感染前后不用藥；陽性藥物組從感染當(dāng)天開始，在飲水中添加地克珠利溶液（每100 mL兌水500 L），連用14 d；中藥治療組從感染當(dāng)天開始，灌服常青白參顆粒（用純凈水稀釋，每50 g用水1 000 mL），10 mL/只，1次/d，連用14 d。

1.4 測(cè)定指標(biāo)與方法

球蟲感染當(dāng)天對(duì)所有的兔進(jìn)行稱重，隨后在球蟲感染14 d時(shí)，稱重、剖檢、取樣。

1.4.1 相對(duì)增重率

相對(duì)增重率（%）=給藥組或感染不投藥組平均增重率/不感染不投藥組平均增重×100%.

1.4.2 存活率

存活率（%）=組內(nèi)存活兔/組內(nèi)總兔數(shù)×l00%.

1.4.3 病變值

根據(jù)病變的嚴(yán)重程度，用Johnson標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行病變記分，具體記分方法為：腸道壁無肉眼可見病變者記為0分；腸道壁有少量散在的淤血點(diǎn)，腸道壁不增厚，內(nèi)容物正常者記為1分；腸道壁有較多的淤血點(diǎn)，腸道內(nèi)容物明顯帶血，腸道壁增厚，盲腸內(nèi)容物正常者記為2分；腸道有較多血液或有盲腸芯（血凝塊或灰白色干酪樣塊狀物）、腸道壁明顯增厚者記為3分：腸道充滿大量血液或盲腸芯很大，致使盲腸腫大或死亡者記為4分，對(duì)每只兔分別記分后算出各組的平均病變并記分，再按下式計(jì)算每組的病變值：病變值 = 組內(nèi)平均病變記分×10.

1.4.4 平均卵囊值

取1 g腸道內(nèi)容物于10 mL水中，充分?jǐn)嚢璩蓱乙汉?，用微量移液器吸? μL于載玻片上，在顯微鏡下計(jì)數(shù)卵囊數(shù)量，重復(fù)3次。用3次的平均數(shù)算出1 g腸道內(nèi)容物中的卵囊數(shù)，按下式算出克卵囊數(shù)（Oocyst pergram，OPG）：

克卵囊數(shù)=l g腸道內(nèi)容物的卵囊數(shù)×10. （1）

當(dāng)0≤OPG<0.1時(shí)，卵囊值為0；當(dāng)0.1≤OPG<1時(shí)，卵囊值為1；當(dāng)1≤OPG<6時(shí)，卵囊值為10；當(dāng)6≤OPG<11時(shí)，卵囊值為20；當(dāng)OPG≥11時(shí)，卵囊值為40.

1.4.5 抗球蟲指數(shù)

按以下方法計(jì)算藥物的抗球蟲指數(shù)（Anticoccidial Index，ACI）：抗球蟲指數(shù)（ACI）=（相對(duì)增重率+存活率）-（病變值+平均卵囊值）。

判定標(biāo)準(zhǔn)為：ACI≥180者為高效；180>ACI≥160者為中效；160>ACI≥120者為低效；ACI<120者為無效。

由表1可知，中藥治療組的相對(duì)增重率為92.48%，存活率為100%，抗球蟲指數(shù)為186.48，療效達(dá)到高效。陽性對(duì)照藥地克珠利的相對(duì)增重率為73.94%，存活率為95%，抗球蟲指數(shù)為146.94，療效僅為低效。試驗(yàn)結(jié)果表明，常青白參顆粒具有明顯的抗球蟲作用，其臨床療效優(yōu)于陽性對(duì)照藥地克珠利。

3 討論

該試驗(yàn)除了空白對(duì)照組外，其他試驗(yàn)組在球蟲感染后均表現(xiàn)出不同程度的臨床癥狀，比如精神不振、采食量減少、排血便等。模型對(duì)照組的相對(duì)增重率為46.25%，病變值為33，存活率為75%，抗球蟲指數(shù)為48.25，這表明人工感染模型成功建立。常青白參顆粒是課題組根據(jù)中獸醫(yī)學(xué)理論，結(jié)合球蟲病的發(fā)病特點(diǎn)以祛除病蟲、清熱解毒燥濕、涼血止血、益氣補(bǔ)血為治法，精選常山、青蒿、白頭翁、黨參4味藥，在現(xiàn)代中藥研究成果的基礎(chǔ)上，采用現(xiàn)代制藥技術(shù)研制而成的純中藥顆粒劑。方中常山苦、辛、寒，入肝、肺經(jīng)，抗瘧殺蟲、清熱利水，為治瘧要藥。青蒿苦、辛、寒，入肝、膽、腎經(jīng)，退虛熱、解暑熱，截瘧。白頭翁苦、寒，入大腸、肝、胃經(jīng)，清熱解毒、涼血止痢、殺蟲截瘧。青蒿、白頭翁為輔藥，協(xié)助常山抗瘧殺蟲，兼有清熱解毒、涼血止痢之效。黨參甘、平，入脾、肺經(jīng)，補(bǔ)脾益氣、生津補(bǔ)血。黨參作為佐藥，期藥效主要體現(xiàn)在以下兩方面：①呵護(hù)胃氣，克制前三味藥苦寒傷胃的副作用；②與前三味藥的祛邪功效形成互補(bǔ)，達(dá)到“祛邪兼扶正”的目的。該試驗(yàn)結(jié)果表明，常青白參顆粒的抗球蟲指數(shù)為186.48，具有明顯的抗球蟲作用，其臨床療效優(yōu)于陽性對(duì)照藥地克珠利。此試驗(yàn)結(jié)果為后續(xù)擴(kuò)大臨床試驗(yàn)提供了可靠的依據(jù)。

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