摘要：目的 探討金黃色葡萄球菌臨床分離株對(duì)紅霉素和克林霉素的耐藥性及紅霉素對(duì)克林霉素誘導(dǎo)耐藥分析。 方法 采用紙片擴(kuò)散方法測(cè)定金黃色葡萄球菌對(duì)紅霉素和克林霉素的耐藥性，并以D-試驗(yàn)法測(cè)定紅霉素對(duì)克林霉素的誘導(dǎo)耐藥表型。結(jié)果 189株金黃色葡萄球菌中耐甲氧西林135株占71.43%，甲氧西林敏54株占28.57%。紅霉素和克林霉素均耐藥的105株占55.56%，紅霉素和克林霉素均敏感19株占10.05%，紅霉素耐藥而克林霉素敏感65株占34.39%。對(duì)紅霉素耐藥而克林霉素敏感的MRSA和MSSA誘導(dǎo)耐藥發(fā)生率分別為62%和66.67%。結(jié)論 檢測(cè)金黃色葡萄球菌中克林霉素誘導(dǎo)性耐藥可以指導(dǎo)臨床醫(yī)師合理選用抗菌藥物。

關(guān)鍵詞：金黃色葡萄球菌；紅霉素；克林霉素；耐藥率；誘導(dǎo)耐藥

金黃色葡萄球菌屬（MRSA）已成為引起醫(yī)院和社區(qū)化膿感染的重要病原菌，臨床金黃色葡萄球菌感染廣泛應(yīng)用了大環(huán)內(nèi)酯類、林可酰胺類和鏈陽(yáng)菌素B類（MLSB）抗菌藥物治療，尤其是組織滲透強(qiáng)、價(jià)格低等特點(diǎn)的克林霉素常被作為對(duì)青霉素和頭孢菌素過(guò)敏的替代首選藥品。近年來(lái)，隨著耐藥性病原菌的不斷增加，大環(huán)內(nèi)酯類藥物已呈現(xiàn)較高的耐藥性，且紅霉素具有誘導(dǎo)克林霉素耐藥的作用[1]。本文實(shí)驗(yàn)通過(guò)D-試驗(yàn)法對(duì)金黃色葡萄球菌中紅霉素對(duì)克林霉素的誘導(dǎo)耐藥作用進(jìn)行檢測(cè)，以便指導(dǎo)臨床合理用藥，現(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料 本院2012年11月～2013年12月分離收集金黃色葡萄球菌標(biāo)本189株作為研究對(duì)象，其中痰標(biāo)本78株、分泌物62株、10株為血標(biāo)本、23株為咽拭子、尿標(biāo)本及導(dǎo)管標(biāo)本等。紙片擴(kuò)散法藥敏試驗(yàn)的質(zhì)控菌株為標(biāo)準(zhǔn)菌株金黃色葡萄球菌。

1.2 方法

1.2.1 儀器及藥敏紙片 德靈MicroScan-4細(xì)菌鑒定儀以及配套的鑒定卡PC20；MH瓊脂、頭孢西?。‵OX，30μg/片）、紅霉素（15μg/片）、克林霉素（2μg/片）紙片為英國(guó)OXOID公司產(chǎn)品。

1.2.2 藥敏試驗(yàn) 采用紙片擴(kuò)散法檢測(cè)紅霉素和克林霉素的耐藥性及用頭孢西丁確診MRSA，質(zhì)控菌株金黃色葡萄球菌ATCC25923。

1.2.3 D-試驗(yàn) 按2009年美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)（CLSI）標(biāo)準(zhǔn)操作[2]。紅霉素耐藥而克林霉素敏感株，用生理鹽水成菌0.5個(gè)麥?zhǔn)蠁挝灰壕鶆蛲坎荚?mm厚的MH瓊脂平板上。間隔15～20mm貼上紅霉素和克林霉素紙片，置孵育箱孵育18～24h（恒溫35℃）。若鄰近克林霉素抑菌環(huán)出現(xiàn)\"截平\"現(xiàn)象，即D-試驗(yàn)陽(yáng)性；若克林霉素抑菌環(huán)不出現(xiàn)\"截平\"現(xiàn)象，即D-試驗(yàn)陰性。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 數(shù)據(jù)采用WHONET5.3進(jìn)行處理，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)并比較二者差異有無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 MRSA的檢出率 189株金黃色葡萄球菌中MRSA 135株占71.43%，MSSA 54株占28.57%。

2.2 耐藥表型 135株MRSA中，紅霉素和克林霉素均敏感的7株，紅霉素和克林霉素均耐藥的78株，紅霉素耐藥而克林霉素敏感的50株。54株MSSA中，紅霉素和克林霉素均敏感的12株，紅霉素和克林霉素均耐藥的27株，紅霉素耐藥而克林霉素敏感的15株（見(jiàn)表1）。

注：Er為紅霉素；CI為克林霉素；R為耐藥；S為敏感

2.3 克林霉素誘導(dǎo)耐藥發(fā)生率 金黃色葡萄球菌中紅霉素耐藥克林霉素敏感65株，D-試驗(yàn)陽(yáng)性41株，誘導(dǎo)耐藥發(fā)生率為63.08%。其中50株MRSA試驗(yàn)陽(yáng)性31株發(fā)生率為62%；15株MSSA試驗(yàn)陽(yáng)性10株發(fā)生率為66.67%（見(jiàn)表2）。

3 討論

金黃色葡萄球菌是引起醫(yī)院和社區(qū)化膿感染各種感染的重要病原菌之一，可引起全身不同部位的感染。近年來(lái)，MRSA的感染率呈現(xiàn)逐年上升的趨勢(shì)，其嚴(yán)重的多重耐藥性已成為臨床上較為棘手的問(wèn)題[3]。MRSA對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物的耐藥機(jī)制主要有兩種[4]：前者由msrA基因編碼外排蛋白導(dǎo)致對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類和鏈陽(yáng)霉素的耐藥，對(duì)克林霉素敏感。后者由msr基因編碼， 引起對(duì)具有相同靶位的大環(huán)內(nèi)酯類、林可霉素類和B型鏈陽(yáng)霉素同時(shí)耐藥（MLSB耐藥），耐藥可分為結(jié)構(gòu)型（cMLS）和誘導(dǎo)型（iMLS）。

克林霉素由于具有組織滲透性強(qiáng)、價(jià)格低等特點(diǎn)，是葡萄球菌感染，特別是皮膚和軟組織感染及對(duì)青霉素過(guò)敏患者的首選藥物[5]。常規(guī)紙片擴(kuò)散法藥敏試驗(yàn)可鑒別結(jié)構(gòu)型cMLS型耐藥的金黃色葡萄球菌，而誘導(dǎo)型iMLS型和MS型耐藥菌株則無(wú)法鑒別。應(yīng)在所有臨床微生物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)推廣D-試驗(yàn)檢測(cè)紅霉素對(duì)克林霉素的誘導(dǎo)耐藥性。在克林霉素臨床治療中，如果克林霉素敏感而紅霉素耐藥的表型為誘導(dǎo)耐藥，且誘導(dǎo)試驗(yàn)沒(méi)有做的情況下，會(huì)致使治療失敗。故在金黃色葡萄球菌耐藥性監(jiān)測(cè)中，開展D-試驗(yàn)可幫助臨床合理有效及時(shí)的使用正確的抗菌藥物。

參考文獻(xiàn)：

[1] 俞蕙，吳霞.耐甲氧西林金黃色葡萄球菌耐藥機(jī)制及研究進(jìn)展[J].實(shí)用兒科臨床雜志.2012， 27（22）：1704-1706.

[2] National Committee for Clinical Laboratory Standards.Performance standards for anfimierobial susceptibilitytesting[S].M100-S19，CLSI，2009.

[3] 饒榮，劉志軍，譚東云.我院金黃色葡萄球菌的分布特點(diǎn)、耐藥性分析及治療對(duì)策[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志.2011， 20（7）：874-875.

[4] 孫建文，萬(wàn)新亮，任孔華.金黃色葡萄球菌對(duì)紅霉素和克林霉素誘導(dǎo)耐藥分析[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué).2010， 25（9）：675-677.

[5] 李彥媚，李純厚，趙喜紅，等.金黃色葡萄球菌檢測(cè)方法的研究進(jìn)展[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué).2012， 40（16）：8927-8929.

編輯/王海靜