姚麗峰　白莉

[摘要] 目的 研究扁平苔蘚皮損中白介素-17（IL-17）、叉頭轉(zhuǎn)錄因子3（FoxP3）和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）的表達(dá)及意義。 方法 采用免疫組織化學(xué)法和原位末端標(biāo)記技術(shù)檢測(cè)30例扁平苔蘚患者皮損和30例健康人皮膚組織中IL-17、FoxP3、Caspase-3的表達(dá)和細(xì)胞凋亡情況。 結(jié)果 扁平苔蘚組IL-17、FoxP3和Caspase-3的積分光密度值分別為（14.67±1.79）×103、（14.52±2.56）×103和（11.82±2.09）×103，明顯高于健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=18.88、14.69、12.43，P<0.01）。扁平苔蘚組的凋亡指數(shù)為（70.55±5.78），明顯高于健康對(duì)照組的（30.01±3.97），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=31.67，P<0.01）。扁平苔蘚組IL-17與FoxP3呈正相關(guān)，F(xiàn)oxP3與Caspase-3呈正相關(guān)，F(xiàn)oxP3和Caspase-3與角質(zhì)形成細(xì)胞凋亡程度呈正相關(guān)。 結(jié)論 IL-17、FoxP3在扁平苔蘚皮損中表達(dá)上調(diào)，可能導(dǎo)致T細(xì)胞免疫功能紊亂，且FoxP3、Caspase-3可能參與了角質(zhì)形成細(xì)胞的凋亡。

[關(guān)鍵詞] 扁平苔蘚；白介素-17；叉頭轉(zhuǎn)錄因子3；半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3

[中圖分類(lèi)號(hào)] R758.65 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721（2014）02（b）-0025-03

扁平苔蘚（lichen planus，LP）是一種多因素相互作用的慢性炎性丘疹鱗屑性疾病。近年來(lái)，研究認(rèn)為L(zhǎng)P發(fā)病主要與T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫紊亂和細(xì)胞凋亡密切相關(guān)[1-3]。IL-17是Th17最具特征性的細(xì)胞因子，在許多炎癥反應(yīng)、自身免疫反應(yīng)中發(fā)揮重要作用。FoxP3是調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（regulatory T cell，Treg）內(nèi)的標(biāo)志性因子，可通過(guò)調(diào)節(jié)Treg細(xì)胞的發(fā)育和功能，發(fā)揮免疫抑制作用。Caspase級(jí)聯(lián)反應(yīng)在細(xì)胞凋亡過(guò)程中發(fā)揮重要的介導(dǎo)作用，其中Caspase-3最具代表性。本文通過(guò)LP皮損中IL-17、FoxP3、Caspase-3的表達(dá)情況以探討其在LP發(fā)病中的作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2012年1月～2013年3月本院皮膚科30例LP患者的活檢標(biāo)本，男12例，女18例，年齡18～71歲，平均45.1歲，病程20 d～6個(gè)月，取材部位為軀干和四肢，其中6例伴口腔黏膜白斑，所有病例均經(jīng)臨床和病理確診，同時(shí)6個(gè)月內(nèi)均未使用過(guò)糖皮質(zhì)激素、免疫調(diào)節(jié)劑類(lèi)藥物；健康對(duì)照組30例，取自同期本院整形科健康人皮膚，男9例，女21例，年齡21～60歲，平均40.3 歲。所有組織制成石蠟標(biāo)本備用。本實(shí)驗(yàn)經(jīng)過(guò)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，受試者均簽署知情同意書(shū)。兩組的性別和年齡比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 試劑

兔抗人IL-17、FoxP3、Caspase-3多克隆抗體購(gòu)自北京博奧森生物技術(shù)有限公司；二步法PV6001免疫組織化學(xué)檢測(cè)試劑盒、二氨基聯(lián)苯胺（DAB）顯色劑，原位末端標(biāo)記技術(shù)（TUNEL）試劑盒等均購(gòu)自北京中杉生物技術(shù)有限公司。

1.3 方法

1.3.1 免疫組織化學(xué)法 石蠟切片脫蠟至水化；3% H2O2溶液孵育15 min滅活內(nèi)源性過(guò)氧化物酶；用枸櫞酸鈉高溫高壓熱修復(fù)；滴加IL-17多抗（1∶150）4℃過(guò)夜、FoxP3多抗（1∶250）37℃孵育90 min和Caspase-3多抗（1∶200）4℃過(guò)夜，分別滴加二步法PV6001，DAB顯色，蘇木素復(fù)染，脫水封片。用磷酸鹽緩沖液（PBS）代替一抗作陰性對(duì)照。

1.3.2 TUNEL法 石蠟切片脫蠟水化；3% H2O2、甲醇溶液處理；20 ？滋g/ml蛋白酶K 37℃修復(fù)15 min；加TUNEL反應(yīng)液37℃孵育75 min，再加轉(zhuǎn)換劑過(guò)氧化物酶37℃孵育30 min，DAB顯色，蘇木素復(fù)染，封片。用不含TdT酶，只含標(biāo)記dUTP的溶液代替TUNEL反應(yīng)液作陰性對(duì)照。

1.3.3 結(jié)果判定 免疫組織化學(xué)法檢測(cè)以細(xì)胞質(zhì)和（或）細(xì)胞核有棕黃色顆粒為陽(yáng)性，采用MIAS-2000圖像分析系統(tǒng)，每張切片隨機(jī)選取5個(gè)視野，分析陽(yáng)性區(qū)域積分光密度（IOD）值的強(qiáng)度。TUNEL檢測(cè)結(jié)果以細(xì)胞核有棕黃色顆粒為凋亡細(xì)胞，每張切片隨機(jī)選取5個(gè)高倍視野（×400），記錄陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)與總細(xì)胞數(shù)的比例，即為凋亡指數(shù)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析和處理，計(jì)量資料以x±s表示，采用t檢驗(yàn)，相關(guān)性采用Pearson相關(guān)分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組免疫組織化學(xué)法檢測(cè)結(jié)果的比較

IL-17陽(yáng)性染色定位于胞質(zhì)，F(xiàn)oxP3陽(yáng)性染色定位于胞核，Caspase-3陽(yáng)性染色定位于胞質(zhì)或胞核；LP組IL-17、FoxP3陽(yáng)性細(xì)胞主要是真皮淺層淋巴細(xì)胞，Caspase-3陽(yáng)性染色主要位于表皮基底層和棘層的角質(zhì)形成細(xì)胞及真皮淺層淋巴細(xì)胞；健康對(duì)照組三者僅在部分標(biāo)本的真皮淺層呈弱陽(yáng)性表達(dá)。兩組IL-17、FoxP3及Caspase-3的IOD值比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）（表1）。

表1 兩組IL-17、FoxP3及Caspase-3 IOD值的比較（×103，x±s）

2.2 兩組TUNEL檢測(cè)結(jié)果的比較

LP組表皮的棘層和基底層可見(jiàn)大多數(shù)角質(zhì)形成細(xì)胞核被染為棕黃色，尤以液化變性的基底層細(xì)胞為多，真皮淺層少量淋巴細(xì)胞也呈陽(yáng)性染色；健康對(duì)照組中僅顆粒層有少量的陽(yáng)性染色。LP組的細(xì)胞凋亡指數(shù)為（70.55±5.78），健康對(duì)照組的細(xì)胞凋亡指數(shù)為（30.01±3.97），兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

2.3 相關(guān)性分析結(jié)果

LP組IL-17與FoxP3呈正相關(guān)（r=0.60），F(xiàn)oxP3與Caspase-3呈正相關(guān)（r=0.61），且FoxP3和Caspase-3與角質(zhì)形成細(xì)胞凋亡程度呈正相關(guān)（r=0.74、0.76，P<0.01）。

3 討論

LP的特征性病理變化為基底層細(xì)胞液化變性和真皮上部淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)。一般認(rèn)為L(zhǎng)P中活化的T細(xì)胞聚集到真、表皮連接處，可導(dǎo)致免疫炎癥反應(yīng)和基底層角質(zhì)形成細(xì)胞凋亡[4-5]。本研究發(fā)現(xiàn)，LP組IL-17、FoxP3表達(dá)高于健康對(duì)照組，且兩者呈正相關(guān)，說(shuō)明在LP皮損中存在IL-17/FoxP3失衡，兩者共同參與LP的炎癥反應(yīng)。IL-17在組織中表達(dá)增高與Shaker等[6]的研究結(jié)果一致，不同的是有文獻(xiàn)報(bào)道，LP患者外周血中Treg細(xì)胞數(shù)量較正常人明顯減少，F(xiàn)oxP3表達(dá)下降[7-8]。FoxP3在皮損處表達(dá)上調(diào)可能與某些因素引起FoxP3的過(guò)度激活或某種細(xì)胞因子趨化Treg細(xì)胞的聚集有關(guān)。IL-17是T細(xì)胞誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)的早期啟動(dòng)因素，當(dāng)與其細(xì)胞表面的受體IL-17R結(jié)合，通過(guò)活化接頭蛋白1、TRAF6、NF-κB等一系列信號(hào)傳導(dǎo)因子，協(xié)同腫瘤壞死因子可誘導(dǎo)炎癥相關(guān)基因的表達(dá)，從而使轉(zhuǎn)錄編碼的IL-6、IL-8等促炎因子大量釋放，引起炎癥反應(yīng)，可能是LP表現(xiàn)為慢性炎癥反應(yīng)的重要原因。在炎癥反應(yīng)時(shí)，IL-6、TGF-β等又可激活STAT3通路活化ROR-γt（Th17型細(xì)胞的特異性轉(zhuǎn)錄因子），使Th0細(xì)胞向Th17細(xì)胞方向分化，進(jìn)一步加重炎癥反應(yīng)，此外，IL-17可促進(jìn)B細(xì)胞的增殖和分化，協(xié)同參與LP的發(fā)病[9-11]，Th17和IL-17可能通過(guò)上述機(jī)制參與LP的發(fā)病，也可能是IL-17高表達(dá)的原因。

de Boer等[12]的研究發(fā)現(xiàn)，在皮膚組織中，F(xiàn)oxP3+T細(xì)胞幾乎全部只表達(dá)CD4與CD25，證實(shí)了FoxP3是原位識(shí)別CD4+CD25+Treg細(xì)胞的特征性標(biāo)記。本研究中FoxP3表達(dá)較健康對(duì)照組高，可能是Treg對(duì)組織損傷的相關(guān)信號(hào)反應(yīng)，通過(guò)發(fā)揮免疫抑制作用，以減輕損傷程度，達(dá)到對(duì)機(jī)體保護(hù)的作用，但由于其抑制機(jī)體免疫應(yīng)答，或許反而延長(zhǎng)了慢性炎癥的病程。FoxP3+T細(xì)胞可通過(guò)釋放顆粒酶穿孔素激活表達(dá)由外來(lái)或自身抗原角質(zhì)形成細(xì)胞內(nèi)的Caspase級(jí)聯(lián)反應(yīng)的細(xì)胞凋亡程序直接殺傷免疫效應(yīng)細(xì)胞[13]，其中Caspase-3是凋亡反應(yīng)中重要的介導(dǎo)因子，常作為判定凋亡的指標(biāo)[14]。本研究顯示，F(xiàn)oxP3和Caspase-3表達(dá)上調(diào)與角質(zhì)形成細(xì)胞凋亡程度呈正相關(guān)，提示在LP皮損中，F(xiàn)oxP3+T細(xì)胞通過(guò)激活凋亡程序，誘導(dǎo)角質(zhì)形成細(xì)胞凋亡，以對(duì)抗角質(zhì)形成細(xì)胞不斷增生，從而緩解顆粒層和棘層的增厚程度。

綜上所述，LP患者皮損處IL-17、FoxP3、Caspase-3均高表達(dá)，提示IL-17、FoxP3介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)和FoxP3、Caspase-3誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡可能是LP發(fā)生的關(guān)鍵性因素，進(jìn)一步明確其在LP發(fā)病機(jī)制中的具體作用并針對(duì)性地進(jìn)行干預(yù)，可為臨床治療LP提供新的思路。

[參考文獻(xiàn)]

[1] Chatila TA.Role of regulatory T cells in human diseases[J].J Allergy Clin Immunol，2005，116（5）：949-959.

[2] Tesmer LA，Lundy SK，Sarkar S，et al.Th17 cells in human disease[J].Immunol Rev，2008，223：87-113.

[3] 馬蕾，李曉紅，張玉杰，等.過(guò)敏性紫癜患者外周血Th17/Treg細(xì)胞平衡性檢測(cè)[J].中華皮膚科雜志，2010，43（9）：617-619.

[4] 趙辨.臨床皮膚病學(xué)[M].南京：江蘇科學(xué)技術(shù)出版社，2010：1037-1045.

[5] 陳謙明，曾昕.口腔扁平苔蘚的病因和發(fā)病機(jī)制的現(xiàn)狀及對(duì)策[J].中華口腔醫(yī)學(xué)雜志，2012，47（7）：385-390.

[6] Shaker O，Hassan AS.Possible role of interleukin-17 in the pathogenesis of lichen planus[J].Br J Dermatol，2012， 166（6）：1367-1368.

[7] Tao XA，Xia J，Chen XB，et al.FOXP3 T regulatory cells in lesions of oral lichen planus correlated with disease activity[J].Oral Dis，2010，16（1）：76-82.

[8] 黃遠(yuǎn)忠，董正蓉，林伯盛，等.扁平苔蘚患者外周血CD4+CD25+Treg細(xì)胞的檢測(cè)[J].中國(guó)麻風(fēng)皮膚病雜志，2011， 27（3）：151-153.

[9] Miossec P，Kolls JK.Targeting IL-17 and TH17 cells in chronic inflammation [J].Nat Rev Drug Discov，2012，11（10）：763-776.

[10] Mitsdoerffer M，Lee Y，J？覿ger A，et al.Proinflammatory T helper type 17 cells are effective B-cell helpers[J].Proc Natl Acad Sci USA，2010，107（32）：14292-14297.

[11] Fukushi S，Yamasaki K，Aiba S.Nuclear localization of activated STAT6 and STAT3 in epidermis of prurigo nodularis[J].Br J Dermatol，2011，165（5）：990-996.

[12] de Boer OJ，van der Loos CM，Teeling P，et al.Immunohistochemical analysis of regulatory T cell markers FOXP3 and GITR on CD4+CD25+T cells in normal skin and inflammatory dermatoses[J].J Histochem Cytochem，2007， 55（9）：891-898

[13] 張玉麗，張春敏.CD4+CD25+Treg細(xì)胞和Th17細(xì)胞與尋常型銀屑病發(fā)病的相關(guān)性[J].中國(guó)麻風(fēng)皮膚病雜志，2011， 27（10）：703-705.

[14] 王娟，白莉，鮑海平，等.扁平苔蘚皮損中腫瘤壞死因子α和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶8、3的表達(dá)[J].中華皮膚科雜志，2012，45（12）：862-864.

（收稿日期：2013-12-10 本文編輯：李亞聰）

2.3 相關(guān)性分析結(jié)果

LP組IL-17與FoxP3呈正相關(guān)（r=0.60），F(xiàn)oxP3與Caspase-3呈正相關(guān)（r=0.61），且FoxP3和Caspase-3與角質(zhì)形成細(xì)胞凋亡程度呈正相關(guān)（r=0.74、0.76，P<0.01）。

3 討論

LP的特征性病理變化為基底層細(xì)胞液化變性和真皮上部淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)。一般認(rèn)為L(zhǎng)P中活化的T細(xì)胞聚集到真、表皮連接處，可導(dǎo)致免疫炎癥反應(yīng)和基底層角質(zhì)形成細(xì)胞凋亡[4-5]。本研究發(fā)現(xiàn)，LP組IL-17、FoxP3表達(dá)高于健康對(duì)照組，且兩者呈正相關(guān)，說(shuō)明在LP皮損中存在IL-17/FoxP3失衡，兩者共同參與LP的炎癥反應(yīng)。IL-17在組織中表達(dá)增高與Shaker等[6]的研究結(jié)果一致，不同的是有文獻(xiàn)報(bào)道，LP患者外周血中Treg細(xì)胞數(shù)量較正常人明顯減少，F(xiàn)oxP3表達(dá)下降[7-8]。FoxP3在皮損處表達(dá)上調(diào)可能與某些因素引起FoxP3的過(guò)度激活或某種細(xì)胞因子趨化Treg細(xì)胞的聚集有關(guān)。IL-17是T細(xì)胞誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)的早期啟動(dòng)因素，當(dāng)與其細(xì)胞表面的受體IL-17R結(jié)合，通過(guò)活化接頭蛋白1、TRAF6、NF-κB等一系列信號(hào)傳導(dǎo)因子，協(xié)同腫瘤壞死因子可誘導(dǎo)炎癥相關(guān)基因的表達(dá)，從而使轉(zhuǎn)錄編碼的IL-6、IL-8等促炎因子大量釋放，引起炎癥反應(yīng)，可能是LP表現(xiàn)為慢性炎癥反應(yīng)的重要原因。在炎癥反應(yīng)時(shí)，IL-6、TGF-β等又可激活STAT3通路活化ROR-γt（Th17型細(xì)胞的特異性轉(zhuǎn)錄因子），使Th0細(xì)胞向Th17細(xì)胞方向分化，進(jìn)一步加重炎癥反應(yīng)，此外，IL-17可促進(jìn)B細(xì)胞的增殖和分化，協(xié)同參與LP的發(fā)病[9-11]，Th17和IL-17可能通過(guò)上述機(jī)制參與LP的發(fā)病，也可能是IL-17高表達(dá)的原因。

de Boer等[12]的研究發(fā)現(xiàn)，在皮膚組織中，F(xiàn)oxP3+T細(xì)胞幾乎全部只表達(dá)CD4與CD25，證實(shí)了FoxP3是原位識(shí)別CD4+CD25+Treg細(xì)胞的特征性標(biāo)記。本研究中FoxP3表達(dá)較健康對(duì)照組高，可能是Treg對(duì)組織損傷的相關(guān)信號(hào)反應(yīng)，通過(guò)發(fā)揮免疫抑制作用，以減輕損傷程度，達(dá)到對(duì)機(jī)體保護(hù)的作用，但由于其抑制機(jī)體免疫應(yīng)答，或許反而延長(zhǎng)了慢性炎癥的病程。FoxP3+T細(xì)胞可通過(guò)釋放顆粒酶穿孔素激活表達(dá)由外來(lái)或自身抗原角質(zhì)形成細(xì)胞內(nèi)的Caspase級(jí)聯(lián)反應(yīng)的細(xì)胞凋亡程序直接殺傷免疫效應(yīng)細(xì)胞[13]，其中Caspase-3是凋亡反應(yīng)中重要的介導(dǎo)因子，常作為判定凋亡的指標(biāo)[14]。本研究顯示，F(xiàn)oxP3和Caspase-3表達(dá)上調(diào)與角質(zhì)形成細(xì)胞凋亡程度呈正相關(guān)，提示在LP皮損中，F(xiàn)oxP3+T細(xì)胞通過(guò)激活凋亡程序，誘導(dǎo)角質(zhì)形成細(xì)胞凋亡，以對(duì)抗角質(zhì)形成細(xì)胞不斷增生，從而緩解顆粒層和棘層的增厚程度。

綜上所述，LP患者皮損處IL-17、FoxP3、Caspase-3均高表達(dá)，提示IL-17、FoxP3介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)和FoxP3、Caspase-3誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡可能是LP發(fā)生的關(guān)鍵性因素，進(jìn)一步明確其在LP發(fā)病機(jī)制中的具體作用并針對(duì)性地進(jìn)行干預(yù)，可為臨床治療LP提供新的思路。

[參考文獻(xiàn)]

[1] Chatila TA.Role of regulatory T cells in human diseases[J].J Allergy Clin Immunol，2005，116（5）：949-959.

[2] Tesmer LA，Lundy SK，Sarkar S，et al.Th17 cells in human disease[J].Immunol Rev，2008，223：87-113.

[3] 馬蕾，李曉紅，張玉杰，等.過(guò)敏性紫癜患者外周血Th17/Treg細(xì)胞平衡性檢測(cè)[J].中華皮膚科雜志，2010，43（9）：617-619.

[4] 趙辨.臨床皮膚病學(xué)[M].南京：江蘇科學(xué)技術(shù)出版社，2010：1037-1045.

[5] 陳謙明，曾昕.口腔扁平苔蘚的病因和發(fā)病機(jī)制的現(xiàn)狀及對(duì)策[J].中華口腔醫(yī)學(xué)雜志，2012，47（7）：385-390.

[6] Shaker O，Hassan AS.Possible role of interleukin-17 in the pathogenesis of lichen planus[J].Br J Dermatol，2012， 166（6）：1367-1368.

[7] Tao XA，Xia J，Chen XB，et al.FOXP3 T regulatory cells in lesions of oral lichen planus correlated with disease activity[J].Oral Dis，2010，16（1）：76-82.

[8] 黃遠(yuǎn)忠，董正蓉，林伯盛，等.扁平苔蘚患者外周血CD4+CD25+Treg細(xì)胞的檢測(cè)[J].中國(guó)麻風(fēng)皮膚病雜志，2011， 27（3）：151-153.

[9] Miossec P，Kolls JK.Targeting IL-17 and TH17 cells in chronic inflammation [J].Nat Rev Drug Discov，2012，11（10）：763-776.

[10] Mitsdoerffer M，Lee Y，J？覿ger A，et al.Proinflammatory T helper type 17 cells are effective B-cell helpers[J].Proc Natl Acad Sci USA，2010，107（32）：14292-14297.

[11] Fukushi S，Yamasaki K，Aiba S.Nuclear localization of activated STAT6 and STAT3 in epidermis of prurigo nodularis[J].Br J Dermatol，2011，165（5）：990-996.

[12] de Boer OJ，van der Loos CM，Teeling P，et al.Immunohistochemical analysis of regulatory T cell markers FOXP3 and GITR on CD4+CD25+T cells in normal skin and inflammatory dermatoses[J].J Histochem Cytochem，2007， 55（9）：891-898

[13] 張玉麗，張春敏.CD4+CD25+Treg細(xì)胞和Th17細(xì)胞與尋常型銀屑病發(fā)病的相關(guān)性[J].中國(guó)麻風(fēng)皮膚病雜志，2011， 27（10）：703-705.

[14] 王娟，白莉，鮑海平，等.扁平苔蘚皮損中腫瘤壞死因子α和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶8、3的表達(dá)[J].中華皮膚科雜志，2012，45（12）：862-864.

（收稿日期：2013-12-10 本文編輯：李亞聰）

2.3 相關(guān)性分析結(jié)果

LP組IL-17與FoxP3呈正相關(guān)（r=0.60），F(xiàn)oxP3與Caspase-3呈正相關(guān)（r=0.61），且FoxP3和Caspase-3與角質(zhì)形成細(xì)胞凋亡程度呈正相關(guān)（r=0.74、0.76，P<0.01）。

3 討論

LP的特征性病理變化為基底層細(xì)胞液化變性和真皮上部淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)。一般認(rèn)為L(zhǎng)P中活化的T細(xì)胞聚集到真、表皮連接處，可導(dǎo)致免疫炎癥反應(yīng)和基底層角質(zhì)形成細(xì)胞凋亡[4-5]。本研究發(fā)現(xiàn)，LP組IL-17、FoxP3表達(dá)高于健康對(duì)照組，且兩者呈正相關(guān)，說(shuō)明在LP皮損中存在IL-17/FoxP3失衡，兩者共同參與LP的炎癥反應(yīng)。IL-17在組織中表達(dá)增高與Shaker等[6]的研究結(jié)果一致，不同的是有文獻(xiàn)報(bào)道，LP患者外周血中Treg細(xì)胞數(shù)量較正常人明顯減少，F(xiàn)oxP3表達(dá)下降[7-8]。FoxP3在皮損處表達(dá)上調(diào)可能與某些因素引起FoxP3的過(guò)度激活或某種細(xì)胞因子趨化Treg細(xì)胞的聚集有關(guān)。IL-17是T細(xì)胞誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)的早期啟動(dòng)因素，當(dāng)與其細(xì)胞表面的受體IL-17R結(jié)合，通過(guò)活化接頭蛋白1、TRAF6、NF-κB等一系列信號(hào)傳導(dǎo)因子，協(xié)同腫瘤壞死因子可誘導(dǎo)炎癥相關(guān)基因的表達(dá)，從而使轉(zhuǎn)錄編碼的IL-6、IL-8等促炎因子大量釋放，引起炎癥反應(yīng)，可能是LP表現(xiàn)為慢性炎癥反應(yīng)的重要原因。在炎癥反應(yīng)時(shí)，IL-6、TGF-β等又可激活STAT3通路活化ROR-γt（Th17型細(xì)胞的特異性轉(zhuǎn)錄因子），使Th0細(xì)胞向Th17細(xì)胞方向分化，進(jìn)一步加重炎癥反應(yīng)，此外，IL-17可促進(jìn)B細(xì)胞的增殖和分化，協(xié)同參與LP的發(fā)病[9-11]，Th17和IL-17可能通過(guò)上述機(jī)制參與LP的發(fā)病，也可能是IL-17高表達(dá)的原因。

de Boer等[12]的研究發(fā)現(xiàn)，在皮膚組織中，F(xiàn)oxP3+T細(xì)胞幾乎全部只表達(dá)CD4與CD25，證實(shí)了FoxP3是原位識(shí)別CD4+CD25+Treg細(xì)胞的特征性標(biāo)記。本研究中FoxP3表達(dá)較健康對(duì)照組高，可能是Treg對(duì)組織損傷的相關(guān)信號(hào)反應(yīng)，通過(guò)發(fā)揮免疫抑制作用，以減輕損傷程度，達(dá)到對(duì)機(jī)體保護(hù)的作用，但由于其抑制機(jī)體免疫應(yīng)答，或許反而延長(zhǎng)了慢性炎癥的病程。FoxP3+T細(xì)胞可通過(guò)釋放顆粒酶穿孔素激活表達(dá)由外來(lái)或自身抗原角質(zhì)形成細(xì)胞內(nèi)的Caspase級(jí)聯(lián)反應(yīng)的細(xì)胞凋亡程序直接殺傷免疫效應(yīng)細(xì)胞[13]，其中Caspase-3是凋亡反應(yīng)中重要的介導(dǎo)因子，常作為判定凋亡的指標(biāo)[14]。本研究顯示，F(xiàn)oxP3和Caspase-3表達(dá)上調(diào)與角質(zhì)形成細(xì)胞凋亡程度呈正相關(guān)，提示在LP皮損中，F(xiàn)oxP3+T細(xì)胞通過(guò)激活凋亡程序，誘導(dǎo)角質(zhì)形成細(xì)胞凋亡，以對(duì)抗角質(zhì)形成細(xì)胞不斷增生，從而緩解顆粒層和棘層的增厚程度。

綜上所述，LP患者皮損處IL-17、FoxP3、Caspase-3均高表達(dá)，提示IL-17、FoxP3介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)和FoxP3、Caspase-3誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡可能是LP發(fā)生的關(guān)鍵性因素，進(jìn)一步明確其在LP發(fā)病機(jī)制中的具體作用并針對(duì)性地進(jìn)行干預(yù)，可為臨床治療LP提供新的思路。

[參考文獻(xiàn)]

[1] Chatila TA.Role of regulatory T cells in human diseases[J].J Allergy Clin Immunol，2005，116（5）：949-959.

[2] Tesmer LA，Lundy SK，Sarkar S，et al.Th17 cells in human disease[J].Immunol Rev，2008，223：87-113.

[3] 馬蕾，李曉紅，張玉杰，等.過(guò)敏性紫癜患者外周血Th17/Treg細(xì)胞平衡性檢測(cè)[J].中華皮膚科雜志，2010，43（9）：617-619.

[4] 趙辨.臨床皮膚病學(xué)[M].南京：江蘇科學(xué)技術(shù)出版社，2010：1037-1045.

[5] 陳謙明，曾昕.口腔扁平苔蘚的病因和發(fā)病機(jī)制的現(xiàn)狀及對(duì)策[J].中華口腔醫(yī)學(xué)雜志，2012，47（7）：385-390.

[6] Shaker O，Hassan AS.Possible role of interleukin-17 in the pathogenesis of lichen planus[J].Br J Dermatol，2012， 166（6）：1367-1368.

[7] Tao XA，Xia J，Chen XB，et al.FOXP3 T regulatory cells in lesions of oral lichen planus correlated with disease activity[J].Oral Dis，2010，16（1）：76-82.

[8] 黃遠(yuǎn)忠，董正蓉，林伯盛，等.扁平苔蘚患者外周血CD4+CD25+Treg細(xì)胞的檢測(cè)[J].中國(guó)麻風(fēng)皮膚病雜志，2011， 27（3）：151-153.

[9] Miossec P，Kolls JK.Targeting IL-17 and TH17 cells in chronic inflammation [J].Nat Rev Drug Discov，2012，11（10）：763-776.

[10] Mitsdoerffer M，Lee Y，J？覿ger A，et al.Proinflammatory T helper type 17 cells are effective B-cell helpers[J].Proc Natl Acad Sci USA，2010，107（32）：14292-14297.

[11] Fukushi S，Yamasaki K，Aiba S.Nuclear localization of activated STAT6 and STAT3 in epidermis of prurigo nodularis[J].Br J Dermatol，2011，165（5）：990-996.

[12] de Boer OJ，van der Loos CM，Teeling P，et al.Immunohistochemical analysis of regulatory T cell markers FOXP3 and GITR on CD4+CD25+T cells in normal skin and inflammatory dermatoses[J].J Histochem Cytochem，2007， 55（9）：891-898

[13] 張玉麗，張春敏.CD4+CD25+Treg細(xì)胞和Th17細(xì)胞與尋常型銀屑病發(fā)病的相關(guān)性[J].中國(guó)麻風(fēng)皮膚病雜志，2011， 27（10）：703-705.

[14] 王娟，白莉，鮑海平，等.扁平苔蘚皮損中腫瘤壞死因子α和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶8、3的表達(dá)[J].中華皮膚科雜志，2012，45（12）：862-864.

（收稿日期：2013-12-10 本文編輯：李亞聰）