陳 青，高 健

（貴州大學化學與化工學院，貴州 貴陽 550025）

刺梨（R.roxburghii Tratt）又名送春歸，是薔薇科植物刺梨的果實，主要產(chǎn)于陜西、甘肅、江西、安徽等省，貴州省畢節(jié)、黔西、貴陽等地區(qū)均有野生或栽培[1-2]。刺梨味甘而酸澀，是一種強身健體的藥用型水果，主要具有健胃、消食及滋補強壯的功效[3]。刺梨果實營養(yǎng)豐富，鮮果中富含各種維生素，特別是維生素C的含量居各類水果之冠，每100g果肉中含維生素C 2 054～2 725mg，比柑橘高100倍，比獼猴桃高9倍，被譽為水果中的“維C之王”[4-5]。此外，刺梨鮮果中還含有維生素P、維生素E、維生素B1、維生素B2、胡蘿卜素及煙酰胺。除富含維生素外，刺梨鮮果中還含有十多種微量元素及氨基酸[6-7]。刺梨中超氧化物歧化酶（superoxide dis-mutase，SOD）的含量也比較高，以1 000g刺梨可食部分計算，總酶活力可達185 480U，刺梨中的SOD主要以Fe-SOD、Mn-SOD和CuZn-SOD的形式存在[8]。刺梨也具有較高的藥用價值，經(jīng)現(xiàn)代藥理學研究表明，刺梨具有延緩衰老、解毒、抗腫瘤、抗動脈粥樣硬化和調(diào)節(jié)機體免疫等功能[9-10]。自20世紀80年代以來，以刺梨果實為原料開發(fā)了一系列食品，如刺梨果酒、刺梨飲料等，遐邇聞名。在產(chǎn)生較大經(jīng)濟效應的同時，有大量刺梨渣作為廢棄物丟掉，對環(huán)境造成污染，也對資源造成無形的浪費。因此對刺梨渣中的種子再加工利用，不僅能解決環(huán)境問題，而且是實現(xiàn)刺梨精細加工的有效途徑。關(guān)于刺梨種子脂肪酸成分已有研究[11-12]，但種子的揮發(fā)性香氣成分的研究尚未見報道。頂空固相微萃取法（headspace solid phase microextraction，HS-SPME）是通過裝在注射器內(nèi)的石英纖維表面上的特殊固相涂層，對樣品組分進行萃取和富集的新型無溶劑樣品預處理技術(shù)，具有效率高、操作簡便、成本低、無溶劑及選擇性強等優(yōu)點[13-14]。采用HS-SPME法提取刺梨種子中的揮發(fā)性成分，然后利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（gas chromatography-mass spectrometry，GC-MS）技術(shù)對萃取物進行分析鑒定，可為更全面了解刺梨種子的化學組成，更有效地開發(fā)和利用刺梨資源提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

供試刺梨果實2011年10月采自貴州省貴陽市。

聚二甲基硅氧烷（polydimethylsiloxane，PDMS），色譜純C6-C26正構(gòu)烷烴：Alfa Aesar公司。

1.2 儀器與設備

lent5975C/6890 GC/MS氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀：美國安捷倫公司；手動固相微萃取裝置：美國Supelco公司，萃取纖維頭為70μm PDMS。

1.3 方法

1.3.1 樣品處理方法

將刺梨種子粉碎，取約2.0g，置于15mL固相微萃取儀采樣瓶中，插入裝有70μm PDMS纖維頭的手動進樣器，在50℃左右頂空萃取保持20min取出，快速移出萃取頭并立即插入氣相色譜儀進樣口（溫度250℃）中，熱解析3min進樣。

1.3.2 GC-MS分析條件

色譜柱為Zebron ZB-5MSI彈性石英毛細管柱（30m×0.25mm×0.25μm），柱溫40℃（保留2min），以4℃/min升溫至200℃，氣化室溫度250℃；載氣為高純He（99.999%）；柱前壓52.54 kPa，載氣流量1.0mL/min；不分流進樣，延遲時間為1min。

離子源為電子電離（electron ionization，EI）源；離子源溫度230℃；四極桿溫度150℃；電子能量70eV；發(fā)射電流34.6μA；倍增器電壓1 052V；接口溫度280℃；質(zhì)量范圍20～450u。

2 結(jié)果與討論

按上述試驗條件對植物樣品進行GC-MS分析。刺梨種子經(jīng)GC-MS分離分析的總離子流圖見圖1。通過檢索Nist2005和Wiley275標準質(zhì)譜圖，鑒定化學成分結(jié)構(gòu)。通過峰面積歸一化法確定各成分的相對百分含量，結(jié)果見表1。

圖1 刺梨種子揮發(fā)性成分總離子流圖Fig.1 Ion flow chart of volatile components from Rosa roxburghii Tratt seeds

表1 刺梨子種子揮發(fā)性化學成分及含量Table 1 Volatile chemical composition of the Rosa roxburghii Tratt seeds

利用頂空固相微萃取技術(shù)富集，氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)對刺梨種子的揮發(fā)性組分進行檢測，共鑒定出8種化合物，其峰面積相對百分含量占總量的90.92%。含量較高的組分分別為苯（33.51%）、亞油酸甲酯（16.91%）、亞麻酸甲酯（14.95%）、棕櫚酸甲酯甲酯（10.42%）、十六烷（4.85%）和十四烷（4.06%）等。刺梨種子的揮發(fā)性成分類型主要為脂肪酸酯類（3種，占總含量的42.28%）、烷烴類（2種，占總含量的8.91%）、芳烴類（2種，占總含量的36.75%）及醛類（1種，占總含量的2.98%）。與文獻對比[11-12]，無論采用何種提取方法，刺梨種子脂肪酸成分基本一致，都主要含有亞油酸甲酯、亞麻酸甲酯及棕櫚酸甲酯。此外，同樣采用HS-SPME萃取方法萃取的刺梨果實和種子揮發(fā)性成分有很大差異[15]，種子除含有脂肪酸酯類，還含有較高比例的芳烴類、烷烴類和醛類化合物；果實的揮發(fā)性成分主要為烯烴及其酯類。因此刺梨在加工生產(chǎn)時，可根據(jù)果實及種子的化學成分不同，進行不同的食品品種開發(fā)，以產(chǎn)生更大的經(jīng)濟效應。

3 結(jié)論

應用頂空固相微萃取-氣質(zhì)聯(lián)用方法對刺梨種子中的揮發(fā)性物質(zhì)進行研究，共鑒定出8種揮發(fā)性化合物，脂肪酸酯類化合物占整個揮發(fā)性化合物的量最大，其次是芳烴類和烷烴類化合物。苯和亞油酸甲酯是刺梨種子中最主要的揮發(fā)性香氣成分。對刺梨種子的揮發(fā)性香氣成分的研究將對更好地開發(fā)和利用刺梨資源提供一定的參考價值。

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