【摘 要】豬瘟和豬藍(lán)耳病是近年來嚴(yán)重危害養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展的烈性傳染病，混合感染后死亡率較高，尤其是仔豬的致死率高達(dá)80%以上。2013年9月烏魯木齊周邊某豬場斷奶1～2周的仔豬不明原因發(fā)病，發(fā)病率和死亡率都較高，來烏魯木齊市動(dòng)物疾病控制與診斷中心診治。根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查、剖檢變化、RT-PCR試驗(yàn)等，診斷為豬瘟病毒和豬繁殖與呼吸綜合征病毒混合感染，并針對(duì)此提出了合理的綜合性防控措施。

【關(guān)鍵詞】豬瘟；高致病性豬藍(lán)耳?。换旌细腥?；診治

豬瘟（swine fever， hog cholera）是由豬瘟病毒引起豬的一種急性或慢性、熱性和高度接觸性傳染病。該病的特征是發(fā)病急、高熱稽留和小血管壁變性引起全身各器官的泛發(fā)性出血、脾臟梗死[1]。豬繁殖與呼吸綜合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome， PRRS）俗稱“豬藍(lán)耳病”，是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒引起的豬的一種繁殖障礙和呼吸系統(tǒng)的傳染病，臨床上以母豬的繁殖障礙和仔豬的呼吸道癥狀為主要特征[2]。該病的一個(gè)特征是病毒的持續(xù)感染，并且極易繼發(fā)感染豬瘟、豬細(xì)小病毒、豬圓環(huán)病毒等，加劇病癥，死亡率升高。近年來，隨著養(yǎng)豬業(yè)的集約化和規(guī)?；l(fā)展，關(guān)于豬瘟和豬藍(lán)耳病的混合感染常有報(bào)道[3-7]， 且一旦出現(xiàn)混合感染將影響這兩種疾病疫苗的免疫效果，對(duì)這兩種疾病的防控和治療產(chǎn)生了極其不利的影響，養(yǎng)豬業(yè)每年因這兩種病的混合感染產(chǎn)生了巨大的經(jīng)濟(jì)損失[8-9]。本文旨在為確診豬瘟和藍(lán)耳病混合感染的診斷與防治提供參考。

1 流行病學(xué)調(diào)查

根據(jù)現(xiàn)場調(diào)查，該種豬場生豬存欄量為1 642頭，其中種公豬12頭，妊娠母豬634頭，后備母豬351頭，哺乳和斷奶仔豬645頭。其免疫程序嚴(yán)格按照春、秋兩防給豬群免疫接種了豬瘟凍干弱毒疫苗，且60日齡仔豬出售前也接種了一次豬瘟疫苗。在疫病流行期間，妊娠母豬發(fā)生早產(chǎn)、流產(chǎn)、死胎、木乃伊胎癥狀，初產(chǎn)和經(jīng)產(chǎn)母豬均出現(xiàn)了繁殖障礙，流產(chǎn)率達(dá)43.8%；后備母豬發(fā)病后死12頭，死亡率為3.4%；發(fā)病仔豬表現(xiàn)為體溫升高，并伴隨呼吸困難，耳部、吻突和軀體末端皮膚發(fā)紺，仔豬死亡274頭，死亡率高達(dá)42.5%。

2 臨床癥狀

仔豬斷奶后10d左右發(fā)病，主要表現(xiàn)為體溫升高，40～42℃，面部腫脹，眼睛無神，體表皮膚發(fā)紅；臥昏睡，精神萎靡，運(yùn)動(dòng)失調(diào)；眼結(jié)膜潮紅，后期蒼白；病初少食或廢食，飼喂時(shí)緩慢走近食槽，食數(shù)口后，即退回臥下；病豬逐漸消瘦，被毛粗糙，起立采食或飲水時(shí)頻頻咳嗽，并伴有呼吸困難癥狀，部分仔豬出現(xiàn)共濟(jì)失調(diào)癥狀；患豬有的先便秘后腹瀉，病程1～6d。

3 剖檢變化

送檢的4頭病死仔豬經(jīng)剖檢：病豬全身內(nèi)臟器官黏膜漿膜等均有不同程度的出血變化。其扁桃體壞死，全身淋巴結(jié)特別是頜下腹股溝肺門腸系膜等出血腫大，切面呈大理石樣外觀，氣管可見漿液性、纖維素性炎癥，肺間質(zhì)增寬，肺臟表面有散在出血點(diǎn)，胃內(nèi)充氣空虛內(nèi)有少量黃色帶泡沫狀黏液胃底出血胃黏膜脫落；腎臟脾臟有黃白色皰疹樣壞死灶，脾臟邊緣不整齊、呈鋸齒狀、有出血性梗死灶，腎臟表面有針尖樣小出血點(diǎn)，心外膜及心肌嚴(yán)重出血，心內(nèi)膜出血，輸尿管、膀胱黏膜處有出血點(diǎn)；回盲口有非典型性“扣狀腫”。

4 實(shí)驗(yàn)室診斷

4.1 病料采集

對(duì)采集病料的器械及容器火焰消毒，無菌采集病死豬脾臟、頜下淋巴結(jié)、扁桃體、肝臟等組織，放入無菌容器內(nèi)，做好標(biāo)記。

4.2 細(xì)菌學(xué)診斷

4.2.1 觸片鏡檢

按實(shí)驗(yàn)室常規(guī)方法將無菌采集的病料做觸片，進(jìn)行革蘭氏染色：①涂片固定；②草酸銨結(jié)晶紫染液染1.5min，水洗；③加革蘭氏碘液覆蓋涂面媒染2min，水洗；④加95%酒精于抹片上脫色40s，水洗；⑤加沙黃水溶液復(fù)染20s，水洗；⑥用濾紙吸干水分，鏡檢，結(jié)果未觀察到細(xì)菌。

4.2.2 分離培養(yǎng)

將無菌采取的心、肝、脾、肺、血液及淋巴結(jié)等病料在普通瓊脂培養(yǎng)基、巧克力瓊脂培養(yǎng)基上劃線接種，于37℃恒溫箱內(nèi)有氧培養(yǎng)12～24h，結(jié)果未觀察到細(xì)菌生長。

4.3 分子生物學(xué)檢測

采用反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）方法對(duì)采集病料進(jìn)行豬瘟病毒和豬繁殖與呼吸綜合征病毒（變異株）的檢測。診斷試劑盒購自北京索奧生物醫(yī)藥科技有限公司提供。

4.3.1 豬瘟病毒檢測

陽性對(duì)照在235bp出現(xiàn)條帶，陰性無條帶，病料在235bp出現(xiàn)特異性條帶，表明豬瘟病毒核酸檢測陽性（圖1）。

圖1 豬瘟病毒檢測RT-PCR結(jié)果

M：Maker 200bp Ladder Ⅰ（北京鼎國生物公司）

1泳道：陽性對(duì)照；2泳道：待檢樣品；3泳道：陰性對(duì)照

4.3.2 豬繁殖與呼吸綜合征病毒（Nsp2 1594-1680變異株）檢測

陽性對(duì)照在278bp出現(xiàn)條帶，陰性無條帶，病料在278bp出現(xiàn)特異性條帶，表明豬繁殖與呼吸綜合征病毒（變異株）核酸檢測陽性（圖2）。

圖2 豬繁殖與呼吸綜合征病毒檢測RT-PCR結(jié)果

M：Maker 200bp Ladder Ⅰ（北京鼎國生物公司）

1泳道：陽性對(duì)照；2泳道：待檢樣品；3泳道：陰性對(duì)照

經(jīng)流行病學(xué)調(diào)查、臨床癥狀、剖檢病理變化及實(shí)驗(yàn)室診斷綜合分析，確診為非典型性豬瘟與藍(lán)耳病的混合感染。

5 防制措施

（1）發(fā)病豬群全部撲殺、深埋，對(duì)圈舍及周圍環(huán)境徹底消毒，對(duì)其周圍豬場進(jìn)行豬瘟和豬藍(lán)耳病疫苗緊急免疫接種。

（2）建議對(duì)該地區(qū)的仔豬進(jìn)行豬瘟和豬藍(lán)耳病超前免疫，40～45日齡再進(jìn)行一次加強(qiáng)免疫；種母豬于配種前1周免疫1次；公豬和后備豬于春、秋季進(jìn)行2次免疫。豬瘟疫苗和豬藍(lán)耳病疫苗可同步進(jìn)行免疫。

（3）目前，本病尚無特效藥物治療，主要采取綜合防制措施。最根本的措施是疫苗接種、清除病豬、帶毒豬，切斷傳播途徑，此項(xiàng)措施應(yīng)反復(fù)進(jìn)行。此外，嚴(yán)格實(shí)施消毒制度，做好欄圈清潔衛(wèi)生，保持圈內(nèi)通風(fēng)干燥，調(diào)整飼養(yǎng)密度減少各種應(yīng)激，保持圈欄良好的飼養(yǎng)環(huán)境。

參考文獻(xiàn)

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作者簡介：

陳彪（1958-），男，漢族，高級(jí)獸醫(yī)師，主要從事動(dòng)物疫病綜合防控技術(shù)工作。

*通訊作者簡介：

李建玲（1973-），女，漢族，本科，高級(jí)獸醫(yī)師，主要從事動(dòng)物疫病監(jiān)測、診斷工作。

基金項(xiàng)目：

烏魯木齊市科技局人才工程專項(xiàng)（P111210001）

計(jì)劃項(xiàng)目課題編號(hào)：P111210001