【摘 要】膠體金快速診斷技術是指在現(xiàn)場或試驗室對動物疫病進行快速診斷的一種方法，具有方便快捷、特異敏感、穩(wěn)定性強、不需要特殊設備和試劑、價格低廉、結果判斷直觀的特點，特別適合于基層。本項技術推廣主要是應用快速診斷方法對我市轄區(qū)內(nèi)的主要動物疫病進行診斷、預警監(jiān)測，以全面掌握疫情動態(tài)，為制訂防控方案提供基礎依據(jù)，達到降低疫病發(fā)病率的目的。選擇養(yǎng)豬場4個，養(yǎng)雞場4個，用膠體金快速診斷技術和常規(guī)診斷技術分別進行監(jiān)測診斷，豬場發(fā)病率降低了9.35%，死亡率降低了5.24%，雞場發(fā)病率降低了13.25%，死淘率降低了5.52%。目前，膠體金診斷技術在我市診斷、監(jiān)測病種達7種，為養(yǎng)殖場挽回大量經(jīng)濟損失，社會效益和環(huán)保效益顯著。

【關鍵詞】膠體金；動物疫??；快速診斷技術

1 多點控制示范試驗

1.1 試驗畜禽場選擇

2010年3月至今，根據(jù)我市各區(qū)養(yǎng)殖畜禽種類分布，選定了遵化市崔家莊鄉(xiāng)印華養(yǎng)豬場，劉備寨鄉(xiāng)久順養(yǎng)豬場，崔家莊鄉(xiāng)宏泰養(yǎng)豬場，興旺寨鄉(xiāng)壽松養(yǎng)豬場；遵化市平安城鎮(zhèn)張貴民養(yǎng)雞場，崔家莊鄉(xiāng)寧九方養(yǎng)雞場，平安城鎮(zhèn)建忠養(yǎng)雞場，崔家莊鄉(xiāng)靳廣田養(yǎng)禽場為試驗示范場，前兩個豬/雞場使用快速診斷技術，后兩個豬/雞場使用常規(guī)診斷技術。

1.2 膠體金檢測卡選擇

深圳康百得生物科技有限公司、北京新勝安科技發(fā)展有限公司等生產(chǎn)的豬瘟、H5禽流感、H9禽流感、藍耳病、偽狂犬病、圓環(huán)病毒、口蹄疫等病原、抗體診斷產(chǎn)品。

1.3 工藝技術路線

畜禽飼養(yǎng)場→用常規(guī)監(jiān)測診斷技術（對照場）和膠體金快速監(jiān)測技術（試驗場）→確診疫病或判定抗體高低→調整免疫程序，及時免疫、合理用藥→控制疫病發(fā)生或發(fā)展。

1.4 膠體金檢測卡的使用方法與判定

A 根據(jù)所要檢測的項目選擇所需的檢測卡；

B 將檢測卡從鋁箔袋中取出，水平放置并做好標記；

C 取血液或棉拭子加入稀釋液中，混勻后吸取2～4滴稀釋液滴入檢測卡的檢測孔內(nèi)；

D 待稀釋液慢慢滲過顯示區(qū)，20min內(nèi)觀察并記錄結果。

E 結果判定：

陽性：顯示區(qū)中對照線（C）和檢測線（T）各出現(xiàn)1條紫紅色線，說明抗原或抗體存在，為陽性反應；

陰性：只在對照線區(qū)（C）出現(xiàn)1條紫紅色線，說明無抗體或無抗原病毒感染；

無效：對照區(qū)未出現(xiàn)紫紅色線或只在檢測線區(qū)（T）出現(xiàn)紫紅色線，說明膠體金無效，不能使用。

1.5 試驗結果與分析

1.5.1 養(yǎng)豬場的試驗結果

經(jīng)1年的比較試驗，試驗場較對照場發(fā)病率、死亡率分別降低了9.35%、5.24%，詳細數(shù)據(jù)見表1。

表1 養(yǎng)豬場多點控試試驗結果一覽表（單位：頭、%）

經(jīng)卡方檢驗（x2test），試驗前后發(fā)病率、死亡率x2值分別為29.54、32.02，從x2界值表查得υ=1時，α=0.05、α=0.01的x2值分別為3.84、6.63，發(fā)病率、死亡率x2值均大于α=0.01的x2值，即P<0.01，差異極顯著，說明該項技術的應用對降低養(yǎng)豬場豬只發(fā)病率、死亡率具有顯著作用。

1.5.2 養(yǎng)雞場的試驗結果

經(jīng)1年的比較試驗，試驗場較對照場發(fā)病率、死淘率分別降低了13.25%、5.53%，詳細數(shù)據(jù)見表2。

表2 養(yǎng)雞場多點控試試驗結果一覽表（單位：頭、%）

經(jīng)卡方檢驗（x2test），試驗前后發(fā)病率、死亡率x2值分別為414.17、129.93，均大于α=0.01的x2值，即P<0.01，差異極顯著，說明該項技術的應用對降低養(yǎng)雞場雞的發(fā)病率、死淘率具有顯著作用。

2 技術要點

2.1 建立防疫檔案

規(guī)模養(yǎng)殖場均要建立防疫檔案、詳細記錄生產(chǎn)狀況、發(fā)病情況、診斷情況、發(fā)病率和死亡率、免疫程序、免疫時間、所用疫苗生產(chǎn)廠家和疫苗批號、監(jiān)測時間、監(jiān)測病種和檢測結果等有關生產(chǎn)和防疫的相關內(nèi)容，以備診斷和監(jiān)測時參考。

2.2 疫病診斷

2.2.1 診斷病種的確定

膠體金使用前，依據(jù)發(fā)病的臨床癥狀、傳播速度、病理變化等臨床特征，進行初步診斷，然后選擇相應疫病的膠體金檢測試紙進行檢測。

臨床上不能排除的高致病性禽流感、高致病性豬藍耳病等烈性傳染病要先進行檢測，排除后再進行其他疫病的檢測。懷疑為多種疫病混合感染的，選擇多種疫病檢測試紙同時進行檢測。

2.2.2 檢測數(shù)量

每次診斷檢測數(shù)量不低于3頭（只）份，有1頭只份出現(xiàn)陽性的即判定該養(yǎng)殖場有該病原感染。

2.3 免疫效果監(jiān)測

使用免疫抗體檢測試紙對免疫后的動物進行定期檢測，不少于20頭（只）份/場次，檢測合格率低于70%時要進行加強免疫。

2.4 流行病學調查

2.4.1 區(qū)域性某種疫病的病原學調查

根據(jù)調查區(qū)域內(nèi)養(yǎng)殖分布，結合地理特征確定疫病監(jiān)測場點，但不少于2個養(yǎng)殖場/鄉(xiāng)鎮(zhèn)、2個自然村/鄉(xiāng)鎮(zhèn)，采集樣本數(shù)量不少于20頭（只）份/次。定期開展病原學檢測。

2.4.2 養(yǎng)殖場的病原分布調查

將養(yǎng)殖場內(nèi)散養(yǎng)的動物按種類、日齡分群，按群隨機進行樣品采集，不少于5頭份/群次，分別進行病原和免疫抗體檢測，統(tǒng)計結果，繪制病原分布圖和免疫抗體合格率曲線圖，結合該場疫病流行情況分析該病的高發(fā)日齡和免疫程序是否合理，制定防控措施。

3 技術關鍵

（1）所采集的樣本具有代表性，以確保檢測結果的可信度。

（2）膠體金使用應嚴格按程序步驟操作。

（3）以流行病學調查和血清學、病原學檢測結果相結合，確定畜禽疫病的高發(fā)時段，從而及時免疫用藥以防控重點疫病。

4 創(chuàng)新點

（1）此項技術方便快捷，不需要特殊設備和試劑，可在野外、田間現(xiàn)場操作，特別適合于基層畜禽疫病監(jiān)測和診斷。

（2）此項技術特異敏感，穩(wěn)定性強，檢測診斷準確率較高。

（3）試劑價格低廉、經(jīng)濟適用。