王 劍 (山東省鄒平縣畜牧獸醫(yī)局 256200)
布魯氏桿菌病對奶牛肝功能影響
王 劍 (山東省鄒平縣畜牧獸醫(yī)局 256200)
從山東省鄒平縣規(guī)?;膛鲞x取1200頭奶牛,頸靜脈采血后進行布病虎紅平板凝集試驗初篩,然后使用試管凝集試驗復檢。選取182例陽性血清進行血液生化指標檢測?;夹蟾喂δ軠y定結(jié)果,肝功能異常者占95% 。肝功能異常與凝集試驗強度有關(guān)。
布魯氏桿菌病 肝功
布病是一種傳染性人畜共患病,極易侵犯機體網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng),全身各系統(tǒng)均可能受損。肝、脾、淋巴結(jié)等器官是最易受損部位。肝臟功能受損在人體感染布病有報道,在動物體報道較少。在實驗室布魯氏桿菌病檢測中虎紅平板凝集試驗陽性率大于試管凝集試驗陽性率[1]?;⒓t平板凝集試驗(RBPT)在國際貿(mào)易中是牛、羊、豬種布魯氏菌病的指定試驗。具有特異、敏感、廉價、操作簡便的特點,但受試驗溫度和凝集時間相對較短的影響,不易準確判定結(jié)果,所以主要作為布病監(jiān)測的初篩試驗。對RBPT陽性樣品還需要通過試管凝集試驗(SAT)或補體結(jié)合試驗(CFT)進行最終的判定[2]。使用虎紅平板凝集試驗方法篩檢鄒平縣1200頭奶牛,使用試管凝集方法復檢初篩陽性奶牛,然后對其中正常家畜和布病血清型陽性家畜進行肝功能測定。
1.1 病料 對選取的1200頭,飼養(yǎng)環(huán)境相同,均為2~3胎次年齡的奶牛頸靜脈采血。
1.2 儀器及試劑 布魯氏菌診斷用虎紅平板凝集抗原,試管凝集抗原購自青島易邦生物工程有限公司。血生化檢測使用邁瑞B(yǎng)S-380全自動生化分析儀。生化儀試劑為邁瑞全自動生化分析儀試劑。
1.3 虎紅平板凝集試驗 在一塊潔凈的玻璃板上劃出若干小格子,取30ul血清與30ul抗原混合,4min以內(nèi)觀察結(jié)果,同時作陰、陽性血清對照。出現(xiàn)凝集現(xiàn)象為陽性。
1.4 試管凝集試驗 血清用0.5%石碳酸生理鹽水做1:50、1:100兩個稀釋度稀釋 。對照管制作陰性血清對照,陽性血清對照,抗原對照,比濁管。反應強度按一下標準判斷:++++:完全凝集和沉淀,上層液體100%清亮(即100%菌體下沉)。+++:幾乎完全凝集和沉淀,上層液體75%清亮。++:沉淀明顯,液體50%清亮。+:無沉淀,液體25%清亮。-:無沉淀,不清亮。1:100倍稀釋出現(xiàn)“++”。以上的凝集現(xiàn)象時,被檢血清判定為陽性反應。
1.5 血生化檢測項目 丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶ALT、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶AST。使用前對ALT,AST項目進行定標和質(zhì)控。操作按照儀器使用說明進行。對試管凝集陽性的182頭奶牛進行檢測。
(1)1200頭奶牛中244頭奶牛平板凝集陽性。對244個陽性血清進行試管凝集試驗,有182頭陽性。(2)AST參考范圍78-138(U·L-1)ALT參考范圍14-38(U·L-1)。陽性樣品肝功能結(jié)果見表1。凝集實驗反應強度與ALT異常關(guān)系見表2。
表1 陽性樣品肝功能影響數(shù)量
表2 凝集實驗強度與ALT異常關(guān)系
(1)布病感染動物AST及ALT均有所上升。肝功能異常值與試管凝集強度有關(guān)。(2)布魯氏桿菌病病理變化極為廣泛,幾乎所有器官組織均可被侵犯。其中以單核巨噬細胞系統(tǒng)最為常見,而肝臟是單核巨噬細胞最豐富的地方,所以受布魯氏菌病是侵犯,實驗室及臨床研究都證明這一點。弱陽性病例肝功能指標趨向于正常動物。表明急性感染期過后隨著布氏桿菌病的控制,肝功能逐漸恢復,肝功能指標異常呈一過性,一般不會引起長期慢性肝損傷。(3)隨著奶牛精細化飼養(yǎng)方式的推行,奶牛血液生化研究的增多。霉菌毒素,飼料添加劑,乳房炎等均能影響動物的肝功能[3-4]。應注意區(qū)分。
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