徐文莉，廖長征，陳思祖

（深圳市龍崗中心醫(yī)院中心實驗室，廣東 深圳 518116）

N末端腦鈉肽前體、淋巴細(xì)胞亞群與原發(fā)性高血壓的相關(guān)性研究

徐文莉，廖長征，陳思祖

（深圳市龍崗中心醫(yī)院中心實驗室，廣東 深圳 518116）

目的探討原發(fā)性高血壓(EH)患者N末端腦鈉肽前體(NT-proBNP)及淋巴細(xì)胞亞群等指標(biāo)變化情況。方法328例高血壓確診患者按照分級標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分組，其中EH1級組115例，EH2級組109例，EH3級組104例；以120例同期健康體檢者作為對照組。采用電化學(xué)發(fā)光免疫分析測定NT-proBNP水平和流式細(xì)胞儀分析CD3+、CD4+、CD8+、CD19+水平，組間進(jìn)行比較。結(jié)果高血壓組血清中NT-proBNP、CD4+/CD8+、CD19+水平較健康對照組明顯升高（P＜0.05），其中EH3級組升高最顯著；CD3+、CD4+、CD8+細(xì)胞明顯低于正常對照組(P＜0.05)，EH3級組降低最顯著。NT-proBNP水平與CD3+、CD4+、CD8+等指標(biāo)均呈顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.951，r=-0.973，r=-0.955；P均＜0.01），與CD19+細(xì)胞（B細(xì)胞）、CD4+/CD8+呈顯著正相關(guān)(r=0.934，r=0.98；P均＜0.01)。結(jié)論EH患者的血壓的臨床分級與NT-proBNP、CD3+、CD4+、CD8+、CD19+的水平密切相關(guān)，并可能參與EH的病理生理過程。

原發(fā)性高血壓；N末端腦鈉肽前體；淋巴細(xì)胞亞群

我國人群數(shù)據(jù)監(jiān)測顯示，心腦血管死亡人數(shù)占總死亡人數(shù)的40%以上，其中高血壓是首位危險因素，每年300萬心血管死亡中至少一半與高血壓有關(guān)，但其具有可控性，血壓的合理控制將大大減少心腦血管疾病的發(fā)生[1]。有研究表明原發(fā)性高血壓(Essential hypertension，EH)與神經(jīng)內(nèi)分泌因素有密切的聯(lián)系，而腦鈉肽(Brain natriuretic peptide，BNP)作為重要神經(jīng)內(nèi)分泌因子之一，已日益受到臨床工作者的關(guān)注。BNP是一種心室激素，其濃度可以反映心室的充盈壓，同時，BNP作為心臟旁分泌激素，其濃度目前已經(jīng)被公認(rèn)為評估心力衰竭的生物學(xué)指標(biāo)，近幾年研究發(fā)現(xiàn)BNP與原發(fā)性高血壓有相關(guān)性[2]。近年來的研究表明，細(xì)胞免疫功能紊亂是高血壓發(fā)病機(jī)理之一，而免疫功能的紊亂可導(dǎo)致自身免疫反應(yīng)及炎癥反應(yīng)的發(fā)生，其在原發(fā)性高血壓中發(fā)生、發(fā)展中起著重要的作用[3]。本文通過對原發(fā)性高血壓患者血漿BNP水平及淋巴細(xì)胞亞群的測定，了解其在該病中的臨床價值，以便為臨床病情進(jìn)展、療效觀察提供簡單可靠的臨床指標(biāo)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2011年1月至2013年5月在我院心內(nèi)科門診及住院患者328例，男性170例，女性158例，年齡36～77歲，平均(56.7±10.2)歲，所有患者均符合2010年《中國高血壓防治指南》的高血壓診斷標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)該指南中高血壓的診斷和臨床分級標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分類，高血壓1級(EH1級)組115例，高血壓2級(EH2級)組109例，高血壓1級(EH3級)組104例；選擇同期來我院的健康體檢者120例作為對照組，男性58例，女性62例，年齡45～65歲，平均(54.2±11.0)歲，兩組間年齡、性別差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，排除肝、腎功能異常，感染、呼吸衰竭等干擾情況。

1.2 試驗方法

1.2.1 血壓的測定 用臺式水銀血壓計，平靜休息15 min，患者取坐位測量左上臂肱動脈血壓，連續(xù)測量3次，取其平均值。

1.2.2 NT-proBNP的測定 所有受試者均空腹采血3 ml，及時分離血清，-20℃冰箱保存，測定時室溫平衡30 min，采用電化學(xué)發(fā)光的測定，儀器和試劑為羅氏公司全自動電化學(xué)發(fā)光儀E170及其配套試劑。

1.2.3 淋巴細(xì)胞亞群的測定 熒光標(biāo)記抗體CD3-FITC、CD4-PE、CD8-PE、CD19-PE、Ig-FITC和Ig-PE以及流式細(xì)胞儀Facscalibur購于美國BD公司。受試者空腹靜脈采血1 ml(EDTA抗凝)，取100 μl和10 μl單抗混合，室溫孵育20 min，加入紅細(xì)胞裂解液500 μl，震蕩混勻、避光15 min，2 h內(nèi)上流式細(xì)胞儀檢測。采用Simunset自動軟件對樣品進(jìn)行獲取及分析。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，計量資料符合正態(tài)分布的采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示，采用單因素方差分析(ANOVA)及Pearson相關(guān)性分析；不符合正態(tài)分布時，可進(jìn)行對數(shù)變換后組間比較采用單因素方差分析或采用Kruskal-Wills H檢驗，變量進(jìn)行對數(shù)轉(zhuǎn)換，若轉(zhuǎn)換后仍不能滿足正態(tài)性，則采用Spearman秩相關(guān)性分析，以P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同血壓級別NT-proBNP和免疫指標(biāo)的比較 高血壓患者中NT-proBNP隨著血壓級別的上升而升高，組間比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。即隨EH患者的疾病嚴(yán)重程度而增加，高血壓組CD3+、CD4+、CD8+細(xì)胞明顯低于正常對照組，并隨血壓級別的升高而降低；CD19+、CD4+/CD8+明顯高于對照組，并隨血壓級別的升高而升高，見表1。

表1 高血壓組與正常對照組NT-proBNP及免疫指標(biāo)的比較()

表1 高血壓組與正常對照組NT-proBNP及免疫指標(biāo)的比較()

注：與對照組，aP=0.000，bP=0.02；與EH1級組比較，cP=0.000，dP=0.04；與EH2級組比較，eP=0.000。

組別對照組EH1級組EH2級組EH3級組F值P值CD19(%) 8.17±0.69 13.4±0.65a19.07±0.79ac25.68±0.50ace40.856 0.000例數(shù)120 115 109 104 NT-proBNP(pg/ml) 75.49±1.44 103.28±1.16a193.89±1.25ac295.72±1.75ace57.256 0.000 CD3(%) 68.27±1.10 60.04±1.11a52.35±0.79ac46.61±0.82ace27.357 0.000 CD4(%) 43.14±1.11 38.04±0.73a33.98±1.14ac26.41±0.57ace22.275 0.002 CD8(%) 36.29±0.97 28.13±0.71a22.74±0.92ac1.70±0.08ace35.268 0.000 CD4/CD8(%) 1.19±0.05 1.35±0.06ab1.50±0.08ae15.57±0.70ace17.893 0.003

2.2 NT-proBNP和免疫指標(biāo)間的相關(guān)性 高血壓組血漿NT-proBNP水平與CD3+、CD4+、CD8+等指標(biāo)均呈顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.951，r=-0.973，r=-0.955；P均＜0.01)，與CD19+細(xì)胞(B細(xì)胞)、CD4+/CD8+呈顯著正相關(guān)(r=0.934，r=0.98；P均＜0.01)。

3 討論

原發(fā)性高血壓是常見的慢性病，也是心腦血管疾病最主要的危險因素，其中腦卒中、心肌梗死、心力衰竭及慢性腎臟等主要并發(fā)癥不僅僅致殘、致死率高，而且嚴(yán)重消耗醫(yī)療和社會資源，給國家和家庭造成沉重負(fù)擔(dān)。國內(nèi)外的實踐證明，降低高血壓患者的血壓水平，可以明顯減少腦卒中及心臟病事件，顯著改善生存質(zhì)量，有效降低疾病負(fù)擔(dān)，尋找與疾病發(fā)生有關(guān)的早期預(yù)測因素和潛在的病理機(jī)制，對于探討早期診斷和早期干預(yù)有著重要的臨床意義。

腦鈉肽在正常人中的水平很低且非常穩(wěn)定，在心室負(fù)荷過重或心臟擴(kuò)大時，心肌內(nèi)儲存的腦利鈉前肽即被釋放并很快分解為具有內(nèi)分泌活性的BNP，從而很好地反映心室的功能狀態(tài)[4]。本文結(jié)果表明，高血壓患者的血漿NT-proBNP明顯高于對照組，并隨EH1級組、EH2級組、EH3級組的收縮壓和舒張壓的增加而增加，從而顯示高血壓患者的血漿NT-proBNP水平與EH患者的血壓升高的程度和靶器官的損害程度密切相關(guān)，能夠反映EH患者的嚴(yán)重程度。

近年來，免疫在原發(fā)性高血壓發(fā)病機(jī)制的作用越來越受到人們的重視。研究證實淋巴細(xì)胞對體內(nèi)一切體液和細(xì)胞免疫反應(yīng)類型及強(qiáng)度都有著重要的調(diào)節(jié)作用。本文研究顯示，高血壓患者CD4+細(xì)胞、CD8+細(xì)胞明顯低于對照組，而CD4+/CD8+比值明顯升高，可見CD8+細(xì)胞比CD4+細(xì)胞下降更顯著，免疫功能的失衡可能導(dǎo)致B細(xì)胞功能的增強(qiáng)，進(jìn)而分泌抗體增強(qiáng)，導(dǎo)致抗原-抗體復(fù)合物的形成，激活補(bǔ)體引起血管內(nèi)皮損傷，參與高血壓的發(fā)生和發(fā)展[5]。研究結(jié)果顯示B細(xì)胞數(shù)量明顯高于對照組，與上述的推測相吻合。已有文獻(xiàn)報道，外周血IgG、C3與原發(fā)性高血壓的嚴(yán)重程度密切相關(guān)[6]。

炎癥在高血壓的發(fā)生、發(fā)展以及對靶器官的損害中起著重要作用，而高血壓通過其血流動力學(xué)刺激又可促進(jìn)炎性反應(yīng)。越來越多的證據(jù)表明以炎癥細(xì)胞浸潤為特征的血管炎癥時高血壓進(jìn)展的重要機(jī)制[7-8]，其特征是淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞在內(nèi)皮下的聚集，造成免疫功能的紊亂，產(chǎn)生和釋放多種活性因子，激活心肌的細(xì)胞外基質(zhì)形成細(xì)胞，引起膠原形成及代謝異常，并可導(dǎo)致心肌實質(zhì)細(xì)胞的變性、壞死或亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)變化等，從而引起一系列病理生理變化，導(dǎo)致心功能的改變，從而引起NT-proBNP分泌的增加，這與本研究的試驗結(jié)果一致?？梢姼哐獕夯颊叽嬖诿庖哒{(diào)節(jié)紊亂，在降壓的過程中應(yīng)重視患者體內(nèi)的免疫調(diào)節(jié)功能，以有效的降低血壓及防治靶器官的損害。

綜上所述，NT-proBNP代表高血壓對機(jī)體的負(fù)荷，淋巴細(xì)胞可作為高血壓患者體內(nèi)免疫狀態(tài)的一種客觀指標(biāo)，聯(lián)合檢測可以對疾病病情的發(fā)展提供有效的依據(jù)。

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Relationship between N-terminal pro-brain natriuretic peptide,lymphocyte subpopulation and essentialhypertension.

XU Wen-li,LIAO Chang-zheng,CHEN Si-zu.Central Laboratory Shenzhen Longgang Center Hospital, Shenzhen 518116,Guangdong,CHINA

ObjectiveTo study the change of N-terminal pro-brain natriuretic peptide and lymphocyte subpopulation in essential hypertensive patients.MethodsTotally 328 hypertensive patients were divided into three groups according to the standard of classification:grade 1 hypertensive(115 patients),grade 2 hypertensive(109 patients)and grade 3 hypertensive(104 patients).As the same time 120 normal controls were enrolled as control group. CD3+、CD4+、CD8+、CD19+level and serum NT-proBNP concentration were measured by flow cytometry and electrochemiluminescence immunoassay(ECLIA).ResultsNT-ptoBNP,CD4/CD8and CD19+levels in 328 patients with EH were significantly higher than those in the controls(P＜0.05)and they were increased with the increases of blood pressure,but CD3+,CD4+and CD8+levels were significantly lower(P＜0.05)than the control and they were decreased with the increases of blood pressure.NT-proBNP level was negatively correlated with CD3+,CD4+and CD8+(r=-0.951,r=-0.973,r=-0.955;P＜0.01),and was positively correlated withand(r=0.934,r=0.98;P＜0.01).ConclusionNT-proBNP,were closely correlated with EH stage and probably involved in the pathophysiological process of EH.

Essential hypertension;N-terminal pro-brain natriuretic peptide(NT-proBNP);Lymphocyte subpopulation

R544.1

A

1003—6350（2014）23—3486—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.23.1362

2013-10-12)

徐文莉。E-mail：gzsd123@163.com