謝兆蘭，周立云，王明林，郭遂懷

（武漢市武昌醫(yī)院消化內(nèi)科，湖北 武漢 430016）

幽門螺桿菌（Hp）相關(guān)性疾病主要包括慢性胃炎、消化性潰瘍、胃黏膜相關(guān)淋巴樣組織淋巴瘤、胃癌等［1－2］。其中，慢性胃炎是最常見的消化系統(tǒng)疾病。目前認(rèn)為，Hp感染是慢性胃炎發(fā)生的最常見原因，但并非每次Hp感染均會(huì)產(chǎn)生明顯癥狀。流行病學(xué)資料顯示，全世界約有一半人感染Hp，但其中僅有10%的感染者可發(fā)展為明顯的臨床疾病，其原因與不同Hp菌株的毒力差異有關(guān)。細(xì)胞毒素相關(guān)基因A（CagA）是Hp重要的毒力基因，編碼細(xì)胞毒素相關(guān)蛋白，與胃黏膜炎癥改變甚至胃癌發(fā)生有密切關(guān)系。但是目前國內(nèi)較少有CagA對(duì)慢性胃炎病人胃黏膜炎性活動(dòng)度、Hp密度作用的研究，CagA和慢性胃炎胃黏膜萎縮、腸上皮化生關(guān)系也鮮有報(bào)道。本文對(duì)慢性胃炎病人進(jìn)行血清CagA抗體檢測(cè)和胃黏膜組織病理學(xué)檢查，探討CagA與慢性胃炎病人胃黏膜炎癥活動(dòng)度之間的關(guān)系，以及CagA對(duì)慢性胃炎病人Hp密度、胃黏膜萎縮和腸上皮化生的影響，以期為慢性胃炎的臨床治療提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2012年4—8月，選擇在我院經(jīng)胃鏡檢查診斷為慢性胃炎，C14呼氣試驗(yàn)陽性病人80例，男49例，女31例；年齡24～60歲，平均（46.25±4.51）歲。慢性胃炎胃鏡診斷符合悉尼系統(tǒng)及2000年國內(nèi)慢性胃炎研討會(huì)標(biāo)準(zhǔn)［3］。排除標(biāo)準(zhǔn)：①對(duì)胃部存在影響的器質(zhì)性疾病如心力衰竭、嚴(yán)重肝衰竭、腎衰竭者；②于4周內(nèi)使用過對(duì)Hp有影響的藥物，如質(zhì)子泵抑制劑、H2受體拮抗劑、抗生素、鉍劑等；③孕婦、腫瘤病人。所有受檢者均簽署知情同意書。所有入選病人行胃鏡檢查時(shí)于距幽門前3～5cm 處鉗取胃竇組織3塊用于檢查。

1.2 檢測(cè)指標(biāo)及方法

1.2.1 血清CagA抗體檢測(cè) 采集病人空腹靜脈血2mL，離心10min（6 000～8 000r／min），取上清液，置于－20℃冰箱中保存。應(yīng)用CagA ELISA試劑盒（深圳欣康基因數(shù)碼科技有限公司），酶免疫技術(shù)測(cè)定血清CagA抗體，按試劑盒說明操作。

1.2.2 胃黏膜病理學(xué)檢查 將胃黏膜組織標(biāo)本置于40g／L甲醛溶液中固定，常規(guī)石蠟包埋、切片，顯微鏡下觀察。參照文獻(xiàn)［3］的標(biāo)準(zhǔn)，由病理科醫(yī)師觀察以下指標(biāo)：黏膜炎癥活動(dòng)性，萎縮、腸上皮化生情況，Hp密度。炎癥活動(dòng)性程度分級(jí)為：輕度，黏膜固有層少數(shù)中性粒細(xì)胞浸潤；中度，中性粒細(xì)胞較多存在于黏膜層，并在表面上皮細(xì)胞間、小凹上皮細(xì)胞間或腺管上皮間等均可見；重度，中性粒細(xì)胞較密集，或除中度所見外還見小凹膿腫。在蘇木精－伊紅和GIEMSA染色切片上，應(yīng)用高倍鏡（100倍）觀察，Hp主要分布于胃黏膜黏液層、胃小凹和腺管上皮表面、腔內(nèi)，呈稍彎曲的桿狀或棒狀。Hp密度分級(jí)：輕度，偶見或小于標(biāo)本全長1／3有少數(shù)Hp；中度，Hp分布超過標(biāo)本全長1／3而未達(dá)2／3，或連續(xù)性、薄而稀疏地存在于上皮表面；重度，Hp成堆存在，基本分布于標(biāo)本全長。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 11.5軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料比較采用Fisher確切概率或卡方檢驗(yàn)，等級(jí)資料比較采用秩和檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有顯著性。

2 結(jié) 果

2.1 慢性胃炎病人血清CagA抗體陽性情況

本文研究結(jié)果顯示，80例慢性胃炎病人血清CagA抗體陽性52例（65.0%），陰性28例（35.0%）。CagA抗體陽性病人中男33例（41.2%），女19例（23.7%）；CagA抗體陰性病人中男16 例（20.0%），女12例（15.0%）。

2.2 慢性胃炎病人血清CagA抗體與胃黏膜病理改變的關(guān)系

慢性胃炎CagA抗體陽性組病人胃黏膜炎癥活動(dòng)性程度顯著高于同性別的CagA抗體陰性組，差異有顯著性（χ2＝12.161、6.111，P＜0.05）。CagA抗體陽性組胃黏膜腸上皮化生、萎縮情況與同性別CagA抗體陰性組相比較，差異均無顯著意義（P＞0.05）。不同性別間各指標(biāo)差異均無顯著性（P＞0.05）。見表1～3。

2.3 慢性胃炎血清CagA抗體與Hp密度的關(guān)系

CagA抗體陽性組胃黏膜Hp密度與同性別CagA抗體陰性組相比，差異無顯著性（P＞0.05）。不同性別間比較差異無顯著性（P＞0.05）。見表4。

表1 CagA抗體反應(yīng)與胃黏膜炎癥程度關(guān)系（例）

表2 CagA抗體反應(yīng)與胃黏膜腸上皮化生關(guān)系（例）

表3 CagA抗體反應(yīng)與胃黏膜萎縮關(guān)系（例）

表4 CagA抗體反應(yīng)與Hp密度的關(guān)系（例）

3 討 論

Hp于1983年首先由澳大利亞學(xué)者WARREN和WARSHALL從胃黏膜活檢組織中分離出來，是一種微需氧、革蘭陰性螺旋形細(xì)菌。Hp與慢性胃炎、消化性潰瘍、胃黏膜相關(guān)淋巴樣組織淋巴瘤甚至胃癌等疾病密切相關(guān)，已被國際癌癥研究機(jī)構(gòu)（IARC）列為Ⅰ類致癌物之一。Hp為一種寄生于人體的條件致病菌，可以在胃黏膜中長期定植，其CagA毒力基因的表達(dá)與B型胃炎的發(fā)生與發(fā)展密切相關(guān)［4］。CagA是位于細(xì)胞表面的親水性免疫顯性蛋白，血清學(xué)檢測(cè)約60%的Hp含有此蛋白。CagA是Hp的重要毒力因子之一，存在于所有具有空泡毒素活性的Hp菌株中，雖不直接介導(dǎo)毒素活性，但與空泡毒素的表達(dá)密切相關(guān)，因此稱為細(xì)胞毒素相關(guān)蛋白。

本研究80例慢性胃炎病人血清CagA抗體陽性率為65.0%，慢性胃炎CagA抗體陽性組胃黏膜炎癥活動(dòng)性程度顯著高于CagA抗體陰性組，差異有顯著性。與文獻(xiàn)［5］結(jié)果基本相符，提示CagA與慢性胃炎的炎癥活動(dòng)性程度相關(guān)，是引起慢性胃炎的重要致病因子［6］。本文結(jié)果顯示，CagA抗體陽性組與陰性組間Hp密度及胃黏膜腸上皮化生、萎縮情況比較，差異無顯著性。提示CagA并非致胃黏膜萎縮、腸上皮化生的特異性因子；同時(shí)，性別對(duì)以上指標(biāo)結(jié)果無影響。本實(shí)驗(yàn)將性別區(qū)分開來對(duì)各項(xiàng)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，排除了性別可能對(duì)分析結(jié)果產(chǎn)生的干擾。

既往研究結(jié)果已證實(shí)，在與Hp感染相關(guān)的B型胃炎中，CagA陽性的Hp可通過Ⅳ型分泌系統(tǒng)將CagA蛋白注入到胃上皮細(xì)胞中，并誘導(dǎo)IL－8轉(zhuǎn)錄及蛋白水平表達(dá)上調(diào)，從而導(dǎo)致中性粒細(xì)胞的募集和胃黏膜組織的炎性損傷［7－8］，有利于人體對(duì)Hp進(jìn)行清除。本文結(jié)果顯示，CagA抗體陽性的慢性胃炎病人胃黏膜中炎癥活動(dòng)性程度顯著強(qiáng)于CagA抗體陰性組，推測(cè)這一現(xiàn)象可能與上述機(jī)制密切相關(guān)。然而，與未攜帶CagA基因的Hp相比，CagA蛋白表達(dá)陽性的Hp在胃黏膜層中的密度未見顯著降低。該結(jié)果提示，盡管CagA基因的表達(dá)會(huì)誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞在胃黏膜組織的浸潤和炎性損傷的加重，人體卻無法有效清除Hp在胃黏膜中的定植，導(dǎo)致慢性胃炎反復(fù)發(fā)作，遷延不愈，增加了癌變的潛在危險(xiǎn)。其原因可能為CagA并非Hp感染致病的單一因素，人體的細(xì)胞免疫應(yīng)答功能可能在清除Hp感染的過程中起著關(guān)鍵性作用［9］，具體機(jī)制還有待進(jìn)一步深入研究。

綜上所述，CagA作為Hp的毒力蛋白，可誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞在胃黏膜的募集，加重局部胃黏膜的炎癥活動(dòng)性；人體無法有效清除Hp在胃黏膜中的定植。同時(shí)，CagA對(duì)胃黏膜的腸上皮化生、萎縮影響不大。

［1］董麗麗，項(xiàng)鋒鋼，高建青.胃癌組織Survivin蛋白表達(dá)及其與Hp感染關(guān)系［J］.齊魯醫(yī)學(xué)雜志，2008，23（6）：489－491.

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［3］中華醫(yī)學(xué)會(huì)消化病學(xué)分會(huì).全國慢性胃炎研討會(huì)共識(shí)意見［J］.中華消化雜志，2000，6（20）：199－201.

［4］FIGURA N，MORETTI E，ROVIELLO F，et al.CagA structural types of Helicobacter pylori strains isolated from patients with gastric carcinoma and chronic gastritis only［J］.Intern Emerg Med，2002，7：103－105.

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