韓 飛張 曼張 周王晶鈺

（1.楊凌職業(yè)技術(shù)學(xué)院，陜西楊凌 712100；2.西北農(nóng)林科技大學(xué) 動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，陜西楊凌 712100）

恩諾沙星對(duì)水生動(dòng)物作用的研究進(jìn)展

韓 飛1張 曼1張 周1王晶鈺2

（1.楊凌職業(yè)技術(shù)學(xué)院，陜西楊凌 712100；2.西北農(nóng)林科技大學(xué) 動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，陜西楊凌 712100）

恩諾沙星是獸醫(yī)臨床上廣泛使用的抗微生物藥物之一。本文通過綜述恩諾沙星的理化性質(zhì)以及在水生動(dòng)物體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)和殘留檢測(cè)方法，闡述恩諾沙星在水生動(dòng)物體內(nèi)代謝消除規(guī)律，對(duì)水生動(dòng)物的影響，為臨床用藥提供參考。

恩諾沙星；水生動(dòng)物；殘留檢測(cè)

恩諾沙星（Enrofloxacin）又名乙基環(huán)丙沙星、恩氟沙星。系統(tǒng)命名為：1-環(huán)丙基-7-（4-乙基-1-哌嗪基）-6-氟-1，4-二氫-4-氧代-3-喹啉羧酸。本品目前被國家指定為動(dòng)物專用藥。是第三代氟喹諾酮類藥物，由德國拜耳公司于1987年首創(chuàng)并投放市場(chǎng)，是畜禽專用的抗菌藥物[1]。

1 理化性質(zhì)

本品為微黃色或淡橙黃色結(jié)晶性粉末；無臭，微味苦；遇光會(huì)漸變成為橙紅色。在水和甲醇中微溶，在醋酸、鹽酸或氫氧化鈉溶液中易溶。其鹽酸鹽及乳酸鹽均易溶于水，一般酸鹽比較穩(wěn)定，鈉鹽溶解的較高，在空氣中易吸潮結(jié)塊[2]。恩諾沙星由于化學(xué)分子結(jié)構(gòu)獨(dú)特具有廣譜的抗菌和殺菌的機(jī)理，其抗菌能力強(qiáng)，藥效好，易吸收，在動(dòng)物體內(nèi)的分布較廣，與其他抗生素之間無交叉耐藥性，因此對(duì)于預(yù)防和治療畜禽和水生動(dòng)物的細(xì)菌性疾病具有良好的效果。

2 藥動(dòng)學(xué)

恩諾沙星，對(duì)于多數(shù)單胃動(dòng)物來說內(nèi)服吸收迅速和較安全，0.5～2h可達(dá)血藥峰濃度。肌內(nèi)注射吸收迅速而完全，血清蛋白結(jié)合率為20%～40%。畜禽應(yīng)用恩諾沙星后，體內(nèi)分布很廣泛，除了中樞神經(jīng)系統(tǒng)外，幾乎所有的組織的藥物濃度都高于血漿，這有利于全身感染和深部組織感染的治療。本品通過腎和非腎方式進(jìn)行消除，約15%～50%的藥物原形通過尿排泄。肝臟代謝是次要消除方式，主要是脫去7-位哌嗪環(huán)的乙基生成環(huán)丙沙星，其次為氧化及葡萄糖醛酸結(jié)合[3]。

近年來，恩諾沙星在動(dòng)物體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)研究越來越廣泛，而水生動(dòng)物不同于其他動(dòng)物之處在于水生動(dòng)物是變溫動(dòng)物。因此，水生動(dòng)物體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)研究更加復(fù)雜。

汪文選等[4]在20℃和25℃兩種溫度下測(cè)定了恩諾沙星在鯽魚體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)。結(jié)果表明：兩種水溫條件下鯽魚血漿中的恩諾沙星的分布半衰期和達(dá)峰時(shí)間基本相同。消除半衰期和藥時(shí)曲線下面積在20℃時(shí)明顯大于25℃時(shí)；腎臟和肝臟中20℃時(shí)藥物的清除率明顯小于25℃，而分布半衰期、達(dá)峰時(shí)間、消除半衰期、藥時(shí)曲線下面積則明顯大于25℃。

李春雨等[5]研究了不同給藥方式下恩諾沙星在鯉魚體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)，結(jié)果表明，通過腹腔注射和口灌鯉魚肝臟、腎臟、血漿、和肌肉組織中的藥時(shí)曲線符合一級(jí)消除二室模型。通過比較血漿動(dòng)力學(xué)參數(shù)，表明口灌比腹腔注射給藥吸收慢，達(dá)峰濃度低，血

藥達(dá)峰時(shí)間長(zhǎng)。

錢云云等[6]報(bào)道了恩諾沙星在羅氏沼蝦體內(nèi)的藥代謝動(dòng)力學(xué)。結(jié)果表明，羅氏沼蝦以10 mg/ kg劑量單次肌注給藥后，蝦血液中的藥物濃度即刻就能達(dá)到峰值，并迅速向組織中分布。恩諾沙星在肝胰腺、血淋巴、肌肉中的平均回收率可達(dá)到85.43%±2.75%、86.54%±2.39%、95.01%±1.99%。

3 殘留檢測(cè)

有資料表明，恩諾沙星大劑量使用時(shí)會(huì)在動(dòng)物體內(nèi)產(chǎn)生一定程度的蓄積。主要蓄積物是其代謝產(chǎn)物環(huán)丙沙星。其主要的表現(xiàn)是對(duì)肝腎的毒性，并且其毒性的大小與腎臟的受損程度相關(guān)。相關(guān)的研究資料也表明，恩諾沙星的毒副作用還包括：致癌性、腎功能不全、神經(jīng)毒性、幼畜關(guān)節(jié)炎、過敏反應(yīng)等。因此，對(duì)恩諾沙星在動(dòng)物性食品中的殘留檢測(cè)是非常有必要的。我國農(nóng)業(yè)部公告（第235號(hào)）附錄2中規(guī)定，水產(chǎn)品中恩諾沙星的殘留量為100μg/kg。目前對(duì)恩諾沙星殘留量的檢測(cè)一般有一下幾種方法：

3.1 微生物法

微生物法檢測(cè)時(shí)間短，樣品處理簡(jiǎn)單，成本低，適用于對(duì)畜禽組織中藥物殘留的快速篩選并且適用于不同基質(zhì)的樣品檢測(cè)，具有很好的重復(fù)性和再現(xiàn)性，方法準(zhǔn)確可靠。

沈翠香等[7]用增敏微生物抑制法來檢測(cè)恩諾沙星藥物殘留，由于紅四氮唑的顯色效果方便，因而用來定性判斷恩諾沙星的藥物殘留，檢測(cè)限低到10μg/kg。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：未添加恩諾沙星的結(jié)果呈紅色；恩諾沙星的標(biāo)準(zhǔn)品濃度在5μg/L時(shí)結(jié)果呈微紅，10μg/L及以上時(shí)，結(jié)果呈無色。

胡鯤等[8]對(duì)銀鯽肌肉中殘留的恩諾沙星進(jìn)行檢測(cè)，選擇紅四氮唑顯色培養(yǎng)基上，分別以滕黃八疊球菌、大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、嗜熱脂肪芽孢桿菌和熒光假單孢菌作為指示菌，檢測(cè)異育銀鯽肌肉中ENR殘留的最低檢測(cè)分別50μg/kg、120μg/kg、100μg/kg、75μg/kg和100μg/kg。實(shí)驗(yàn)檢測(cè)限可達(dá)50μg /kg。

3.2 酶聯(lián)免疫法（ELISA）

ELISA法被廣泛應(yīng)用于抗菌藥物的殘留測(cè)定中，此法適用于大量樣品的同時(shí)檢測(cè)以及殘留的快速篩選，優(yōu)點(diǎn)是簡(jiǎn)單，快速。該法以抗原和抗體的特異性結(jié)合的原理得到檢測(cè)結(jié)果。

蔣興東等[9]用制備免疫抗原和包被抗原的方法，免疫新西蘭大白兔得到恩諾沙星的多克隆抗體，建立了恩諾沙星間接的競(jìng)爭(zhēng)ELISA的方法。其結(jié)果表明：抗恩諾沙星的血清效價(jià)達(dá)達(dá)1：212以上，最低檢測(cè)限（LOD）為10ng/mL。批內(nèi)RSD為3.18%～7.64%，批間RSD為9.69%～11.94%。

劉紅等[10]用紫外掃描分析和以及EL ISA 方法鑒定，采用ENRHRP 與游離的恩諾沙星相競(jìng)爭(zhēng)的模式來建立檢測(cè)恩諾沙星殘留的EL ISA 檢測(cè)方法，其標(biāo)準(zhǔn)曲線在 0. 423～1000ng/mL之間時(shí)線性關(guān)系良好，其IC50為33.76ng/mL。用ELISA檢測(cè)方法批內(nèi)RSD為5. 75%，批間RSD為10. 69%，重復(fù)性較好。

3.3 高效液相色譜法（HPLC）

目前對(duì)于恩諾沙星的檢測(cè)多用液相色譜法。采用高效液相色譜法時(shí)應(yīng)配備不同的檢測(cè)器，保證了高效液相色譜法的定量準(zhǔn)確、特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。可以用此法分析動(dòng)物性食品中恩諾沙星的殘留。

陳雪昌等[11]用高效液相色譜法測(cè)定水產(chǎn)品中恩諾沙星的殘留量，在測(cè)定方法下得到恩諾沙星的標(biāo)準(zhǔn)色譜圖和樣品的加標(biāo)色譜圖，其中保留時(shí)間約為6.4min，在0.005～0.20 μg/mL 范圍內(nèi)線性顯著。恩諾沙星的峰面積（A）與標(biāo)準(zhǔn)液濃度X（μg/mL）相關(guān)系數(shù)是0.9983。

陳向丹[12]建立了恩諾沙星有效成分含量的HPLC測(cè)定法。結(jié)果顯示，恩諾沙星在10.0～200.0 μg／mL的范圍內(nèi)含量與峰面積線性關(guān)系良好，平均回收率101.3%，相關(guān)系數(shù)為0.9999（n=6），RSD為2.0%。

4 臨床應(yīng)用

恩諾沙星是一類應(yīng)用廣泛，療效確切的抗菌藥。在臨床應(yīng)用中其不良反應(yīng)的發(fā)生與給藥途徑、藥物劑量、用藥速度、用藥時(shí)間及個(gè)體的差異有關(guān)。應(yīng)該嚴(yán)格掌握適應(yīng)癥，注意配伍禁忌，療程不宜過長(zhǎng)。其與青霉素類、慶大霉素、卡那霉素、粘菌素等合用時(shí)具有協(xié)同作用，組成復(fù)方則會(huì)提高療效并且降低成本。還應(yīng)注意的是恩諾沙星和利福平等有拮抗作用，在臨床使用中應(yīng)避免合用。

臨床上，恩諾沙星制劑廣泛地應(yīng)用于淡水魚類的疾病防治：腸炎病、爛鰓病、赤皮病、出血性敗血癥、打印病；鰻愛德華氏病、鰻弧菌性腸炎、鰻赤鰭；對(duì)蝦立克次氏體病、對(duì)蝦白斑病毒病、紅鰓病、黃鰓病、爛眼??；黃鱔出血?。恍芳讱儾?、爛鰓病、細(xì)菌性抖抖病等。而且，恩諾沙星對(duì)于一般的常規(guī)藥所不能治療的或久治不愈的爛鰓病、赤鰭病、腸炎病、爛尾病及各類水產(chǎn)動(dòng)物的疾病都具有較好的療效。

5 小結(jié)與展望

恩諾沙星在對(duì)水生動(dòng)物病原體的藥效學(xué)和水生動(dòng)物的藥動(dòng)學(xué)特征上有相當(dāng)?shù)膬?yōu)越性，具有組織分布廣、抗菌譜廣、生物利用度高、不易產(chǎn)生耐藥性、抗菌活性強(qiáng)、口服吸收好不良反應(yīng)相對(duì)較少等優(yōu)點(diǎn)，同時(shí)毒副作用較小。其在體內(nèi)的藥動(dòng)力學(xué)特征：體內(nèi)分布廣泛，消除半衰期長(zhǎng)，表現(xiàn)分布容積大；肌注和內(nèi)服后吸收迅速。治療水生動(dòng)物細(xì)菌性疾病此藥物是較好的選擇，在水產(chǎn)養(yǎng)殖中有較好的應(yīng)用前景，可以在漁業(yè)生產(chǎn)中合理推廣應(yīng)用。同時(shí)也應(yīng)該注意供食用的魚的休藥期。

[1] 楊先樂，陸承平，戰(zhàn)文斌.新編漁藥手冊(cè)[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2005：208-209.

[2] 中華人民共和國獸藥典2010版[M]中國農(nóng)業(yè)出版社，2010：412-413.

[3] 陳杖榴.獸醫(yī)藥理學(xué)[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社.2009：274-276.

[4] 汪文選，陳儉清，劉紅柏，等.兩種水溫條件下恩諾沙星在鯽魚體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)比較 [J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2010，（2）：129-130.

[5] 李春雨，李繼昌，盧彤巖，等.不同給藥方式下恩諾沙星在鯉體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)研究[J].集美大學(xué)學(xué)報(bào)，2009，14（3）：8-13.

[6] 錢云云，唐俊，鄭宗林，等.恩諾沙星在羅氏沼蝦體內(nèi)的藥物代謝動(dòng)力學(xué)[J].動(dòng)物學(xué)雜，2007，42（5）：62-69.

[7] 沈翠香，黃曉蓉，吳謙，等.增敏微生物抑制法檢測(cè)恩諾沙星藥物殘留[J].福建畜牧獸醫(yī)，2010，32（2）：2-3.

[8] 胡鯤，李怡，朱澤聞. 微生物顯色法快速檢測(cè)水產(chǎn)品中恩諾沙星殘留[J].上海海洋大學(xué)學(xué)報(bào)，2009，18（7）：04-07.

[9] 蔣興東，陳玉飛，涂健，等.恩諾沙星在雞肉組織中殘留的ELISA檢測(cè)方法研究[J]. 畜牧與獸醫(yī)，2008，40（8）：30-33.

[10] 劉紅，曾振靈，陳杖榴，等.恩諾沙星 ELISA快速檢測(cè)方法的建立[J].中國獸藥雜志2006，40（11）：13-15.

[11] 陳雪昌，鄭代明，金彩杏.高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定水產(chǎn)品中鹽酸環(huán)丙沙星和恩諾沙星殘留量[J].中國科技信息，2005，（14）：16-17.

[12] 陳向丹，曾勇. 高效液相色譜法測(cè)定恩諾沙星、鹽酸小檗堿粉中兩種有效成分含量[J].中國獸藥雜志，2012，46（5）：31-33.

楊凌職業(yè)技術(shù)學(xué)院科學(xué)研究基金項(xiàng)目（A2012041）。

韓飛（1977-），男，陜西漢中人，碩士，講師，主要從事生物制藥與藥物制劑方向的研究。