張議文，王江濤*，譚麗菊

（1.中國海洋大學海洋化學理論與工程技術教育部重點實驗室，山東青島，266100）

旋鏈角毛藻對中肋骨條藻化感作用的影響因素及化感物質性質初探

張議文1，王江濤1*，譚麗菊1

（1.中國海洋大學海洋化學理論與工程技術教育部重點實驗室，山東青島，266100）

在已知旋鏈角毛藻對中肋骨條藻具有化感作用的前提下，進行了溫度、生長時期、光照、細菌等因素對旋鏈角毛藻化感作用的影響、化感物質的萃取及粗提物對中肋骨條藻的化感效應檢驗等實驗，研究了旋鏈角毛藻化感物質的性質、降解特點，并初步測定了化感物質的結構。結果表明：旋鏈角毛藻化感作用與生長時期有關，指數(shù)期濾液化感作用強于衰亡期；旋鏈角毛藻的化感物質在50℃以下保持穩(wěn)定，光和細菌均引起旋鏈角毛藻化感物質的降解，且細菌降解強于光降解；旋鏈角毛藻的乙酸乙酯萃取物具有明顯的化感活性，該萃取物在255～260 nm處有特征吸收峰。綜合以上結果，推測旋鏈角毛藻化感物質可能為分解溫度在50℃以上的易被光和細菌降解的苯衍生物，從極性上看較易溶于乙酸乙酯。

化感物質；旋鏈角毛藻Chaetoceros curvisetus；中肋骨條藻Skeletonema costatum

1 引言

化感作用是指植物、藻類、細菌、真菌通過次級代謝產(chǎn)物影響生態(tài)系統(tǒng)的發(fā)展和演變的過程［1］。近年來隨著赤潮頻發(fā)，浮游植物間的化感作用越來越受到研究者的關注。已有很多研究發(fā)現(xiàn)浮游植物間存在化感作用，并認為浮游植物通過釋放胞外化感物質進行種間競爭是浮游植物群落發(fā)展演變及赤潮暴發(fā)、優(yōu)勢種演替的原因之一［2－3］。例如Liu等［4］研究發(fā)現(xiàn)化感作用是球形棕囊藻對海洋卡盾藻和卵圓褐胞藻獲取競爭優(yōu)勢的主要原因。Yamasaki等［5］發(fā)現(xiàn)中肋骨條藻濾液抑制赤潮異灣藻的生長，并推測相關的化感物質與中肋骨條藻赤潮中藻類的演替有關。王江濤等［6］發(fā)現(xiàn)在營養(yǎng)鹽不足條件下，中肋骨條藻濾液會對自身產(chǎn)生抑制作用，化感作用可能影響中肋骨條藻和東海原甲藻的競爭和演替。

化感物質是浮游植物對競爭者產(chǎn)生促進或抑制作用的媒介，在環(huán)境脅迫的壓力下，化感物質的產(chǎn)生量與釋放量會增加，以提高化感作用物種的競爭能力。自然環(huán)境中，許多非生物因素和生物因素會影響化感物質的分泌，也干擾化感物質對目標藻的作用，其中，非生物因素主要有光照、p H、溫度、營養(yǎng)鹽等，生物因素包括細胞密度、生長時期、生物降解過程等［3］。盡管化感作用的研究日益廣泛，但是由于很難對濾液中的有效化學物質進行分離和純化，目前化感物質的性質、結構和功能仍存在很多未知。在前期實驗中，我們已發(fā)現(xiàn)化感作用是旋鏈角毛藻抑制中肋骨條藻生長的途徑之一，旋鏈角毛藻通過產(chǎn)生與釋放胞外活性物質（即化感物質）到周圍水體環(huán)境中而獲得相比中肋骨條藻更好的生長優(yōu)勢［7］。本文以此為前提，進行了溫度、生長時期、光照、細菌等因素對旋鏈角毛藻化感物質的影響及化感物質的提取實驗，研究了旋鏈角毛藻化感物質的降解特點、性質和初步結構，從而為進一步提取旋鏈角毛藻化感物質、探討化感作用機理奠定基礎。

2 材料與方法

2.1 微藻培養(yǎng)

實驗藻種中肋骨條藻和旋鏈角毛藻，均取自中國海洋大學海洋污染生態(tài)化學實驗室藻種室，培養(yǎng)于光照培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)溫度為（20±1）℃，光暗比為12 h∶12 h，光照度4 000 lx。每天定時搖晃培養(yǎng)瓶并重新隨機排放，以排除任何光或溫度不同造成的影響。每實驗組設3個平行樣。

2.2 實驗方法

2.2.1 溫度對旋鏈角毛藻化感作用的影響

取旋鏈角毛藻指數(shù)末期的培養(yǎng)液，用0.22μm微孔濾膜過濾，得到無藻細胞濾液。分別置于50℃、90℃水浴中加熱半小時，冷卻后測定NO3-N，NO2-N，NH4-N，PO4-P，SiO4-Si五項營養(yǎng)鹽指標，測定方法分別為鋅-鎘還原法、重氮-偶氮法、次溴酸鈉氧化法、磷鉬藍分光光度法和硅鉬藍分光光度法［8］。已知營養(yǎng)鹽濃度的旋鏈角毛藻無藻細胞濾液和滅菌海水均加富至f／2培養(yǎng)基，接種中肋骨條藻。中肋骨條藻初始藻密度為8×104個／mL，每天定時取樣用于CASY細胞儀計數(shù)。

2.2.2 生長時期對旋鏈角毛藻化感作用的影響

分別取旋鏈角毛藻的指數(shù)期和衰亡期培養(yǎng)液，藻密度均為1.9×106個／m L，經(jīng)0.22μm微孔濾膜過濾得到濾液，測定五項營養(yǎng)鹽指標（方法同2.2）后，加富至f／2培養(yǎng)基，以滅菌海水為對照，培養(yǎng)中肋骨條藻。中肋骨條藻初始藻密度為8×104個／m L，每天定時取樣用于顯微鏡計數(shù)和Fv／Fm（PSⅡ的最大光化學量子產(chǎn)量）測定。

2.2.3 光和細菌對旋鏈角毛藻化感作用的影響

取旋鏈角毛藻衰亡期無藻濾液，分兩個實驗組，一組避光保存，一組每天定時添加濃度為0.5 mg／L的鏈霉素、多粘菌素B，另設一實驗組為添加同等濃度抗生素的滅菌海水。放置20 d后，測定五項營養(yǎng)鹽指標，以新鮮衰亡期濾液和新鮮滅菌海水為對照組，均加富至f／2培養(yǎng)基。中肋骨條藻初始藻密度為8×104個／m L，定時取樣用于顯微鏡計數(shù)和Fv／Fm測定。

2.2.4 旋鏈角毛藻濾液化感物質粗提及粗提物對中肋骨條藻生長的影響

滅菌海水中分別添加1%二甲亞砜（DMSO）、乙醚、乙酸乙酯、正已烷，以滅菌海水為空白對照，按f／2培養(yǎng)基添加營養(yǎng)鹽，接種中肋骨條藻，初始藻密度為1.2×105個／m L，每天定時取樣用于CASY細胞儀計數(shù)。

取指數(shù)末期旋鏈角毛藻濾液，分別用乙醚、乙酸乙酯、正已烷萃取，取有機相旋蒸（加熱溫度均為45℃以下），經(jīng)DMSO溶解，用滅菌海水定容至原體積。按f／2培養(yǎng)基添加營養(yǎng)鹽，中肋骨條藻初始藻密度為1.2×105個／m L，每天定時取樣用于CASY細胞儀計數(shù)。

2.2.5 乙酸乙酯提取物的紫外光譜掃描

取指數(shù)期旋鏈角毛藻濾液的乙酸乙酯提取物，在UV2550紫外-可見分光光度計上，進行200～400 nm紫外-可見全光譜掃描，以確定化感物質的特征吸收。

以人工海水作參比，在最大吸收峰處測定旋鏈角毛藻指數(shù)期濾液的吸光度。

2.3 數(shù)據(jù)處理

2.3.1 相對抑制率（IR）采用下式計算每一天對生物量的相對抑制率［8］：

IR（%）=（1－T／C）×100%，

式中，IR為相對抑制率，T為實驗組生物量，C為對照組生物量。

2.3.2 顯著性檢驗

通過每個實驗組的平行樣計算平均值及標準偏差（n=3）。各組間的顯著性差異用one-way ANOVA進行分析［9］。p＜0.05作為顯著性差異的標準。

3 結果

3.1 溫度對化感作用的影響

旋鏈角毛藻濾液經(jīng)50℃、90℃加熱處理后，分別測定各項營養(yǎng)鹽，由結果可知，加熱后濾液中各溶解態(tài)營養(yǎng)鹽濃度均增加，經(jīng)90℃加熱處理的實驗組，與其他兩組實驗相比，硅酸鹽濃度明顯增加（見表1）。據(jù)已知濾液濃度，將濾液加富至f／2培養(yǎng)基，同時以加富至f／2培養(yǎng)基的滅菌海水為對照組，排除營養(yǎng)鹽濃度不同對實驗結果的影響，根據(jù)中肋骨條藻細胞計數(shù)結果，繪制生長曲線（圖1）并計算相對抑制率（圖2），以研究加熱分解對旋鏈角毛藻的化感作用的影響。

表1 不同熱處理條件下旋鏈角毛藻濾液營養(yǎng)鹽濃度

從圖1和圖2可以看出，50℃加熱處理藻液與未處理藻液中，中肋骨條藻藻密度無差異（p=0.87），與海水對照組相比均顯示了抑制作用，48 h時抑制率達到最大值，分別為65%和60%。濾液經(jīng)90℃加熱，仍表現(xiàn)有一定的抑制作用，但抑制率小于另外兩組，說明經(jīng)90℃加熱處理后，旋鏈角毛藻濾液中的化感物質部分失活，導致旋鏈角毛藻對中肋骨條藻的化感作用減弱。而加熱至50℃對旋鏈角毛藻濾液的抑制效果無影響，即50℃時旋鏈角毛藻化感物質是穩(wěn)定的。在以后的提取實驗中，為保證提取效率，加熱溫度控制在50℃以下。

圖1 中肋骨條藻在不同加熱處理的旋鏈角毛藻濾液中的生長曲線

圖2 中肋骨條藻在不同加熱處理的旋鏈角毛藻濾液中的相對抑制率

3.2 生長時期對化感作用的影響

圖3顯示了在不同生長階段的旋鏈角毛藻濾液條件下，中肋骨條藻的生長曲線。添加濾液的兩實驗組中，中肋骨條藻進入指數(shù)期的時間比海水對照組晚，旋鏈角毛藻的指數(shù)期和衰亡期濾液對中肋骨條藻的生長均顯示了抑制作用，兩實驗組的最大抑制率均出現(xiàn)在第60 h，分別為82%和68%。同時，44 h后兩組中肋骨條藻藻密度之間有顯著性差異（p＜0.05），表明指數(shù)期濾液抑制效果強于衰亡期。Fv／Fm的結果（未給出）顯示，前70 h，在旋鏈角毛藻指數(shù)期濾液中培養(yǎng)的中肋骨條藻Fv／Fm值小于衰亡期濾液中的Fv／Fm值，且實驗組Fv／Fm值顯著小于海水對照組，說明中肋骨條藻在旋鏈角毛藻濾液中的生長受到脅迫，這種作用指數(shù)期濾液比衰亡期強。結合中肋骨條藻生長過程中的藻密度與Fv／Fm值結果，可以得出旋鏈角毛藻指數(shù)期及衰亡期濾液對中肋骨條藻的生長均有明顯的抑制作用，且指數(shù)期濾液的化感作用強于衰亡期濾液。

3.3 光和細菌對旋鏈角毛藻化感作用的影響

按實驗方法2.1對中肋骨條藻進行培養(yǎng)實驗，包括海水每天添加抗生素放置20 d組、濾液每天添加抗生素放置20 d組、濾液避光放置20 d組、新鮮濾液組及海水空白對照組，得到中肋骨條藻生長曲線（見圖4）。濾液中添加抗生素，可排除細菌對化感物質的影響，避光放置排除了光對化感物質的影響。從圖4可以看出，海水添加抗生素組與海水空白對照組中培養(yǎng)的中肋骨條藻，藻密度沒有差異（p=0.98），F(xiàn)v／Fm值（結果未列出）差異也不大（p=0.76），說明每天添加0.5 mg／L的鏈霉素與多黏菌素B，不影響中肋骨條藻的生長。而濾液添加抗生素組、濾液避光放置組、新鮮濾液組與對照組相比，均抑制中肋骨條藻的生長，培養(yǎng)過程中的平均抑制率分別為30%、13%、57%，即抑制效果為新鮮濾液強于濾液添加抗生素組強于濾液避光放置組。Fv／Fm值結果表明，中肋骨條藻在旋鏈角毛藻新鮮濾液中受到的生長脅迫作用最明顯，其次是在添加抗生素的旋鏈角毛濾液中。這說明經(jīng)過20 d的放置，旋鏈角毛藻濾液中的化感物質發(fā)生了降解，降解方式包括光降解和細菌降解兩種，在本實驗結果中，細菌降解強于光降解。

圖3 中肋骨條藻在旋鏈角毛藻不同生長時期濾液中的生長曲線

圖4 中肋骨條藻在不同放置方法的旋鏈角毛藻濾液中的生長曲線

3.4 濾液中化感物質萃取

為了完成化感物質的萃取，首先要研究有機試劑對中肋骨條藻生長的影響。本實驗進行了添加體積分數(shù)為1%的DMSO、乙醚、乙酸乙酯、正已烷的培養(yǎng)基對中肋骨條藻的培養(yǎng)實驗，結果（未列出）顯示，除添加1%DMSO的實驗組與海水對照組中肋骨條藻藻密度沒有顯著差異外，乙醚、乙酸乙酯、正已烷對中肋骨條藻的生長都有抑制作用。因此，在后續(xù)的提取實驗中，經(jīng)旋轉蒸發(fā)去除萃取劑，再用0.5%DMSO溶解萃取物，并添加至f／2培養(yǎng)基中用于培養(yǎng)中肋骨條藻，得到的生長曲線如圖5所示。從圖中可以看出，不同極性的有機萃取物對中肋骨條藻的生長都顯示了抑制作用，相同萃取條件下，抑制作用由強到弱的順序為乙酸乙酯、正已烷、乙醚，三者平均抑制率為75%、48%、16%。此結果說明旋鏈角毛藻濾液中對中肋骨條藻起作用的化感物質較易溶于乙酸乙酯。

圖5 中肋骨條藻在添加不同濾液萃取物的培養(yǎng)基中的生長曲線

3.5 乙酸乙酯萃取物的光譜掃描

已知旋鏈角毛藻濾液的乙酸乙酯萃取物對中肋骨條藻的生長影響最大，為得到旋鏈角毛藻化感物質的初步結構，對乙酸乙酯萃取物進行了紫外-可見光區(qū)吸光度的全光譜掃描，由結果可知，旋鏈角毛藻濾液的乙酸乙酯萃取物在255～260 nm處有最大吸收峰，該吸收峰可能為苯環(huán)的吸收峰。以人工海水作參比，在258 nm分別測定得到海水、旋鏈角毛藻指數(shù)期濾液的吸光度（表2），結果表明，與海水相比，旋鏈角毛藻濾液中增加了在此波長范圍內(nèi)有吸收峰的物質，可能是旋鏈角毛藻的化感物質。

表2 旋鏈角毛藻指數(shù)期濾液的吸光度

4 討論

化感物質是研究化感作用的關鍵，也是化感作用這個生態(tài)學現(xiàn)象向實際應用領域轉化的橋梁，除驗證和描述化感現(xiàn)象外，更應關注化感物質的研究。在已知旋鏈角毛藻對中肋骨條藻具有化感作用的前提下，在鑒定化感物質的確切結構之前，需探究旋鏈角毛藻化感物質的性質、穩(wěn)定存在的條件及初步結構，這就是本實驗討論的問題。

為達到富集效果，加熱蒸發(fā)溶劑是常用的方法，即需要確定化感物質穩(wěn)定存在的溫度范圍。本實驗結果表明，旋鏈角毛藻化感物質在50℃以內(nèi)是穩(wěn)定的。此外，通常發(fā)現(xiàn)化感物質產(chǎn)生的時期是指數(shù)期、穩(wěn)定期和衰亡期，且浮游植物在不同生長時期產(chǎn)生釋放的胞外物質成分與含量不同，化感作用效果也就有所差別。例如，穩(wěn)定期塔瑪亞歷山大藻濾液對東海原甲藻的抑制作用明顯強于指數(shù)期［10］。王江濤等［5］發(fā)現(xiàn)中肋骨條藻指數(shù)期濾液比衰亡期濾液對其本身具有更強的化感抑制作用。本文選取旋鏈角毛藻不同時期、藻密度相同的濾液培養(yǎng)中肋骨條藻，排除藻密度差異的影響，結果顯示旋鏈角毛藻指數(shù)期濾液化感作用強于衰亡期，即旋鏈角毛藻在指數(shù)期分泌更多的化感物質。Mykestad實驗表明［11］，指數(shù)期主要積累的胞外產(chǎn)物為蛋白質，而多糖主要在N、P限制的穩(wěn)定期產(chǎn)生。結合以上推測，旋鏈角毛藻化感物質可能為分解溫度在50℃以下的含氮化合物。

溶解有機物的降解途徑主要包括光降解和生物降解，二者為競爭關系［12］。其中生物降解主要由細菌造成，而細菌與化感作用的關系，一直以來都存在爭論。Uronen等［13］認為，小三毛金藻Prymnesium parvum的化感作用使鹽水隱藻Rhodomonas salina分泌的DOC增多，引起細菌量增加，這一過程通過微食物環(huán)促進了碳的轉換，另外小三毛金藻可能直接吞噬細菌，使其在營養(yǎng)鹽限制條件下獲得生長優(yōu)勢。但也有實驗證明，化感作用效果并不受細菌影響。Tillmann等［14］用抗生素盤尼西林、鏈霉素處理塔瑪亞歷山大藻濾液，結果證明，未經(jīng)抗生素處理的濾液并沒有表現(xiàn)出化感作用的減弱。另外，Weissbach等［15］研究發(fā)現(xiàn)具有化感作用的塔瑪亞歷山大藻濾液使細菌生長加快，但對細菌生產(chǎn)力沒有影響。本文中分別對濾液進行了暗處放置與除菌處理，與新鮮濾液相對照，以研究旋鏈角毛藻化感物質的降解特性及細菌在旋鏈角毛藻化感效應中的作用。已有實驗室培養(yǎng)結果表明，0.5 mg／L的鏈霉素和多粘菌素B聯(lián)合應用時，對中肋骨條藻生長影響很小，且抑菌效果較理想［16］，本實驗中以此方法去除濾液中的細菌，結果海水添加抗生素組與海水空白對照組中培養(yǎng)的中肋骨條藻密度沒有差異，也證明這兩種抗生素的添加不會對中肋骨條藻的生長產(chǎn)生影響。同時，放置20 d濾液與新鮮濾液培養(yǎng)中肋骨條藻的結果對比顯示，新鮮濾液抑制作用強于濾液添加抗生素組強于濾液避光放置組，說明光化學過程和細菌降解過程都會造成旋鏈角毛藻化感物質的降解，且與光化學過程相比，細菌降解更能減弱化感作用。Obernosterer等認為光化學礦化過程可去除的陸生與水體（含浮游生物）DOC分別為46%與7%，而生物過程能去除27%陸生和74%浮游生物DOC［17］，這與本實驗的結果相一致。因此，在旋鏈角毛藻對中肋骨條藻的化感作用過程中，細菌降解與光化學過程均引起化感作用的減弱，且二者相比，濾液中細菌的存在能夠降解更多的化感物質。

為了獲得具有明顯化感活性的旋鏈角毛藻代謝產(chǎn)物的粗提物，本實驗進行了不同極性的有機物對旋鏈角毛藻濾液的萃取及各粗提物的化感效應檢驗。結果顯示，相同萃取條件下，具有化感作用的順序從大到小為乙酸乙酯萃取物、正已烷萃取物、乙醚萃取物。丁慧等［18］指出孔石莼提取物對卵形藻Cocconeis sp.生長影響程度由高到低依次為：乙酸乙酯提取物、乙醇提取物、石油醚提取物、蒸餾水提取物。極性不同的有機溶劑提取的蘆竹化感物質對銅綠微囊藻的抑藻作用出現(xiàn)次序由早到晚依次為甲醇提取物、乙酸乙酯提取物、正己烷提取物。此外，乙酸乙酯粗提強壯前溝藻、海洋原甲藻、錐狀斯氏藻和長滸苔胞外濾液中的化感物質，都具有抑藻活性［19－20］。本實驗發(fā)現(xiàn)旋鏈角毛藻濾液中的化感物質較溶于乙酸乙酯，乙酸乙酯萃取物對中肋骨條藻具有明顯的抑制活性，該結果是進一步分離純化旋鏈角毛藻化感物質的基礎。

紫外光譜是測定有機分子結構的方法之一，通常掃描的是共軛結構的吸收峰［21］。孫穎穎等［22］研究發(fā)現(xiàn)球等鞭金藻培養(yǎng)液的乙酸乙酯萃取物具有明顯的抑制活性，且抑制物的特征吸收波長為235 nm。本文中旋鏈角毛藻濾液的乙酸乙酯萃取物在255～260 nm處有最大吸收峰，推測該吸收峰可能為苯環(huán)的吸收峰，表明旋鏈角毛藻化感物質可能為苯衍生物。類似的苯衍生物為化感物質的結果有，金魚藻和苦草中的鄰苯二甲酸酯，鄰苯三酚，對羥基苯基丙烯酸和4-羥基-3-甲氧基苯甲酸，均抑制銅綠微囊藻的生長［23－24］。另外，對羥基苯甲酸對小球藻有明顯的抑制作用［25］。

5 結論

在已知旋鏈角毛藻對中肋骨條藻具有化感作用的前提下，本文研究了旋鏈角毛藻化感作用的影響因素，如溫度、生長時期、光照、細菌等，進行了旋鏈角毛藻濾液化感物質的萃取和化感效應檢驗，并推測了化感物質的性質和初步結構。結果表明：旋鏈角毛藻的化感物質在50℃以下保持穩(wěn)定；旋鏈角毛藻指數(shù)期濾液化感作用強于衰亡期，表明旋鏈角毛藻指數(shù)期產(chǎn)生并釋放更多化感物質；光和細菌均引起旋鏈角毛藻化感物質的降解，且二者相比，細菌能夠降解更多的化感物質；旋鏈角毛藻的乙酸乙酯萃取物具有明顯的化感活性，且該萃取物在255～260 nm處有最大吸收峰。綜合以上結果，推測旋鏈角毛藻化感物質可能為分解溫度在50℃以上的易被光和細菌降解的含氮苯衍生物，從極性上看較易溶于乙酸乙酯。下一步分離鑒定旋鏈角毛藻化感物質的實驗中，可借鑒這些結論，選擇適當?shù)母患椒?，對旋鏈角毛藻化感物質進行純化，并結合對中肋骨條藻的化感效應檢驗，應用核磁、質譜等技術對有效的化感物質成分進行鑒定。

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The study on the influencing factors of Chaetoceros curvisetus allelopathic effect on Skeletonema costatum and the primary research on the properties of Chaetoceros curvisetus allelochemical

Zhang Yiwen1，Wang Jiangtao1，Tan Liju1

（1.Key Laboratory of Marine Chemistry Theory and Technology，Ministry of Education，Ocean University of China，Qingdao 266100，China）

On the basis of the fact that Chaetoceros curvisetus showed allelopathic effect on Skeletonema costatum，a series of experiments，including algal cultures and compounds extraction，were carried out to research the properties，influence factors，degradation characteristics and structure of C.curvisetus allelochemical.The results indicated that allelopathic effect of C.curvisetus was related to the growth phase，and the C.curvisetus filtrates in exponential phase caused the inhibition on the growth of S.costatum than that of declining phase filtrates.Chaetoceros curvisetus allelochemical remain stable under 50℃temperature and degraded as time went on attributed on light and bacteria，and bacteria contributed more.Furthermore，the ethyl acetate extraction of C.curvisetus filtrate showed significant allelopathic effect and the wavelength of characteristic absorption for the growth inhibitor was 255－260 nm.Consequently，the effect ingredient was dissolved by ethyl acetate.In addition，the allelochemical of C.curvisetus was supported to be benzene derivatives whose decomposition temperature was more than 50℃and could be degraded by light and bacteria.

allelochemical；Chaetoceros curvisetus；Skeletonema costatum

Q178.53

A

0253-4193（2014）02-0123-07

2012-09-06；

2013-10-08。

國家自然科學基金（41076065）；“973”項目（2010CB428701）。

張議文（1987—），女，山東省威海市人，博士研究生，主要研究方向為海洋生態(tài)化學。E-mail：shmilyxiaoxi＠163.com *通信作者：王江濤（1967—），男，河北省承德市人，教授，主要研究方向為海洋生態(tài)化學。E-mail：jtwang＠ouc.edu.cn

張議文，王江濤，譚麗菊.旋鏈角毛藻對中肋骨條藻化感作用的影響因素及化感物質性質初探［J］.海洋學報，2014，36（2）：123—129，

10.3969／j.issn.0253-4193.2014.02.014

Zhang Yiwen，Wang Jiangtao，Tan Liju.The study on the influencing factors of Chaetoceroscurvisetus allelopathic effect on Skeletonema costatum and the primary research on the properties of Chaetoceros curvisetus allelochemical［J］.Acta Oceanologica Sinica（in Chinese），2014，36（2）：123—129，doi：10.3969／j.issn.0253-4193.2014.02.014