摘要：本研究采用對峙培養(yǎng)的方法，研究了棘孢木霉菌天Q1對稻瘟病菌、尖孢鐮刀菌、立枯絲核菌及核盤菌等9種植物病原菌生長的抑制作用。結果表明：棘孢木霉菌天Q1對不同病原菌都具有較好的抑制作用。對赤霉菌的抑制效率最高，為59.09%，其次是串珠菌，對核盤菌的抑制率較低；棘孢木霉菌天Q1產生的非揮發(fā)性物質和揮發(fā)性物質的抑菌實驗結果表明，其產生的非揮發(fā)性物質對9種病原菌都具有一定的抑制效果，但是揮發(fā)性物質沒有明顯的抑制作用。

關鍵詞：大棘孢木霉菌天Q1；對峙；拮抗活性

中圖分類號：S482 文獻標識碼： A 文章編號： 1674-0432（2014）-16-19-1

隨著生態(tài)農業(yè)可持續(xù)發(fā)展重要思想的提出，生物防治受到了人們越來越多的關注。在農作物病蟲害防治技術中生物防治是一門傳統(tǒng)應用科學，因具備對環(huán)境友好，人、畜、作物安全，應用價值高等諸多優(yōu)點而受到世界各地政府和科學界關注。用來防治作物病害的真菌主要有木霉菌、鐮刀菌、青霉菌等，其中木霉菌是應用最多的一種。木霉菌屬于半知菌類絲孢綱叢梗孢目叢梗孢科，廣泛存在于土壤、植物殘體、植物根圍、植物葉片及種子、球莖表面及動物糞便上。通過對木霉菌對不同病原菌拮抗作用的測定，可為開發(fā)木霉生物防治產品提供科學依據，為農業(yè)的可持續(xù)發(fā)展奠定堅實基礎的同時也豐富了木霉菌種類資源，這是木霉研究中亟待完善的一項基礎工作。

1 材料與方法

1.1 材料

P天A培養(yǎng)基：馬鈴薯200克，葡萄糖20克，瓊脂15～18克，水1000毫升。

CA 培養(yǎng)基：胡蘿卜200克，瓊脂18克，水1000毫升。

1.2 方法

1.2.1 對峙培養(yǎng) 從活化2天的病原菌菌落邊緣打取菌餅（直徑5毫米），將其置于P天A平板一側，28℃培養(yǎng)24小時后，將同樣大小的木霉菌餅置于病原菌的對側。每菌株重復8次，以只接種病原菌的平板作對照。對峙平板于28℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3天，測量病原菌的菌落半徑，并計算抑制率。抑菌率=（對照菌落半徑-處理菌落半徑）/對照菌落半徑×100%。

1.2.2 非揮發(fā)性產物對病原菌的抑制作用 在直徑9厘米的P天A平板上平鋪滅過菌的圓形玻璃紙（直徑9.2厘米），將活化2天的木霉菌（直徑5毫米）置于平板玻璃紙中央，28℃恒溫培養(yǎng)。1天后去除玻璃紙，在平板中央接入病原菌菌餅（直徑5 毫米）。以只接種病原菌的處理為對照。恒溫培養(yǎng)3天，測量病原菌菌落半徑，并計算抑制率。

1.2.3 揮發(fā)性產物對病原菌的抑制作用 在活化2天的木霉菌菌落邊緣打取直徑5毫米的菌餅，接種于P天A平板中央，黑暗條件下28℃恒溫培養(yǎng)至菌落半徑約5厘米。此時，棄去平板上的菌餅，在平板上方蓋直徑為9厘米的單層無菌玻璃紙，然后對扣1個大小相等、且接種有直徑5毫米的病原菌菌餅的平板，病原菌菌餅與上方玻璃紙之間的空間供木霉菌揮發(fā)性物質與病原菌互作，封口膜密封后，將平板置于黑暗條件下28℃恒溫培養(yǎng)。以未接種供試木霉菌株的P天A平板和接種病原菌的平板對扣處理作為對照，每處理重復8次，3天后測量病原菌菌落半徑并計算抑制率。

2 結果與分析

2.1 對峙培養(yǎng)

對峙試驗結果表明，天Q1對不同病菌的拮抗效果有明顯差異（見圖1）。對赤霉菌的抑制效果最高，為59.09%；其次是串珠菌，為57.14%；對紋枯菌、早疫菌、灰霉菌和茄腐菌的抑制效果也較好，分別為55.17%，51.51%，53.85%，52.78%；對立枯菌和核盤菌的抑制效果較低，分別為42.86%和40%；對稻瘟菌的抑制率最低，為38.89%。

2.2 非揮發(fā)性產物對病原菌的抑制作用

由圖2可以看出，天Q1對立枯菌的抑制效果最好，對病原菌的抑制率為77.78%；對紋枯菌也表現(xiàn)出較好的抑制作用，抑制率為73.33%；對灰霉菌、茄腐菌和早疫菌的抑制效果一般，分別為35.56%、24.44%和21.12%；對核盤菌、串珠菌和赤霉菌的抑制效果較弱，分別為18.18%、13.33%和15.56%；對稻瘟菌的抑制效果最弱，為5.4%。

2.3 揮發(fā)性產物對病原菌的抑制作用

通過實驗測得結果顯示，天Q1的揮發(fā)性產物對立枯菌的抑制效果較明顯，為37.23%；對赤霉菌、灰霉菌、核盤菌和串珠菌的抑制效果一般，分別為5.73%、1.43%、6.22%和5.43%；對紋枯菌、早疫菌、稻瘟菌和茄腐菌的抑制效果不明顯，分別為0.02%、0.15%、0.01%和0.12%。

3 結語

本研究結果顯示，天Q1對9種病原菌都有抑制效果，對赤霉病菌的抑制效果最好；對紋枯病菌、串珠病菌和立枯病菌抑制效果較好；對茄腐病菌、灰霉病菌和早疫病菌也有較好的抑制效果。其中天Q1的非揮發(fā)性產物抑制作用較明顯，而揮發(fā)性產物沒有表現(xiàn)出明顯的抑制效果。由于木霉菌極高的生防應用價值，因此對局部地域的優(yōu)勢木霉菌的篩選就顯得尤為重要，從而可以充分開發(fā)優(yōu)勢種，生產木霉菌制劑，大面積推廣使用用于防治農作物的病害。這對減少化學農藥的使用，大力發(fā)展綠色農業(yè)，提高食品安全性等工作具有非凡的意義。

作者簡介：侯巨梅，碩士，黑龍江八一農墾大學，研究方向：應用微生物及生物防治。