【摘 要】膠體金快速診斷技術(shù)是指在現(xiàn)場(chǎng)或試驗(yàn)室對(duì)動(dòng)物疫病進(jìn)行快速診斷的一種方法，具有方便快捷、特異敏感、穩(wěn)定性強(qiáng)、不需要特殊設(shè)備和試劑、價(jià)格低廉、結(jié)果判斷直觀的特點(diǎn)，特別適合于基層。本項(xiàng)技術(shù)推廣主要是應(yīng)用快速診斷方法對(duì)我市轄區(qū)內(nèi)的主要?jiǎng)游镆卟∵M(jìn)行診斷、預(yù)警監(jiān)測(cè)，以全面掌握疫情動(dòng)態(tài)，為制訂防控方案提供基礎(chǔ)依據(jù)，達(dá)到降低疫病發(fā)病率的目的。選擇養(yǎng)豬場(chǎng)4個(gè)，養(yǎng)雞場(chǎng)4個(gè)，用膠體金快速診斷技術(shù)和常規(guī)診斷技術(shù)分別進(jìn)行監(jiān)測(cè)診斷，豬場(chǎng)發(fā)病率降低了9.35%，死亡率降低了5.24%，雞場(chǎng)發(fā)病率降低了13.25%，死淘率降低了5.52%。目前，膠體金診斷技術(shù)在我市診斷、監(jiān)測(cè)病種達(dá)7種，為養(yǎng)殖場(chǎng)挽回大量經(jīng)濟(jì)損失，社會(huì)效益和環(huán)保效益顯著。

【關(guān)鍵詞】膠體金；動(dòng)物疫?。豢焖僭\斷技術(shù)

1 多點(diǎn)控制示范試驗(yàn)

1.1 試驗(yàn)畜禽場(chǎng)選擇

2010年3月至今，根據(jù)我市各區(qū)養(yǎng)殖畜禽種類分布，選定了遵化市崔家莊鄉(xiāng)印華養(yǎng)豬場(chǎng)，劉備寨鄉(xiāng)久順養(yǎng)豬場(chǎng)，崔家莊鄉(xiāng)宏泰養(yǎng)豬場(chǎng)，興旺寨鄉(xiāng)壽松養(yǎng)豬場(chǎng)；遵化市平安城鎮(zhèn)張貴民養(yǎng)雞場(chǎng)，崔家莊鄉(xiāng)寧九方養(yǎng)雞場(chǎng)，平安城鎮(zhèn)建忠養(yǎng)雞場(chǎng)，崔家莊鄉(xiāng)靳廣田養(yǎng)禽場(chǎng)為試驗(yàn)示范場(chǎng)，前兩個(gè)豬/雞場(chǎng)使用快速診斷技術(shù)，后兩個(gè)豬/雞場(chǎng)使用常規(guī)診斷技術(shù)。

1.2 膠體金檢測(cè)卡選擇

深圳康百得生物科技有限公司、北京新勝安科技發(fā)展有限公司等生產(chǎn)的豬瘟、H5禽流感、H9禽流感、藍(lán)耳病、偽狂犬病、圓環(huán)病毒、口蹄疫等病原、抗體診斷產(chǎn)品。

1.3 工藝技術(shù)路線

畜禽飼養(yǎng)場(chǎng)→用常規(guī)監(jiān)測(cè)診斷技術(shù)（對(duì)照?qǐng)觯┖湍z體金快速監(jiān)測(cè)技術(shù)（試驗(yàn)場(chǎng)）→確診疫病或判定抗體高低→調(diào)整免疫程序，及時(shí)免疫、合理用藥→控制疫病發(fā)生或發(fā)展。

1.4 膠體金檢測(cè)卡的使用方法與判定

A 根據(jù)所要檢測(cè)的項(xiàng)目選擇所需的檢測(cè)卡；

B 將檢測(cè)卡從鋁箔袋中取出，水平放置并做好標(biāo)記；

C 取血液或棉拭子加入稀釋液中，混勻后吸取2～4滴稀釋液滴入檢測(cè)卡的檢測(cè)孔內(nèi)；

D 待稀釋液慢慢滲過(guò)顯示區(qū)，20min內(nèi)觀察并記錄結(jié)果。

E 結(jié)果判定：

陽(yáng)性：顯示區(qū)中對(duì)照線（C）和檢測(cè)線（T）各出現(xiàn)1條紫紅色線，說(shuō)明抗原或抗體存在，為陽(yáng)性反應(yīng)；

陰性：只在對(duì)照線區(qū)（C）出現(xiàn)1條紫紅色線，說(shuō)明無(wú)抗體或無(wú)抗原病毒感染；

無(wú)效：對(duì)照區(qū)未出現(xiàn)紫紅色線或只在檢測(cè)線區(qū)（T）出現(xiàn)紫紅色線，說(shuō)明膠體金無(wú)效，不能使用。

1.5 試驗(yàn)結(jié)果與分析

1.5.1 養(yǎng)豬場(chǎng)的試驗(yàn)結(jié)果

經(jīng)1年的比較試驗(yàn)，試驗(yàn)場(chǎng)較對(duì)照?qǐng)霭l(fā)病率、死亡率分別降低了9.35%、5.24%，詳細(xì)數(shù)據(jù)見(jiàn)表1。

表1 養(yǎng)豬場(chǎng)多點(diǎn)控試試驗(yàn)結(jié)果一覽表（單位：頭、%）

經(jīng)卡方檢驗(yàn)（x2test），試驗(yàn)前后發(fā)病率、死亡率x2值分別為29.54、32.02，從x2界值表查得υ=1時(shí)，α=0.05、α=0.01的x2值分別為3.84、6.63，發(fā)病率、死亡率x2值均大于α=0.01的x2值，即P<0.01，差異極顯著，說(shuō)明該項(xiàng)技術(shù)的應(yīng)用對(duì)降低養(yǎng)豬場(chǎng)豬只發(fā)病率、死亡率具有顯著作用。

1.5.2 養(yǎng)雞場(chǎng)的試驗(yàn)結(jié)果

經(jīng)1年的比較試驗(yàn)，試驗(yàn)場(chǎng)較對(duì)照?qǐng)霭l(fā)病率、死淘率分別降低了13.25%、5.53%，詳細(xì)數(shù)據(jù)見(jiàn)表2。

表2 養(yǎng)雞場(chǎng)多點(diǎn)控試試驗(yàn)結(jié)果一覽表（單位：頭、%）

經(jīng)卡方檢驗(yàn)（x2test），試驗(yàn)前后發(fā)病率、死亡率x2值分別為414.17、129.93，均大于α=0.01的x2值，即P<0.01，差異極顯著，說(shuō)明該項(xiàng)技術(shù)的應(yīng)用對(duì)降低養(yǎng)雞場(chǎng)雞的發(fā)病率、死淘率具有顯著作用。

2 技術(shù)要點(diǎn)

2.1 建立防疫檔案

規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)均要建立防疫檔案、詳細(xì)記錄生產(chǎn)狀況、發(fā)病情況、診斷情況、發(fā)病率和死亡率、免疫程序、免疫時(shí)間、所用疫苗生產(chǎn)廠家和疫苗批號(hào)、監(jiān)測(cè)時(shí)間、監(jiān)測(cè)病種和檢測(cè)結(jié)果等有關(guān)生產(chǎn)和防疫的相關(guān)內(nèi)容，以備診斷和監(jiān)測(cè)時(shí)參考。

2.2 疫病診斷

2.2.1 診斷病種的確定

膠體金使用前，依據(jù)發(fā)病的臨床癥狀、傳播速度、病理變化等臨床特征，進(jìn)行初步診斷，然后選擇相應(yīng)疫病的膠體金檢測(cè)試紙進(jìn)行檢測(cè)。

臨床上不能排除的高致病性禽流感、高致病性豬藍(lán)耳病等烈性傳染病要先進(jìn)行檢測(cè)，排除后再進(jìn)行其他疫病的檢測(cè)。懷疑為多種疫病混合感染的，選擇多種疫病檢測(cè)試紙同時(shí)進(jìn)行檢測(cè)。

2.2.2 檢測(cè)數(shù)量

每次診斷檢測(cè)數(shù)量不低于3頭（只）份，有1頭只份出現(xiàn)陽(yáng)性的即判定該養(yǎng)殖場(chǎng)有該病原感染。

2.3 免疫效果監(jiān)測(cè)

使用免疫抗體檢測(cè)試紙對(duì)免疫后的動(dòng)物進(jìn)行定期檢測(cè)，不少于20頭（只）份/場(chǎng)次，檢測(cè)合格率低于70%時(shí)要進(jìn)行加強(qiáng)免疫。

2.4 流行病學(xué)調(diào)查

2.4.1 區(qū)域性某種疫病的病原學(xué)調(diào)查

根據(jù)調(diào)查區(qū)域內(nèi)養(yǎng)殖分布，結(jié)合地理特征確定疫病監(jiān)測(cè)場(chǎng)點(diǎn)，但不少于2個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)/鄉(xiāng)鎮(zhèn)、2個(gè)自然村/鄉(xiāng)鎮(zhèn)，采集樣本數(shù)量不少于20頭（只）份/次。定期開(kāi)展病原學(xué)檢測(cè)。

2.4.2 養(yǎng)殖場(chǎng)的病原分布調(diào)查

將養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)散養(yǎng)的動(dòng)物按種類、日齡分群，按群隨機(jī)進(jìn)行樣品采集，不少于5頭份/群次，分別進(jìn)行病原和免疫抗體檢測(cè)，統(tǒng)計(jì)結(jié)果，繪制病原分布圖和免疫抗體合格率曲線圖，結(jié)合該場(chǎng)疫病流行情況分析該病的高發(fā)日齡和免疫程序是否合理，制定防控措施。

3 技術(shù)關(guān)鍵

（1）所采集的樣本具有代表性，以確保檢測(cè)結(jié)果的可信度。

（2）膠體金使用應(yīng)嚴(yán)格按程序步驟操作。

（3）以流行病學(xué)調(diào)查和血清學(xué)、病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果相結(jié)合，確定畜禽疫病的高發(fā)時(shí)段，從而及時(shí)免疫用藥以防控重點(diǎn)疫病。

4 創(chuàng)新點(diǎn)

（1）此項(xiàng)技術(shù)方便快捷，不需要特殊設(shè)備和試劑，可在野外、田間現(xiàn)場(chǎng)操作，特別適合于基層畜禽疫病監(jiān)測(cè)和診斷。

（2）此項(xiàng)技術(shù)特異敏感，穩(wěn)定性強(qiáng)，檢測(cè)診斷準(zhǔn)確率較高。

（3）試劑價(jià)格低廉、經(jīng)濟(jì)適用。