文│張志宏 王貴 滿都拉 胡斌（內(nèi)蒙古自治區(qū)通遼市家畜繁育指導(dǎo)站）

胚胎移植技術(shù)作為現(xiàn)代生物繁殖技術(shù)，在肉用種羊生產(chǎn)中得到較好應(yīng)用，但各地區(qū)應(yīng)用效果差異較大，需要不斷總結(jié)學(xué)習(xí)，完善提高。其影響因素有同期發(fā)情技術(shù)、超數(shù)排卵技術(shù)、移植操作技術(shù)、環(huán)境、飼養(yǎng)管理、品種、年齡等。內(nèi)蒙古通遼地區(qū)近幾年開始嘗試?yán)门咛ヒ浦布夹g(shù)生產(chǎn)肉用種羊，2013年10月進(jìn)行了德國(guó)美利奴、薩福克、杜泊3個(gè)品種98只供體羊胚胎移植。將本次同期發(fā)情、超數(shù)排卵處理方法及效果和移植妊娠率進(jìn)行了詳細(xì)記錄和統(tǒng)計(jì)分析，為進(jìn)一步提高胚胎移植效果提供依據(jù)。

一、移植技術(shù)各環(huán)節(jié)處理方法

1.同期發(fā)情與超數(shù)排卵。

（1）供體羊的同期發(fā)情和超數(shù)排卵。采取陰道內(nèi)放置CIDR海綿栓法。供體羊的超數(shù)排卵采用FSH（促卵泡素）遞減注射，并配合注射PMSG（孕馬血清促性腺激素）。具體方法如下：在放栓第10天開始連續(xù)注射FSH5～6次，每次間隔12小時(shí)，每2次遞減5IU。第1次注射FSH的同時(shí)注射PMSG。第5次注射FSH的同時(shí)撤栓，肌肉注射PG（氯前列烯醇）。12小時(shí)后即第6次注射FSH之前，對(duì)供體母羊進(jìn)行試情，對(duì)發(fā)情的供體羊頸靜脈注射LH（黃體生成激素）；沒有發(fā)情的供體羊進(jìn)行第6次注射FSH，12小時(shí)后試情，發(fā)情的供體羊頸靜脈注射LH。準(zhǔn)確記錄發(fā)情時(shí)間，一般2次試情即可全部發(fā)情。藥物用量見表1。

（2）受體羊的同期發(fā)情。與供體羊同時(shí)處理，同樣采取陰道內(nèi)放置CIDR海綿栓法。具體方法如下：在放栓第10天肌注PMSG，過36小時(shí)取栓，同時(shí)注射PG，每間隔12小時(shí)試情1次。一般2次試情即可全部發(fā)情。根據(jù)試情結(jié)果即發(fā)情時(shí)間不同進(jìn)行編號(hào)，與供體羊進(jìn)行匹配。

表1 同期發(fā)情和超數(shù)排卵所用激素使用劑量

表2 2013年同期發(fā)情和超數(shù)排卵用藥一覽表

同期發(fā)情所用藥物因廠家、批次不同，效果不一樣。2013年同期發(fā)情和超數(shù)排卵藥品來源見表2。

2.供體羊人工授精。采用手術(shù)子宮角輸精方法。對(duì)試情發(fā)情的供體母羊，12小時(shí)后人工授精。

3.胚胎采集、檢驗(yàn)。供體羊人工授精48小時(shí)后，采用手術(shù)輸卵管沖胚，進(jìn)行胚胎沖洗、檢驗(yàn)。沖胚液為新西蘭進(jìn)口。

4.受體羊的確定。受體羊同期發(fā)情處理后，有明顯發(fā)情反應(yīng)，手術(shù)觀察正常排卵并形成功能黃體為合格移植受體。

5.移植。采用手術(shù)輸卵管移植法。從供體采集的胚胎，經(jīng)檢驗(yàn)合格，馬上移植到與供體同期發(fā)情相匹配的受體母羊輸卵管。

二、觀察方法

同期發(fā)情觀察采用試情法。妊娠觀察，受體母羊移植后2個(gè)情期不發(fā)情為妊娠。

三、結(jié)果

1.同期發(fā)情。供體同期發(fā)情率見表3。由表3可知，3個(gè)品種同期發(fā)情率均達(dá)到90%以上。經(jīng)顯著性T檢驗(yàn)，差異不顯著（P＞0.05）。（注：統(tǒng)計(jì)用SAS軟件）

2.超數(shù)排卵。超數(shù)排卵數(shù)見表4。3個(gè)品種超數(shù)排卵可用胚胎平均數(shù)分別為：薩?？?.2枚；杜泊8.4枚；德國(guó)美利奴9.3枚。經(jīng)顯著性T檢驗(yàn)，3個(gè)品種頭均沖胚數(shù)、可用胚胎數(shù)差異不顯著（P＞0.05）。

3.妊娠率。妊娠率見表5。3個(gè)品種妊娠率在60%以上。經(jīng)顯著性T檢驗(yàn)，3個(gè)品種妊娠率差異不顯著（P＞0.05）。

四、討論分析

1.同期發(fā)情與超數(shù)排卵。同期發(fā)情與超數(shù)排卵是胚胎移植的關(guān)鍵技術(shù)，同期發(fā)情質(zhì)量影響供體、受體生理狀態(tài)一致性；超數(shù)排卵技術(shù)影響胚胎數(shù)量和質(zhì)量。此次胚胎移植同期發(fā)情率90%以上，供體和受體同步差在10小時(shí)內(nèi)，說明同期發(fā)情與超數(shù)排卵處理方法可行。

2.不同品種超數(shù)排卵可用胚胎數(shù)。3個(gè)品種超數(shù)排卵可用胚胎平均數(shù)差異不顯著。但是德國(guó)美利奴、杜泊平均可用胚胎數(shù)高于薩福克，德國(guó)美利奴最高。說明德國(guó)美利奴、杜泊在通遼地區(qū)有較高的胚胎移植價(jià)值。

3.妊娠率。3個(gè)品種妊娠率均在60%以上，與國(guó)內(nèi)平均水平接近。說明此次供體、受體體況較好；同期發(fā)情羊處理適當(dāng)；移植操作技術(shù)趨于成熟。

4.關(guān)于超數(shù)排卵藥物用量。超數(shù)排卵FSH（促卵泡素）用量決定超數(shù)排卵效果。此次遵循的原則是：一是體重增加，F(xiàn)SH用量增加。二是初產(chǎn)母羊比經(jīng)產(chǎn)母羊?qū)SH敏感，用量稍減。此次超排，對(duì)于初產(chǎn)的母羊，基本用145～155IU，用量可能偏低，導(dǎo)致青年母羊超數(shù)排卵數(shù)量較小，適當(dāng)加量可能會(huì)提高一些。

五、建議

一是供體羊超數(shù)排卵用藥量嚴(yán)格按體重分組，再根據(jù)經(jīng)產(chǎn)、初產(chǎn)和超數(shù)排卵史做適量調(diào)整。二是做好供體羊體重和超數(shù)排卵用藥量詳細(xì)記錄，這是下次超數(shù)排卵用藥量的最好參考。三是預(yù)防輸卵管堵塞。手術(shù)操作手法要輕柔、熟練，減少對(duì)輸卵管的損傷，同時(shí)做好消炎，防止輸卵管堵塞，保證母羊正常繁殖年限。

表3 供體羊同期發(fā)情率

表4 超數(shù)排卵數(shù)統(tǒng)計(jì)

表5 三個(gè)品種移植妊娠率統(tǒng)計(jì)