黃磊，許文，盧祥嬋，鄧建寧，陳威巍，聶為民，秦恩強(qiáng)，趙敏，周先志

·論著·

HIV感染者外周淺表淋巴結(jié)中CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)與膠原沉積的關(guān)系研究

黃磊，許文，盧祥嬋，鄧建寧，陳威巍，聶為民，秦恩強(qiáng)，趙敏，周先志

目的通過(guò)對(duì)不同感染階段HIV感染者外周淺表淋巴結(jié)中CD4+T淋巴細(xì)胞、膠原蛋白、白細(xì)胞介素（interleukin, IL）-7的檢測(cè)，以及CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)與膠原沉積的相關(guān)性分析，探討HIV感染后膠原沉積對(duì)CD4+T淋巴細(xì)胞的影響。方法選擇HIV感染者43例，分為HIV感染無(wú)癥狀組和AIDS組，留取外周淺表淋巴結(jié)活體組織檢查（活檢）組織；另外選擇非HIV感染者12名為健康對(duì)照組，同樣留取其外周淺表淋巴結(jié)活檢組織。利用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)研究對(duì)象淋巴結(jié)中CD4+T淋巴細(xì)胞、Ⅰ型膠原蛋白和IL-7定量及分布情況。結(jié)果①隨著病程進(jìn)展，HIV感染者外周淺表淋巴結(jié)中膠原沉積逐漸增加，AIDS組高于無(wú)癥狀組，無(wú)癥狀組高于健康對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05）；②HIV感染無(wú)癥狀組外周淺表淋巴結(jié)中CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)與健康對(duì)照組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），而AIDS組則顯著減少（P＜0.01）；③HIV感染者外周淺表淋巴結(jié)中CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)與膠原沉積量呈負(fù)相關(guān)（R2=0.724，P=0.000），與外周血中CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)呈正相關(guān)（R2=0.702，P=0.000）；④3組IL-7的表達(dá)水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），而AIDS組部分患者淋巴結(jié)中IL-7呈局部聚集性分泌。結(jié)論HIV感染后外周淺表淋巴結(jié)中膠原沉積逐漸增加導(dǎo)致結(jié)構(gòu)破壞，可能是CD4+T淋巴細(xì)胞進(jìn)行性減少的一個(gè)重要原因，雖然IL-7有隨病程進(jìn)展而分泌增加的趨勢(shì)，但仍不足以彌補(bǔ)淋巴結(jié)結(jié)構(gòu)破壞對(duì)CD4+T淋巴細(xì)胞的影響。

HIV；獲得性免疫缺陷綜合征；膠原蛋白；CD4+T淋巴細(xì)胞；白細(xì)胞介素-7

CD4+T淋巴細(xì)胞的減少是HIV致病的中心環(huán)節(jié)和病程進(jìn)展的重要標(biāo)志[1-2]。HIV通過(guò)多種機(jī)制導(dǎo)致感染者CD4+T淋巴細(xì)胞減少，例如：HIV對(duì)CD4+T淋巴細(xì)胞的直接殺傷作用；HIV感染后因免疫系統(tǒng)損傷導(dǎo)致的廣泛免疫激活；HIV感染導(dǎo)致胸腺功能受抑，致使CD4+T淋巴細(xì)胞生成不足。淋巴結(jié)是CD4+T淋巴細(xì)胞定居的主要部位之一，也是HIV感染重要場(chǎng)所，HIV在淋巴結(jié)中反復(fù)感染，導(dǎo)致淋巴結(jié)內(nèi)持續(xù)炎癥狀態(tài)，進(jìn)而引起其結(jié)構(gòu)破壞。由于淋巴結(jié)是淋巴細(xì)胞發(fā)育、分化、成熟的重要免疫器官，其正常結(jié)構(gòu)對(duì)于維持CD4+T淋巴細(xì)胞的正常循環(huán)、生存及功能至關(guān)重要[3]。本研究擬通過(guò)對(duì)HIV感染者外周淺表淋巴結(jié)中膠原蛋白沉積、CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)及白細(xì)胞介素（interleukin,IL）-7分泌的觀察，探討HIV感染后淋巴結(jié)結(jié)構(gòu)改變對(duì)CD4+T淋巴細(xì)胞的影響，以期為AIDS發(fā)病機(jī)制的研究提供依據(jù)。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象選取2009—2013年在解放軍第三〇二醫(yī)院和南寧市第四人民醫(yī)院就診且有外周淺表淋巴結(jié)腫大的HIV感染者43例，年齡26～58（40.17± 10.23）歲。其中30例因異性不潔性行為感染，6例因同性不潔性行為感染，5例因不潔靜脈注射感染，2例感染途徑不詳。患者簽訂知情同意書后，常規(guī)手術(shù)留取外周淺表淋巴結(jié)活體組織檢查（活檢）組織（頸部24例，腋窩17例，腹股溝2例）。根據(jù)《艾滋病診療指南（2011版）》[4]，將感染者分為HIV感染無(wú)癥狀組（11例）和AIDS組（32例）。其中，24例在手術(shù)當(dāng)天留取外周血檢測(cè)CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)。另外選擇12名非HIV感染者為健康對(duì)照組，留取其外周淺表淋巴結(jié)活檢組織，病理診斷均為反應(yīng)性增生。

1.2 主要儀器和試劑采用美國(guó)BD公司（FACS Calibur型）流式細(xì)胞儀對(duì)HIV感染者全血樣本CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)進(jìn)行測(cè)定。流式CD3/CD4/ CD8抗體購(gòu)自美國(guó)BD公司，免疫組化鼠抗人Ⅰ型膠原蛋白單克隆抗體、鼠抗人CD4單克隆抗體和兔抗人IL-7單克隆抗體均購(gòu)自英國(guó)Abcam公司。

1.3 全血CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)測(cè)定取50μl抗凝血加入絕對(duì)計(jì)數(shù)管（TruCOUNT Tubes）中，加入10μlCD3/CD4/CD8抗體，室溫避光染色20min。加入10倍稀釋的溶血素（FACSLysing Solution）450μl，混勻避光15min，上機(jī)檢測(cè)。

1.4 免疫組織化學(xué)采用鏈霉素抗生物素蛋白-過(guò)氧化物酶法（SP法）。手術(shù)摘取淋巴結(jié)后，以4%多聚甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋，4μm切片，切片常規(guī)脫蠟至水。CD4、IL-7抗體染色切片，置入pH值8.0 EDTA溶液中，微波抗原修復(fù)；Ⅰ型膠原蛋白抗體染色切片，以胰蛋白酶消化。隨后0.3%～3.0% H2O2-甲醇溶液去除內(nèi)源過(guò)氧化物酶，血清封閉后分別加入相應(yīng)抗體，4℃過(guò)夜，加相應(yīng)二抗孵育，以AEC顯色，陽(yáng)性為紅色。以HIV感染者淋巴結(jié)加PBS替代抗體組和非HIV感染者淋巴結(jié)加抗體組作為陰性對(duì)照。

1.5 圖像分析在20倍光學(xué)顯微鏡下觀察。CD4抗體染色每張切片任取10個(gè)視野，對(duì)每個(gè)視野內(nèi)淋巴結(jié)中CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)，取平均值。利用LEICA Qwin圖像分析系統(tǒng)對(duì)膠原蛋白或IL-7抗體染色的每張切片任意10個(gè)視野進(jìn)行灰度分析，檢測(cè)膠原蛋白和IL-7在淋巴結(jié)中表達(dá)的灰度值。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理用CHISS 2004軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。定量資料呈正態(tài)分布，用±s表示，指標(biāo)在3組間比較用單因素方差分析（組間數(shù)據(jù)方差齊），兩兩比較用q檢驗(yàn)。HIV感染者外周淺表淋巴結(jié)中CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)與外周血CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)的相關(guān)性分析用pearson相關(guān)分析和直線回歸分析。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

表1 3組外周淺表淋巴結(jié)中膠原蛋白沉積量比較（±s，灰度)Table 1 Com parison of collagen deposition in peripheral superficial lym ph nodes among the three groups（±s,grey scale)

表1 3組外周淺表淋巴結(jié)中膠原蛋白沉積量比較（±s，灰度)Table 1 Com parison of collagen deposition in peripheral superficial lym ph nodes among the three groups（±s,grey scale)

注：兩兩比較，AIDS組vs無(wú)癥狀組，P=0.000；AIDS組vs健康對(duì)照組，P=0.000；無(wú)癥狀組vs健康對(duì)照組，P=0.035

項(xiàng)目n膠原蛋白AIDS組3260.293±9.982無(wú)癥狀組1135.886±15.708健康對(duì)照組1224.303±8.139 F值54.515 P值0.000

圖1 HIV感染者外周淺表淋巴結(jié)中Ⅰ型膠原蛋白沉積情況Figure 1 TypeⅠcollagen deposition in peripheral superficial lym ph nodes of HIV-infected individuals

2.1 HIV感染者外周淺表淋巴結(jié)中膠原蛋白沉積情況HIV感染后，外周淺表淋巴結(jié)中Ⅰ型膠原蛋白沉積逐漸增加。AIDS組高于無(wú)癥狀組，無(wú)癥狀組高于健康對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）（表1、圖1）。病理評(píng)估顯示，在無(wú)癥狀組中，6例淋巴結(jié)內(nèi)可見增生淋巴濾泡，2例未見淋巴濾泡；而AIDS組中則很難看到淋巴濾泡，在所有32例中僅7例可見到萎縮淋巴濾泡，部分患者淋巴細(xì)胞極度減少，代之以大量的沉積膠原。

2.2 HIV感染者外周淺表淋巴結(jié)中CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)與健康對(duì)照組相比，無(wú)癥狀組外周淺表淋巴結(jié)中CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），而AIDS組顯著減少（P＜0.01）。AIDS組較無(wú)癥狀組亦顯著減少（P＜0.01）（表2、圖2）。

表2 3組外周淺表淋巴結(jié)中CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)比較（±s，個(gè)/200倍視野)Table 2 Comparison of CD4+T lymphocyte count in peripheral superficial lym ph nodes among the three groups (±s,cells/200 times visual field)

表2 3組外周淺表淋巴結(jié)中CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)比較（±s，個(gè)/200倍視野)Table 2 Comparison of CD4+T lymphocyte count in peripheral superficial lym ph nodes among the three groups (±s,cells/200 times visual field)

注：兩兩比較，AIDS組vs無(wú)癥狀組，P=0.000；AIDS組vs健康對(duì)照組，P=0.000；無(wú)癥狀組vs健康對(duì)照組，P=0.200

項(xiàng)目nCD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)AIDS組3267.604±42.273無(wú)癥狀組11198.727±76.334健康對(duì)照組12234.232±51.029 F值57.072 P值0.000

圖2 HIV感染者外周淺表淋巴結(jié)中CD4+T淋巴細(xì)胞Figure 2 CD4+T cells in peripheral superficial lymph nodes of HIV-infected individuals

2.3 HIV感染者外周淺表淋巴結(jié)CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)與膠原沉積及外周血CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)相關(guān)性

2.3.1 HIV感染者外周淺表淋巴結(jié)中CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)與膠原沉積的相關(guān)性43例HIV感染者外周淺表淋巴結(jié)內(nèi)Ⅰ型膠原沉積量與CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)呈負(fù)相關(guān)（R2=0.724，P=0.000）。直線回歸方程為：外周淺表淋巴結(jié)中CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)=237.408-2.283×Ⅰ型膠原沉積量（圖3）。

2.3.2 HIV感染者外周淺表淋巴結(jié)中CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)與外周血CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)的相關(guān)性24例HIV感染者在行淋巴結(jié)活檢當(dāng)天留取外周血，分析顯示外周血CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)與淋巴結(jié)中CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)呈正相關(guān)（R2=0.702，P=0.000）。直線回歸方程為：外周血CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)=2.056×外周淺表淋巴結(jié)中CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)（個(gè)/mm3）－57.712（圖4）。

圖3 HIV感染者外周淺表淋巴結(jié)中CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)與Ⅰ型膠原蛋白沉積量的相關(guān)性Figure 3 Correlation between CD4+T lym phocyte count and typeⅠcollagen deposition in peripheral superficial lymph nodes of HIV-infected individuals

圖4 HIV感染者外周血CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)與外周淺表淋巴結(jié)中CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)的相關(guān)性Figure 4 Correlation between CD4+T lym phocyte count in peripheral blood and that in peripheral superficial lymph nodes of HIV-infected individuals

表3 3組外周淺表淋巴結(jié)中IL-7水平比較（±s，灰度）Table 3 Comparison of IL-7 level in peripheral superficial lym ph nodes among the three groups(±s,grey scale)

表3 3組外周淺表淋巴結(jié)中IL-7水平比較（±s，灰度）Table 3 Comparison of IL-7 level in peripheral superficial lym ph nodes among the three groups(±s,grey scale)

注：兩兩比較，AIDS組vs無(wú)癥狀組，P=0.126；AIDS組vs健康對(duì)照組，P=0.677；無(wú)癥狀組vs健康對(duì)照組，P=0.124

項(xiàng)目nIL-7 AIDS組32120.711±64.527無(wú)癥狀組11112.275±24.714健康對(duì)照組1289.424±40.861 F值1.447 P值0.245

2.4 HIV感染者外周淺表淋巴結(jié)中IL-7定量和分布健康對(duì)照組、無(wú)癥狀組和AIDS組外周淺表淋巴結(jié)中IL-7的分泌水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表3。而AIDS組部分患者淋巴結(jié)內(nèi)IL-7呈局部聚集性表達(dá)（圖5）。

圖5 HIV感染者外周淺表淋巴結(jié)中IL-7的定量及分布圖Figure 5 Quantitation and distribution of IL-7 in peri-pheralsuperficial lymph nodes of HIV-infected individuals

3 討論

維持CD4+T淋巴細(xì)胞的相對(duì)正常數(shù)量以及功能，始終是HIV/AIDS治療的焦點(diǎn)和核心。HIV感染后CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)量經(jīng)歷了一個(gè)動(dòng)態(tài)變化的過(guò)程。在急性感染期，HIV大量復(fù)制，導(dǎo)致外周血CD4+T淋巴細(xì)胞迅速減少。急性期后，由于病毒特異性免疫的出現(xiàn)，病毒復(fù)制下降，外周血CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)量逐漸恢復(fù)至亞正常狀態(tài)，繼之進(jìn)入一個(gè)漫長(zhǎng)的緩慢下降過(guò)程，直至AIDS期。

HIV感染后機(jī)體CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)量的維持至少由4方面因素決定：①HIV感染直接或間接作用導(dǎo)致CD4+T淋巴細(xì)胞的消耗；②胸腺等中樞免疫器官CD4+T淋巴細(xì)胞的再生能力；③外周免疫器官對(duì)CD4+T淋巴細(xì)胞正常生存和發(fā)育的維持；④CD4+T淋巴細(xì)胞在血液及淋巴中的正常循環(huán)[5-6]。淋巴結(jié)作為重要的外周免疫器官，是淋巴細(xì)胞發(fā)生免疫應(yīng)答的主要場(chǎng)所之一，對(duì)維持CD4+T淋巴細(xì)胞的生存、發(fā)育和循環(huán)發(fā)揮著關(guān)鍵作用[3，5-6]。而正常結(jié)構(gòu)是淋巴結(jié)以上功能的基本保障，這是因?yàn)榱馨徒Y(jié)的正常結(jié)構(gòu)為CD4+T淋巴細(xì)胞的循環(huán)、發(fā)育和分化提供了支架及免疫微環(huán)境，保證CD4+T淋巴細(xì)胞能與樹突細(xì)胞（dendritic cells,DCs）接觸，并產(chǎn)生正確的免疫應(yīng)答；作為淋巴結(jié)內(nèi)T淋巴細(xì)胞區(qū)的基本骨架，成纖維網(wǎng)狀細(xì)胞（fibroblastic reticular cells,FRCs）是體內(nèi)IL-7的主要來(lái)源，而IL-7在維持T淋巴細(xì)胞穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮著關(guān)鍵作用[6-9]。

淋巴結(jié)中包含了機(jī)體70%的CD4+T淋巴細(xì)胞，是HIV感染的主要部位[9]。為了闡述HIV感染對(duì)淋巴結(jié)結(jié)構(gòu)的影響，我們分析了HIV感染后Ⅰ型膠原蛋白在淋巴結(jié)中的沉積情況。結(jié)果表明隨著病程的進(jìn)展，HIV感染者外周淺表淋巴結(jié)中Ⅰ型膠原蛋白沉積逐漸增加，同時(shí)出現(xiàn)結(jié)構(gòu)改變，最終導(dǎo)致淋巴濾泡萎縮乃至消失。前期有研究顯示，HIV-1感染者淋巴結(jié)中膠原蛋白的沉積隨著病程的進(jìn)展而遞增，導(dǎo)致副皮質(zhì)區(qū)T淋巴細(xì)胞區(qū)結(jié)構(gòu)破壞，其沉積的范圍與淋巴組織中CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)及抗反轉(zhuǎn)錄病毒治療后外周血CD4+T淋巴細(xì)胞的變化呈負(fù)相關(guān)[10-13]。我們的研究也顯示，雖然無(wú)癥狀組與健康對(duì)照組外周淺表淋巴結(jié)中的CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)無(wú)顯著差異，但AIDS組顯著減少，且HIV感染者外周淺表淋巴結(jié)中CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)與膠原沉積量呈負(fù)相關(guān)，與外周血CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)呈正相關(guān)。一些晚期AIDS患者的淋巴結(jié)中CD4+T淋巴細(xì)胞幾乎難以覓及，代之以大量膠原沉積。

IL-7對(duì)于初始T淋巴細(xì)胞的存活是必不可少的。IL-7缺乏可使外周T淋巴細(xì)胞逐漸減少，反之則可使外周初始T細(xì)胞群擴(kuò)大[14]。淋巴結(jié)內(nèi)T細(xì)胞區(qū)的FRCs是體內(nèi)IL-7的主要來(lái)源之一[7-8]。為了進(jìn)一步明確淋巴結(jié)結(jié)構(gòu)破壞對(duì)CD4+T淋巴細(xì)胞的影響，我們分析了IL-7在HIV感染者外周淺表淋巴結(jié)中的定量及分布情況。結(jié)果顯示，雖健康對(duì)照組、無(wú)癥狀組和AIDS組IL-7表達(dá)逐漸升高，但3組外周淺表淋巴結(jié)中IL-7的定量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而AIDS組部分患者淋巴結(jié)內(nèi)IL-7呈局部聚集性表達(dá)。這提示，為了代償CD4+T淋巴細(xì)胞的減少，淋巴結(jié)中IL-7的分泌有所增加，但仍不足以彌補(bǔ)疾病對(duì)CD4+T淋巴細(xì)胞的消耗，特別是由于淋巴結(jié)結(jié)構(gòu)紊亂，IL-7聚集性分布，不能保證所有CD4+T淋巴細(xì)胞都能與IL-7充分接觸，故仍難以維持其正常生存。

HIV感染后由于淋巴結(jié)結(jié)構(gòu)的破壞，導(dǎo)致CD4+T淋巴細(xì)胞賴以生存的免疫微環(huán)境受損，使CD4+T淋巴細(xì)胞生存能力下降，并可能影響了其與DCs細(xì)胞的接觸，不能產(chǎn)生正確的免疫應(yīng)答；同時(shí)，由于膠原蛋白對(duì)淋巴細(xì)胞有粘附作用，膠原大量沉積，可能增加了對(duì)淋巴細(xì)胞的粘附能力，并影響淋巴結(jié)中淋巴細(xì)胞流入及流出道，進(jìn)而影響CD4+T淋巴細(xì)胞的循環(huán)[15-17]。總之，HIV感染后外周淺表淋巴結(jié)中膠原沉積逐漸增加導(dǎo)致結(jié)構(gòu)破壞，可能是CD4+T淋巴細(xì)胞進(jìn)行性減少的一個(gè)重要原因，雖然IL-7有隨病程進(jìn)展而分泌增加的趨勢(shì)，但仍不足以彌補(bǔ)淋巴結(jié)結(jié)構(gòu)破壞對(duì)CD4+T淋巴細(xì)胞的影響。

[1]涂波，秦恩強(qiáng)，黃磊，等.HIV感染者外周血淋巴細(xì)胞總數(shù)與CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)相關(guān)性分析［J］.傳染病信息，2011，24(6): 342-343，350.

[2]黃磊，鄧建寧，許文，等.HIV感染后不同病程階段淋巴結(jié)中CD4＋T淋巴細(xì)胞各亞群頻數(shù)的改變［J］.傳染病信息，2012，25 (6):347-350.

[3]C ainelli F,V allone A,T anko MN,et al.Lymph nodes and pathogenesis of infection with HIV-1［J］.Lancet I nfect D is,2010,10 (2):71-72.

[4]中華醫(yī)學(xué)會(huì)感染病學(xué)分會(huì)艾滋病學(xué)組.艾滋病診療指南（2011版）［J］.中華傳染病雜志，2011，29(10):629-640.

[5]Link A,V ogt T K,Favre S,et al.Fibroblastic reticular cells in lymph nodes regulate the homeostasis of naive T cells［J］.Nat I mmunol,2007,8(11):1255-1265.

[6]D ion ML,Poulin JF,BordiR,etal.HIV infection rapidly inducesand maintains a substantial suppression of thymocyte proliferation［J］. I mmunity,2004,21(6):757-768.

[7]Katakai T,H ara T,SugaiM,etal.Lymph node fibroblastic reticular cells construct the stromal reticulum via contact with lymphocytes［J］.JExp Med,2004,200(6):783-795.

[8]Bajénoff M,Egen JG,Koo L Y,etal.Stromal cell networks regulate lymphocyte entry,migration,and territoriality in lymph nodes［J］. I mmunity,2006,5(6):989-1001.

[9]C homont N,El-Far M,Ancuta P,et al.HIV reservoir si z e and persistence are driven by T cell survival and homeostatic proliferation［J］.NatMed,2009,15(8):893-900.

[10]Nies-Kraske E,Schacker T W,C ondoluci D,et al.Evaluation of the pathogenesis of decreasing CD4(+)T cell counts in human immunodeficiency virus type 1-infected patients receiving successfully suppressive antiretroviral therapy［J］.J I nfect D is,2009,199 (11):1648-1656.

[11]Z eng M,Smith AJ,W ietgrefe S W,etal.C umulativemechanisms of lymphoid tissue fibrosis and T cell depletion in HIV-1 and S IV infections［J］.J C lin I nvest,2011,121(3):998-1008.

[12]Z eng M,Southern PJ,Reilly C S,etal.Lymphoid tissue damage in HIV-1 infection depletes naive T cells and limits T cell reconstitution after antiretroviral therapy［J］.PLoS Pathog,2012,8(10): e1002437.

[13]D ia z A,García F,Mo z os A,etal.Lymphoid tissue collagen deposition in HIV-infected patients correlates with the imbalance between matrix metalloproteinases and their inhibitors［J］.J I nfect D is,2011,203(6):810-813.

[14]C yster JG.C hemokines,sphingosine-1-phosphate,and cellmigration in secondary lymphoid organs［J］.Annu Rev I mmunol,2005,23: 127-159.

[15]D ia z A,Alós L,León A,etal.Factors associated with collagen deposition in lymphoid tissue in long-term treated HIV-infected patients［J］.A ID S,2010,24(13):2029-2039.

[16]T abb B,Morcock D R,T rubey C M,et al.Reduced inflammation and lymphoid tissue immunopathology in rhesusmaca q ues receiving anti-tumor necrosis factor treatment during primary simian immunodeficiency virus infection［J］.J I nfect D is,2013,207(6):880-892.

[17]Z eng M,Paiardini M,Engram J C,et al.C ritical role of CD4 T cells in maintaining lymphoid tissue structure for immune cell homeostasis and reconstitution［J］.Blood,2012,120(9):1856-1867.

（2014-06-23收稿 2014-08-12修回）

（責(zé)任編委 王永怡 本文編輯 張?jiān)戚x）

Correlation between CD4+T lym phocyte count in peripheral superficial lym ph nodes and collagen deposition in HIV-infected individuals

HUANG Lei,XUWen，LU Xiang-chan,DENG Jian-ning,
CHENWei-wei,NIEWei-min,QIN En-qiang,ZHAO Min*,ZHOU Xian-zhi*Treatment and Research Center for Infectious Diseases,302 Hospital of PLA,Beijing 100039,China
*Corresponding author,Zhao Min,E-mail:drzhaomin@sina.com;ZHOU Xian-zhi,E-mail:zxz.302@163.com

Objective To investigate the effects of collagen deposition on CD4+T lymphocyte count in peripheral superficial lymph nodesofHIV-infected individualsby detecting CD4+T lymphocyte count,collagen and interleukin(IL)-7 and analyze the correlation between CD4+T lymphocyte count and collagen deposition.M ethods Forty-three HIV-infected individualswere divided into asymptomatic HIV carriers(asymptomatic group)and AIDSpatients(AIDSgroup).Twelve subjectswithoutHIV infection were recruited as a control group.Peripheral superficial lymph nodes of all the groupswere obtained.Immunohistochemistry was used to detect expression and distribution of CD4+T lymphocytes,typeⅠcollagen and IL-7 in peripheral superficial lymph nodes.Results With disease progression,collagen deposition in peripheral superficial lymph nodes of HIV-infected individuals increased gradually.Collagen deposition in AIDSgroup was higher than that in asymptomatic group,which was higher than that in the control group,and differences between the three groupswere significant(P＜0.05).CD4+T lymphocyte counts in peripheralsuperficial lymph nodeswere notsignificantly differentbetween the asymptomatic group and the control group(P＞0.05),while thatof AIDSpatients decreased significantly(P＜0.01). CD4+T lymphocyte count in peripheralsuperficial lymph nodesofHIV-infected individualshad a strong negative linear correlationwith collagen deposition(R2=0.724,P=0.000),and a strong positive linear correlation with CD4+T lymphocyte count in peripheral blood (R2=0.702,P=0.000).Expressions of IL-7 in peripheral superficial lymph nodes were not significantly different among the three groups(P＞0.05),butpresented with localaggregation in some AIDSpatients.Conclusions Gradually increasing collagen deposition destroys the structure of peripheral superficial lymph nodes after HIV infection,whichmay be one of the important reasons for CD4+T lymphocyte depletion in lymph nodes.Although the expression of IL-7 has a rising tendency in lymph nodes of HIV-infected individualswith disease progression,destruction of lymph nodes structure remains a uncompensatory effecton CD4+T lymphocytes.

HIV;acquired immunodeficiency syndrome;collagen;CD4+T cells;interleukin-7

R512.91

A

1007-8134(2014)06-0337-05

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（30771897、81072423）；全軍醫(yī)學(xué)科技“十二五”科研面上項(xiàng)目（CWS11J160）；南寧市科學(xué)研究與技術(shù)開發(fā)計(jì)劃、創(chuàng)新計(jì)劃項(xiàng)目科研課題（201003047C-1）

100039北京，解放軍第三○二醫(yī)院感染性疾病診療與研究中心（黃磊、許文、陳威巍、聶為民、秦恩強(qiáng)、趙敏、周先志）；530023，南寧市第四人民醫(yī)院/廣西艾滋病臨床治療中心艾滋病科（盧祥嬋、鄧建寧）

周先志，E-mail:zxz302@163.com；趙敏，E-mail:drzhaomin @sina.com