解偉濤，喬松林，王寅彪，郝慧芳，梁 躍，張桂悅，郭成留，張改平

（1.河南省農(nóng)業(yè)科學院 河南省動物免疫學重點實驗室，鄭州 450002; 2.河南農(nóng)業(yè)大學牧醫(yī)工程學院，鄭州 450002）

簡報

2013年河南省豬偽狂犬野毒感染血清學調(diào)查

解偉濤1,2，喬松林1，王寅彪1，郝慧芳1，梁 躍1，張桂悅1，郭成留1，張改平2

（1.河南省農(nóng)業(yè)科學院 河南省動物免疫學重點實驗室，鄭州 450002; 2.河南農(nóng)業(yè)大學牧醫(yī)工程學院，鄭州 450002）

偽狂犬病是一種嚴重威脅養(yǎng)豬業(yè)的重要傳染病，2012年以來該病在河南省大面積流行，對養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大影響。本研究利用gE-ELISA方法，對2013年來自河南省不同區(qū)域不同規(guī)模347個豬場的13 275份血清樣本進行檢測分析。結果顯示血清樣本陽性率31.3%，豬場陽性率83.6%。種豬群帶毒率高，育肥階段偽狂犬病毒感染情況尤其嚴重。但一些生產(chǎn)管理較好的規(guī)?；i場通過采取強化免疫，不斷補入陰性后備種豬，加強生物安全等綜合措施，成功防控了偽狂犬疫情。本研究對于了解當前河南省偽狂犬疫情，制訂正確的防控策略提供了依據(jù)。

偽狂犬病毒；感染；血清學調(diào)查

偽狂犬病（pseudorabies，PR）是由偽狂犬病毒（Pseudorabies virus, PRV）引起的多種動物共患傳染病。豬是偽狂犬病的傳染源和自然貯存宿主，豬感染PRV后能引起發(fā)熱，母豬流產(chǎn)，仔豬神經(jīng)癥狀、高死亡率，中大豬呼吸道癥狀等臨床表現(xiàn)[1]。該病在我國廣泛存在，一旦發(fā)病，很難根除，給養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失[2]。美國和歐洲的一些國家依靠基因缺失苗和與之相配套的鑒別診斷方法，實施豬偽狂犬病根除計劃并已取得顯著成效[2]。

2005年以來，河南省豬群PRV感染率整體呈下降趨勢，臨床以散發(fā)、非典型病例為主。但是，從2011年底開始，河南省部分豬場突發(fā)偽狂犬疫情，很快在省內(nèi)各地爆發(fā)并廣泛流行，豬場損失慘重，部分豬場附近的狗、貓、羊、狐貍等其他動物也出現(xiàn)感染死亡。偽狂犬疫情至今沒有明顯減弱的跡象，這是近年來繼“豬高熱病”、“仔豬腹瀉”之后又一對養(yǎng)豬業(yè)影響較大的疫病。為了更好的了解河南省豬偽狂犬流行動態(tài)，2013年我們用gE-ELISA鑒別診斷方法[2]對省內(nèi)347個豬場的13 275份血清進行了檢測，并和本實驗室獲得的2005年以來PRV感染檢測的歷史數(shù)據(jù)進行了比較分析。

1 材料方法

1.1 血清樣品血清樣品采集時間為2013年1～12月，13275份樣品分別采自河南省347個不同規(guī)模豬場，對這些豬場按照規(guī)模、區(qū)域進行歸類。查詢并記錄豬場主要疫病免疫程序，排除使用含gE基因偽狂犬疫苗情況，以便對結果進行分析。

1.2 檢測試劑偽狂犬病毒gE抗體鑒別診斷試劑盒購自IDEXX公司。

1.3 檢測方法所有檢測工作均在河南省動物免疫學實驗室進行，檢測程序和判斷標準嚴格按照IDEXX試劑盒使用說明進行。

2 結果與討論

2.1 檢測樣品偽狂犬gE抗體陽性率2013年檢測的13 275份樣品中，gE抗體陽性率為31.3%。我們比較了本實驗室2005年以來偽狂犬gE抗體檢測情況（檢測試劑和方法與本研究相同），發(fā)現(xiàn)從2005至2011年，偽狂犬gE抗體陽性率整體呈下降趨勢，2011年的陽性率最低僅為6.8%。2012年gE抗體陽性率突然升高至38%，2013年陽性率仍然高達31.3%（表1）。

表1 2005～2013年河南省豬群血清樣品偽狂犬gE抗體情況Table 1 The detection results of Pseudorabies gE antibody of pigs from Henan Province in 2005-2013

2.2 不同階段豬群gE抗體陽性率對背景清晰的5個陽性豬場419份檢測血清樣品，按不同飼養(yǎng)類型和階段進行歸類分析。種豬群gE抗體陽性率為36.3%，育肥后期（19～25周齡）陽性率達59.3%，后備種豬陽性率為23.8%（圖1）。

圖1 不同階段豬群偽狂犬gE抗體陽性率Fig.1 The Pseudorabies virus (PRV) infection rate of pig farms in the different area of Henan Province

成年豬多為隱性感染[3]，妊娠母豬感染本病時，?？稍斐纱怪眰鞑ナ共《厩秩胩骸８腥痉N豬和所生仔豬長期帶毒，成為本病長期流行且很難根除的重要原因[2]。圖1顯示哺乳和保育階段仔豬的陽性率隨日齡增大呈下降趨勢，這可能與部分仔豬體內(nèi)存在母源gE抗體有關。育肥階段gE抗體陽性率隨日齡增大呈上升趨勢，表明該階段偽狂犬感染情況十分嚴重。按照目前國內(nèi)的養(yǎng)豬模式，后備種豬絕大部分是從育肥豬群中挑選出來的，而育肥豬群存在較高的陽性比例，必然會影響到后備種豬的健康。目前多數(shù)豬場還做不到對后備種豬進行逐頭檢測，陽性后備種豬的存在增加了偽狂犬的控制和凈化的難度。

2.3 不同地域豬場偽狂犬感染率在2013年檢測的347個豬場中，豬場感染率83.6%（290/347）。按省內(nèi)地理分布將豬場進行歸類，發(fā)現(xiàn)豫西豬場感染率最低為71.9%，豫北豬場感染率最高為93.8%（表2）。

表2 河南省不同地域豬場偽狂犬感染率Table 2 The Pseudorabies infection rates of pig farms in different area of Henan Province

2.4 不同規(guī)模豬場偽狂犬gE抗體樣本陽性率對檢測樣品按照豬場規(guī)模進行分類，在2013年檢測的13 275份血清樣本中，樣本陽性率隨著豬場規(guī)模的增大而呈下降趨勢。母豬群規(guī)模大于500頭的豬場樣本陽性率為20.5%，母豬群規(guī)模小于100頭的豬場樣本陽性率為62.4%（表3）。

表3 不同規(guī)模的豬場偽狂犬gE抗體樣本陽性率Table 3 The positive rate of Pseudorabies gE antibody of pigs from different scale pig farms

2.5 偽狂犬gE抗體陽性豬場分類我們把gE抗體陽性豬場分為兩類，其中種豬群和育肥豬（12～25周齡）均為陽性的豬場稱為陽性活躍場，種豬群陽性而育肥豬全部為陰性的豬場稱為陽性穩(wěn)定場。在統(tǒng)計的290個陽性場中， 陽性活躍場占96.9%（281/290），陽性穩(wěn)定場占3.1%（9/290）。

2.6 偽狂犬病防控措施目前關于偽狂犬疫情是病毒變異還是毒力增強導致仍存在學術爭議，但公認的是現(xiàn)有的疫苗保護力下降，需要強化免疫，提高中和抗體水平，避免出現(xiàn)免疫空白期。通過近兩三年的臨床觀察統(tǒng)計，種豬的跟胎免疫（產(chǎn)前30 d）或每年2～3次普防，以及仔豬在56～80日齡只免疫1次的防控策略，已經(jīng)不能滿足新形勢下偽狂犬防控的需要。

偽狂犬的成功防控與豬場的防疫檢測、生物安全、生產(chǎn)管理等多方面因素有關。本研究發(fā)現(xiàn)3.1%的陽性豬場通過采取強化免疫等綜合防控措施，偽狂犬疫情穩(wěn)定，擴繁出檢測全部為陰性的育肥豬。因此面對此次偽狂犬疫情，我們除了采取強化免疫，穩(wěn)定生產(chǎn)，定期檢測，加強生產(chǎn)管理等措施外；還應該重視生物安全，加強對車輛、物品、人員、貓、狗、鼠等風險因素的管理和控制，防止外部病毒傳入；場內(nèi)做好全進全出、空舍消毒等綜合管理措施，阻斷內(nèi)部病毒擴散。

偽狂犬防控最根本的措施是病原凈化。德國、奧地利、瑞典、丹麥和英國PRV已經(jīng)根除；2004年后，加拿大、新西蘭和美國未見PRV存在，也不允許免疫偽狂犬疫苗[4]。我國于20世紀70年代從匈牙利引進了Bartha K61株[5,6]，該病毒是公認的優(yōu)良疫苗株。20世紀90年代以來國內(nèi)規(guī)模化豬場普遍使用該疫苗，使PR得到了很好的控制[7,8]。2010和2011年我國規(guī)?；i場偽狂犬病毒感染率已經(jīng)大幅度降低，許多豬場已經(jīng)達到免疫無感染狀態(tài)[9]。從我們調(diào)查情況看2010年和2011年河南豬群gE抗體陽性率僅為7.9%和6.8%（表1），多數(shù)豬場偽狂犬陰性，已經(jīng)具備開展全面凈化的基本條件。如果我們當時能抓住有利時機，制訂出有效的偽狂犬凈化措施，統(tǒng)籌規(guī)劃，認真落實，是有希望實現(xiàn)偽狂犬凈化目標。當前豬群陽性率已經(jīng)高于30%，這時候開展凈化，檢測淘汰的成本太高?？尚械拇胧┦窍确€(wěn)定生產(chǎn)，再逐步凈化。我們可以先從種豬場凈化做起（國家核心育種場、省一級種豬場等），再擴大到區(qū)域內(nèi)聯(lián)合凈化，最后全國一致行動，通過政府和從業(yè)者的持續(xù)努力，最終實現(xiàn)偽狂犬凈化。

[1] 殷震, 劉景華. 動物病毒學[M]. 2 版. 北京: 科學技術出版社, 1997: 998-1000.

[2] 陳溥言. 獸醫(yī)傳染病學[M]. 5版. 中國農(nóng)業(yè)出版社, 1980: 218-220.

[3] 陸承平. 獸醫(yī)微生物學[M]. 4版. 中國農(nóng)業(yè)出版社, 2007: 358.

[4] Straw B E, Jeffery Z, D’Allaire S,et al.Diseases of swine[M]. 9th edition. USA: Iowa State University Press, 2006: 421.

[5] Lomniczi B, Blan-Kenship M L, Ben-porat T T. Deletions in the genomes of pseudorabies virus vaccine strains and existence of four isomers of the genomes [J]. J Virol, 1984, 49(3): 970-979.

[6] Petrovskis E A, Timmins J G, Gierman T M, et al.Deletions in vaccine strains of pseudorabies virus and their effect on synthesis of glycoprotein gp63 [J]. J Virol, 1986, 60(3): 1166-1169.

[7] Klupp B G, Lomniczi B, Visser N,et al.Mutations affecting the UL21 gene contribute to avirulence of pseudorabies virus vaccine strainBartha[J]. Virology, 1995, 212(2): 466-473.

[8] 童光志, 陳煥春. 偽狂犬病流行現(xiàn)狀及我國應采取的防制措施[J]. 中國獸醫(yī)學報, 1999, 19(1): 1-2.

[9] 李曉成. 2010年豬群疫病流行動態(tài)分析報告及2011年豬群疫病流行動態(tài)預測[J]. 北方牧業(yè), 2011, (2):12.

A SEROLOGICAL SURVEY OF PORCINE PSEUDORABIES VIRUS INFECTION IN 2013 IN HENAN PROVINCE

XIE Wei-tao1,2, QIAO Song-lin1, WANG Yin-biao1, HAO Hui-fang1, LIANG Yue1, ZHANG Gui-yue1, GUO Cheng-liu1, ZHANG Gai-ping2
(1. Henan Key Laboratory of Animal Immunology, Henan Academy of Agricultural Sciences, Zhengzhou 450002, China; 2. College of Animal Science and Veterinary Medicine, Henan Agricultural University, Zhengzhou 450002, China)

Pseudorabies is a devastating infectious disease affecting pig industry. Since 2012, the disease has spread to a large area in Henan province and caused signif cant losses. To perform a serological survey, 13 275 serum samples were collected in 2013 from 347 pig farms in different regions of Henan and detected for pseudorabies virus (PRV) antibodies using gE-ELISA. The positive rates were 31.3% for serum samples and 83.6% for pig farms. The PRV infection was particularly severe in breeding herds and f nishing pigs. On the other hand, PRV infection was under control in some large pig farms because of good management, regular vaccination and introduction of negative gilts. This survey could provide some basis for understanding the current infection status of PRV on pig farms and taking control protocols in Henan province.

Pseudorabies virus; infection; serological survey

S852.659.1

B

1674-6422（2014）06-0066-05

2014-02-25

國家生豬產(chǎn)業(yè)技術體系（CARS36-36）；河南省生豬產(chǎn)業(yè)技術體系創(chuàng)新團隊（S2012-06）

解偉濤，男，碩士，獸醫(yī)師，主要從事豬病防控工作

喬松林， E-mail：cdj565@gmail.com