田偉 仇錚 姜麗萍 叢秋實(shí)

摘 要：雞馬立克氏病是雞的主要傳染病之一，雞馬立克病疫苗的預(yù)防接種是控制疾病的主要手段，而在其使用過(guò)程中經(jīng)常出現(xiàn)免疫失敗的現(xiàn)象，本文系統(tǒng)的闡述了導(dǎo)致馬立克疫苗免疫失敗的原因進(jìn)行分析，為雞馬立克氏疫苗的正確使用提供幫助。

關(guān)鍵詞：雞馬立克氏??；雛雞；免疫失敗

雞馬立克氏?。∕D）是一種高度接觸性傳染性腫瘤性疾病，主要以內(nèi)臟、肌肉、皮膚淋巴瘤的形成和周圍神經(jīng)的淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)和增生為其病理特征。馬立克氏病病毒（MDV）屬于B群皰疹病毒，具有很強(qiáng)的細(xì)胞結(jié)合特性，體內(nèi)病毒存在于白細(xì)胞及腫瘤中，羽毛囊中的成熟病毒是主要傳染源。病雞和隱性感染雞群可長(zhǎng)期帶毒并排毒，病毒在羽毛囊上皮細(xì)胞可進(jìn)行復(fù)制形成有感染力的完全病毒，其對(duì)外界有極強(qiáng)的抵抗力。病毒隨脫落的羽毛或皮屑等污染糞便、墊料、塵埃、空氣、飼養(yǎng)用具、人員服裝、鞋帽等，并可在室溫下存活長(zhǎng)達(dá)6個(gè)月。病毒感染方式主要通過(guò)經(jīng)呼吸道感染，與病雞直接或間接接觸的健康雞群，也能受到感染。馬立克氏病病毒不能經(jīng)蛋傳遞，種蛋蛋殼表面如沾有攜帶成熟病毒的羽毛，則可造成傳染。

馬立克氏病毒最容易感染育雛期的雛雞，被病毒感染后的雛雞，要經(jīng)較長(zhǎng)的潛伏期才能表現(xiàn)癥狀。自然感染的病例，最早發(fā)病的時(shí)間在3周齡以后，整個(gè)育成期及開產(chǎn)后一個(gè)時(shí)期內(nèi)都能夠發(fā)生馬立克氏病，但以2～5月齡發(fā)病率最高。馬立克氏病有多種病型，根據(jù)臨床癥狀和病理變化的不同，馬立克氏病可分為神經(jīng)型、眼型、皮膚型、急性內(nèi)臟型和混合型。

1 馬立克疫苗概述

MD分為3個(gè)血清型，血清Ⅰ型是致腫瘤的高致病力血清型，血清Ⅱ型為無(wú)致病力的自然弱毒，血清Ⅲ型為火雞皰疹病毒。MDV感染雞后，既可產(chǎn)生體液免疫，又可產(chǎn)生細(xì)胞免疫，但以細(xì)胞免疫為主。

火雞皰疹病毒疫苗可抵抗MDV標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)毒攻擊，但對(duì)超強(qiáng)毒株攻擊的保護(hù)率低于70%。主要為Fc126株的低代次種毒制苗，如果過(guò)度傳代（約70代以后），則失去保護(hù)力。

血清Ⅰ型疫苗毒株主要有R2/23（美國(guó)超強(qiáng)毒Md11細(xì)胞培養(yǎng)致弱株）及來(lái)自荷蘭自然弱毒株CVI988。因CVI988克隆株效果于HVT相當(dāng)，現(xiàn)階段國(guó)內(nèi)主要使用CVI988非克隆株，其效果優(yōu)于HVT和血清Ⅱ型毒株，CVI988也必須在液氮中保存。

血清Ⅱ型毒株主要用SB- 1株和Z4株病毒制造疫苗。通過(guò)接觸性傳播，能從羽毛囊上皮中排毒。通常與HVT疫苗聯(lián)合使用抵抗超強(qiáng)毒的感染，這可能對(duì)疫苗接種有輔助作用。但值得注意的是，某些品種雞可以被血清Ⅱ型疫苗激發(fā)淋巴細(xì)胞白血病的發(fā)生（普遍認(rèn)為MDV能夠激活淋巴性白血病病毒在宿主染色體上的前病毒DNA的LTR啟動(dòng)子）。

疫苗免疫是防控馬立克氏病的關(guān)鍵措施。當(dāng)前，用于制造馬立克疫苗的病毒主要有3種，分別為人工致弱的MDV1（如CVI988）、MDV2和HVT?，F(xiàn)階段國(guó)內(nèi)多應(yīng)用Ⅰ型（CVI988/Rispens）、火雞皰疹病毒（Fc126）與Ⅰ型+Ⅲ型液氮保存疫苗。Ⅰ型雞馬立克氏液氮疫苗（CVI988/Rispens）是一種細(xì)胞結(jié)合病毒，是將病毒接種于雞胚成纖維細(xì)胞后培養(yǎng)，經(jīng)過(guò)消化，收獲離心沉淀細(xì)胞。之后，按一定比例混合，加入適量細(xì)胞凍存液，最后經(jīng)程序降溫而制成。為保證細(xì)胞活性，只能放在-196℃的液氮中保存，出廠的時(shí)候必須放置在液氮罐里，使用的時(shí)候，要用38度的溫水迅速解凍，以保證細(xì)胞的存活率。經(jīng)檢測(cè)，Ⅰ型雞馬立克氏液氮疫苗具有安全、免疫效力高和無(wú)外源病原污染等優(yōu)點(diǎn)。在疫苗使用過(guò)程中，疫苗從液氮中取出過(guò)程的時(shí)間、融解水溫、稀釋后放置時(shí)間、稀釋液溫度和pH值等因素的變化均可能對(duì)疫苗的效價(jià)產(chǎn)生一定程度的影響。

2 導(dǎo)致馬立克氏病免疫失敗的原因

2.1 雞群雞體方面

2.1.1 雞群的機(jī)體素質(zhì)

雞群接種疫苗或抗原后產(chǎn)生免疫力的能力不同，這直接和疫苗的接種效果有關(guān)，例如許多先天弱雛接種馬立克疫苗后并沒(méi)有產(chǎn)生足夠的抗體，并未對(duì)雞群形成有效的保護(hù)，當(dāng)環(huán)境中有馬立克氏病毒的存在，很容易感染并在相應(yīng)的日齡發(fā)病。

2.1.2 品種因素

MDV易于感染雞群，但是火雞、山雞和鵪鶉等較少感染，每個(gè)品種雞群對(duì)馬立克氏病毒的易感性均不同，這就導(dǎo)致了易感的雞群由于有較低的抵抗力而易于發(fā)病。

2.1.3 免疫抑制作用

免疫系統(tǒng)是指參與免疫反應(yīng)的各種細(xì)胞、組織和器官，對(duì)于禽類的免疫系統(tǒng)主要包括法氏囊、胸腺與淋巴結(jié)。以上組分作為機(jī)體免疫功能的基本保證，其任何一部分的缺陷都將引起免疫功能障礙，喪失抵抗感染能力，而形成免疫抑制性性疾病。而當(dāng)雞群出現(xiàn)了免疫抑制病的存在，T細(xì)胞與B細(xì)胞等相關(guān)的免疫細(xì)胞受到抑制作用而失去免疫功能，導(dǎo)致疫苗免疫后不能產(chǎn)生相應(yīng)的抗體。

2.1.4 母源抗體的干擾

眾所周知，母源抗體可對(duì)活疫苗免疫產(chǎn)生干擾，同樣，母源抗體對(duì)同源MD疫苗有干擾作用，能夠影響MD疫苗的效果。此外，對(duì)于弱毒株，母源抗體有中和作用。

2.2 環(huán)境因素

2.2.1 孵化場(chǎng)環(huán)境因素

雛雞出殼后應(yīng)立即注射MD疫苗，盡早注射MD疫苗，有利于疫苗的表達(dá)。孵化場(chǎng)作為雛雞的第一個(gè)生活環(huán)境，若孵化場(chǎng)中含有馬立克氏病毒，雛雞出殼后馬上就會(huì)感染病毒。因此必須做好孵化場(chǎng)的環(huán)境消毒與人員消毒。

2.2.2 免疫空白期間感染

1日齡雛雞接種馬立克氏疫苗后，需要1～2周時(shí)間才能產(chǎn)生保護(hù)作用，而在這1～2周期間視為免疫空白期，一旦環(huán)境中有馬立克氏病毒的存在，易感雞群感染疾病的概率相應(yīng)加大。

2.2.3 飼養(yǎng)環(huán)境

良好的飼養(yǎng)環(huán)境是控制疾病的必要途徑，加強(qiáng)飼養(yǎng)管理等綜合措施可以保證雞群生長(zhǎng)發(fā)育的正常，并能維持良好的體況，減少疾病發(fā)生的概率，減少死淘率。嚴(yán)格生產(chǎn)區(qū)和非生產(chǎn)區(qū)的消毒制度，嚴(yán)格出入人員的消毒，嚴(yán)格按照免疫程序免疫雞群，減少應(yīng)激，提高飼養(yǎng)管理水平等綜合措施是有效地防制馬立克氏病的重要手段。

2.3 疫苗使用方面

2.3.1 疫苗的選購(gòu)

目前，在部分地區(qū)市面上沒(méi)有正規(guī)批文的疫苗仍在廣泛的流行。這些疫苗往往因?yàn)閮r(jià)格低廉而受到了很多養(yǎng)殖戶的青睞。但這些疫苗往往在抗原種類、含量、佐劑、是否SPF與微生物污染程度等存在嚴(yán)重的質(zhì)量問(wèn)題，養(yǎng)殖戶使用后常造成應(yīng)激大、抗體水平整齊度差等而易發(fā)病或直接導(dǎo)致發(fā)病情況，造成重大經(jīng)濟(jì)損失，因此選擇合格廠家的疫苗產(chǎn)品尤其重要。

2.3.2 疫苗的保存與運(yùn)輸

雞馬立克凍干疫苗沒(méi)有按使用說(shuō)明書中要求溫度保存，直接影響免疫效果。雞馬立克液氮疫苗保存不善，液氮罐中液氮不足或保存中液氮罐傾斜，導(dǎo)致液氮水平面處在疫苗以下，在用稀釋液稀釋疫苗后顏色與正常顏色不符，均會(huì)導(dǎo)致免疫的失效。同時(shí)，對(duì)疫苗的稀釋后長(zhǎng)時(shí)間未用疫苗，運(yùn)輸時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，中途周轉(zhuǎn)次數(shù)過(guò)多，使活毒疫苗抗原失活，使疫苗的效價(jià)下降，影響疫苗的免疫效果。

2.3.3 免疫操作不規(guī)范

對(duì)于液氮疫苗，在應(yīng)用過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)格按照廠家說(shuō)明使用。從液氮罐中小心取出疫苗安瓿應(yīng)確保所有安瓿瓶均在液氮面以下。立即放入37℃的溫水中解凍，此過(guò)程最好在10 s內(nèi)完成。然后把安瓿放在37℃的溫水中輕搖，并應(yīng)在90 s內(nèi)使安瓿中疫苗完全解凍。從取出疫苗安瓿至疫苗溶液配制完畢不應(yīng)超過(guò)2 min。配好后立即使用，皮下或肌肉注射，每羽0.2 mL。應(yīng)在1 h內(nèi)用完，使用過(guò)程中每10～15 min輕搖瓶子一次，保持疫苗溶液混合均勻。

2.3.4 疫苗的免疫效力

CVI988馬立克氏病疫苗的蝕斑數(shù)要求在2 000（DFU）以上，F(xiàn)c126株的蝕斑數(shù)要求在1 000（DFU）以上。大劑量的疫苗有利于早期建立免疫力。HVT疫苗只能防治馬立克氏病發(fā)生，卻不能阻止MDV感染，也不能阻止馬立克氏病病毒的傳播和對(duì)環(huán)境的污染。因而最好是選擇由SPF蛋生產(chǎn)的疫苗。

2.3.5 亂加藥物

在應(yīng)用過(guò)程中，人們往往在馬立克氏病稀釋液中加入其它藥物，例如抗生素和維生素等，這破壞了稀釋液中的pH值而影響馬立克氏病苗的活力。

3 總結(jié)

目前，該病仍然嚴(yán)重威脅著養(yǎng)禽業(yè)的發(fā)展，疫苗雖然可以預(yù)防馬立克氏病的發(fā)生，但免疫失敗時(shí)有發(fā)生，常常導(dǎo)致本病的局部暴發(fā)。雞馬立克氏病疫苗使用是否正確，直接決定疫苗的使用效果。為此，本文闡述常見(jiàn)的馬立克氏疫苗，后在疫苗應(yīng)用過(guò)程中易于造成免疫失敗的原因進(jìn)行了綜述。因本病無(wú)特效治療方法，加強(qiáng)對(duì)本病的預(yù)防工作具有十分重要的意義。

（編輯：狄慧）