王 波 白生慧

（云南省晉寧縣動(dòng)物檢疫和疫病預(yù)防控制中心，云南晉寧 650600）

不同稀釋液對(duì)公豬受精能力的影響

王 波 白生慧

（云南省晉寧縣動(dòng)物檢疫和疫病預(yù)防控制中心，云南晉寧 650600）

本試驗(yàn)選用BTS、商品BTS、MODENA1和MODENA2四種不同的稀釋液，各對(duì)5頭杜洛克種公豬的精液進(jìn)行稀釋，置17℃精液保存箱中保存，并每天觀察精子活力變化。然后利用在17℃精液保存箱中保存24h左右的精液進(jìn)行人工授精。結(jié)果表明：四種不同稀釋液所稀釋保存的精液，精子活力無(wú)明顯變化的保存時(shí)間，MODENA1O為110.8±12.9h，MODENA2為101.2±14.62h，BTS為99.6±9.21h，商品BTS為90.8±8.05h，四者相互比較，差異不顯著（P＞0.05）。而有效保存時(shí)間，即精子活力不低于0.7的保存時(shí)間，MODENA1為154.2±7.14h，MODENA2為153.6±6.28h，BTS為119.8±2.80h，商品BTS為108.2±4.96h。MODENA1與MODENA2比較，差異不顯著（P＞0.05），與BTS、商品BTS相比，差異極顯著（P＜0.01）；MODENA2與BTS、商品BTS相比，差異極顯著（P＜0.01）；BTS與商品BTS相比，差異不顯著（P＞0.05）。在輸精后24天內(nèi)觀察不返情率，MODENA1為96.67%（29/30），MODENA2為96.67%（29/30），BTS為97.22%（35/36），商品BTS為94.12%（32/34），四者相互比較，差異不顯著（P＞0.05）。

豬精液稀釋液；人工授精；不返情率

1 前言

隨著養(yǎng)豬業(yè)的集約化、工廠化程度的提高，豬人工授精技術(shù)的經(jīng)濟(jì)效益已被我國(guó)養(yǎng)豬界所共識(shí)。豬人工授精技術(shù)越來(lái)越受到重視，應(yīng)用越來(lái)越廣泛。與自然交配相比，豬人工授精具有提高優(yōu)秀公豬利用率、減少疾病傳播、提高商品豬整齊度、減少飼養(yǎng)公豬數(shù)量、節(jié)省開(kāi)支、克服公母豬體格大小相差懸殊時(shí)造成的本交困難等優(yōu)點(diǎn)。為了進(jìn)一步闡明人工授精技術(shù)的優(yōu)越性，張守全等對(duì)人工授精與自然交配的受胎率和產(chǎn)仔數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，發(fā)現(xiàn)它們之間差異不顯著[3]。因此可以說(shuō)，用人工授精代替自然交配，對(duì)生產(chǎn)不會(huì)造成影響。但是，人工授精對(duì)技術(shù)要求比較高，所以，在推廣人工授精時(shí)應(yīng)對(duì)人工授精技術(shù)員進(jìn)行技術(shù)培訓(xùn)，使其掌握一整套成熟的人工授精技術(shù)，為提高受胎率提供技術(shù)保障。然而，進(jìn)行人工授精的前提條件是必須有稀釋效果、保存效果和輸精效果俱佳的液。在當(dāng)前，豬精液稀釋液配方有很多，使用效果也很不一樣。為了提高豬精液稀釋、保存效果，本試驗(yàn)通過(guò)MODENA1、MODENA2、BTS和商品BTS四種不同稀釋液對(duì)杜洛克公豬精液稀釋效果、保存效果以及輸精效果進(jìn)行觀察、比較，從而為豬場(chǎng)選擇豬精液稀釋液提供一種參考，為更好了推廣人工授精技術(shù)提供依據(jù)。

表1 用于液態(tài)保存豬精液的稀釋液的成分 單位：克/升

2 材料與方法

2.1 試驗(yàn)材料

2.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物：杜洛克公豬、大長(zhǎng)母豬、長(zhǎng)大母豬。

2.1.2 人工授精所需主要儀器、工具：顯微鏡、監(jiān)視器、密度儀、恒溫水浴箱、17℃精液保存箱、干燥箱、恒溫板、保溫杯、電子天平、一次性食品袋、輸精瓶、輸精管、紗布等。

2.1.3 豬精液稀釋液：MODENA1、MODENA2、BTS和商品BTS稀釋液（前本三種自配，后一種由供應(yīng)商提供），其具體成分及含量詳見(jiàn)表1。

2.2 試驗(yàn)方法

2.2.1 精液的采集、處理以及精子活力測(cè)定

按要求做好采精前準(zhǔn)備，用手握法采精，對(duì)采到的精液用刻度儀測(cè)定精子密度，稱其重量并換算成體積，每克按1毫升計(jì)[2]。并對(duì)精子進(jìn)行精子活力觀察，活力達(dá)0.7以上、畸形率在18%以下可以進(jìn)行稀釋，稀釋劑要提前1h溶于水，以便使用時(shí)其PH值較恒定[2]，稀釋位數(shù)的確定按每毫升約0.5億個(gè)有效精子計(jì)，稀釋液與精液要求等溫稀釋，兩者溫差不超過(guò)1℃，稀釋后要求靜置片刻再作精子活力檢查，活力無(wú)明顯變化進(jìn)行分裝。分裝后置22～25℃室溫1h后再置于17℃精液保存箱中保存[3]。以后每天上午、下午各檢查一次，檢查前先將精液搖勻，然后取一滴于載玻片上，蓋上蓋玻片，并放至37℃恒溫板上預(yù)熱，然后鏡檢觀察精子活力變化。

2.2.2 人工授精

根據(jù)母豬的年齡、發(fā)情開(kāi)始時(shí)間和持續(xù)時(shí)間、外觀變化等方面確定適時(shí)輸精。一個(gè)發(fā)情期輸精3次。一般是上午出現(xiàn)站立反應(yīng)，下午進(jìn)行第一次輸精，或者是下午出現(xiàn)站立反應(yīng)而在第二天上午進(jìn)行第一次輸精[1]，采用上午、下午、上午或者下午、上午、下午三次輸精方式。對(duì)于后備母豬來(lái)說(shuō)，在初情期的第一個(gè)發(fā)情期不要進(jìn)行配種輸精，在第二或第三個(gè)發(fā)情期再配種輸精，因?yàn)檫@樣可提高排卵數(shù)和平均窩產(chǎn)仔數(shù)。據(jù)統(tǒng)計(jì)，第二個(gè)發(fā)情期時(shí)才配種比第一個(gè)發(fā)情期配種，平均窩產(chǎn)仔數(shù)要多2頭左右[5]。人工授精的具體做法是：（1）在輸精前對(duì)保存24h左右的豬精液進(jìn)行活力檢查，活力達(dá)0.7以上者才能用于輸精，據(jù)調(diào)查，使用2頭或2頭以上不同公豬的精液混合保存，將有利于提高窩首創(chuàng)數(shù)和受胎率[7]。（2）輸精時(shí)，將母豬移至配種欄，并反公豬趕到配種欄前面，用于刺激母豬，一頭公豬一般同時(shí)面對(duì)4～5頭母豬，再多的話，則刺激就會(huì)變得淡薄了[6]。（3）用干凈清水沖洗母豬外陰及尾根周圍，用干毛巾擦干。（4）從密封袋中取出無(wú)污染的一次性輸精管，在其前端涂上潤(rùn)滑油，將輸精管45°角向上插入母豬生殖道內(nèi)，順時(shí)針?lè)较蛐D(zhuǎn)，當(dāng)感覺(jué)有阻力時(shí)，繼續(xù)緩慢旋轉(zhuǎn)，同時(shí)前后移動(dòng)，直至感覺(jué)輸精管前端被鎖定。（5）將輸精瓶接到輸精管上開(kāi)始輸精，在輸精時(shí)進(jìn)行壓背刺激母豬，提高輸精瓶，讓精液依靠子宮收縮產(chǎn)生負(fù)壓，吸納至母豬子宮內(nèi)。（6）輸精時(shí)間要求3～5min。輸完一頭母豬后，把輸精管后端一小段折起，放進(jìn)輸精瓶中，防止空氣進(jìn)入和精液倒流，讓輸精管自由滑落。

3 試驗(yàn)結(jié)果與分析

3.1 四種不同稀釋液對(duì)公豬精液保存效果比較

經(jīng)統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明，用四種不同稀釋液保存杜洛克公豬精液，精子活力無(wú)明顯變化的保存時(shí)間，四者相互比較，差異均不顯著（P＞0.05），而有效保存時(shí)間，即精子活力不低于0.7的保存時(shí)間，MODENA1與MODENA2相比，差異不顯著（P＞0.05），與BTS、商品BTS相比，差異極顯著（P＜0.01）；MODENA2與BTS、商品BTS相比，差異極顯著（P＜0.01）；BTS與商品BTS相比，差異不顯著（P＞0.05）。詳見(jiàn)表2。

表2 四種不同稀釋液對(duì)公豬精液保存效果比較 單位：h

從表2中可以看出，在精子活力無(wú)明顯變化時(shí)，盡管四者相比無(wú)顯著差異，但MODENA1的保存時(shí)間是最長(zhǎng)的，而且在有效保存時(shí)間中，MODENA1和 MODENA2盡管無(wú)顯著差異，但MODENA1的保存時(shí)間的絕對(duì)值是最大的，因此，只從稀釋效果、保存效果來(lái)說(shuō)，MODENA1是較為理想的一種稀釋液。

3.2 四種不同稀釋液輸精效果比較

經(jīng)統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明，用四種不同的稀釋液進(jìn)行人工授精，在24d內(nèi)觀察不返情率，四者相互比較，差異不顯著（P＞0.05）。詳見(jiàn)表3。

表3 四種不同稀釋液輸精效果比較

從表3中可以看出，四種不同稀釋液在保存24h左右后進(jìn)行輸精，其24d內(nèi)的不返情率沒(méi)有顯著差異（P＞0.05）。說(shuō)明它們?cè)谳斁Ч蠠o(wú)本質(zhì)差異。

4 討論與結(jié)論

4.1 四種不同稀釋液保存效果、輸精效果的比較

從表3中可以看出，四種不同稀釋液保存的精液在輸精24d內(nèi)，母豬不返情率之間差異不顯著。因而可以說(shuō)，它們的輸精效果無(wú)本質(zhì)差異。而從表2中可以看出，MODENA1是有效保存時(shí)間最長(zhǎng)的一種稀釋液，MODENA1和MODENA2各保存的5頭公豬精液，有效保存時(shí)間都在5天以上，BTS和商品BTS各保存5頭公豬精液也都在4d以上，這與Donald G.Levis用MODENA1和BTS在同溫下保存公豬精液的結(jié)果有所不同。用MODENA1保存A、B兩頭公豬精液，雖然保存結(jié)果相似，但有效保存時(shí)間不到3d[4]。這與本試驗(yàn)結(jié)果有較大差異；而用BTS保存A、B兩頭公豬精液，保存公豬A的效果明顯不如公豬B，表現(xiàn)出明顯的公豬精液對(duì)稀釋液的選擇性[4]，這也與本試驗(yàn)結(jié)果有較明顯差異。造成這種差異的具體原因還待進(jìn)一步做試驗(yàn)來(lái)考證。

4.2 四種不同稀釋液的選擇性比較

從表2及表3中可以看出，由于四種步同稀釋液在輸精效果上無(wú)明顯差異，因此，從保存效果考慮的話，MODENA1與MODENA2是較好的。但我們從表1的配方中也可以看出，出于MODENA2的無(wú)水葡萄糖含量較高，而保存時(shí)間的絕對(duì)值也無(wú)MODENA1大，因此，一般可以不選擇MODENA2。對(duì)于MODENA1，由于其含有Tris這種生化試劑，從而大大提高了成本，是BTS和商品BTS的2倍左右，而且，從試驗(yàn)過(guò)程中也發(fā)現(xiàn)了一個(gè)不容忽視的問(wèn)題，那就是MODENA1和MODENA2不能把各成分提前混合，若提前混合，在1～2d的時(shí)間內(nèi)就會(huì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)而變質(zhì)，出現(xiàn)凝塊，并產(chǎn)生粉紅色物質(zhì)。而B(niǎo)TS和商品BTS即使各成分混合較長(zhǎng)時(shí)間也無(wú)明顯變化。因此，在實(shí)際生產(chǎn)中，使用MODENA1、MODENA2不如使用BTS、商品BTS方便，盡管后者的保存效果不如前者，但是，如果豬精液稀釋后保存時(shí)間要求不長(zhǎng)的話，使用BTS和商品BTS可以大大降低成本，提高經(jīng)濟(jì)效益。

[1] 王祖昆.豬場(chǎng)人工授精技術(shù)綜述（二）[J].廣東養(yǎng)豬業(yè)，1999，（6）：34-37.

[2] 張守全.工廠化豬場(chǎng)人工授精技術(shù)的應(yīng)用[J].遼寧畜牧獸醫(yī)，1999，（12）：5-6.

[3] 張守全.人工授精與本交對(duì)引進(jìn)品種母豬繁殖表現(xiàn)的影響[J].養(yǎng)豬，1999，（4）：14-15.