韓冰莎 陳佳佳 李天曉 李釗碩 許崗勤

鄭州大學人民醫(yī)院介入科，河南鄭州 450003

MCP-1在腦動脈支架植入術圍術期及隨訪期間的炎癥研究

韓冰莎 陳佳佳 李天曉 李釗碩 許崗勤

鄭州大學人民醫(yī)院介入科，河南鄭州 450003

目的 以腦血管支架植入患者為研究對象，通過ELISA方法探討單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1)在圍術期及隨訪期間的表達，進一步了解MCP-1在支架植入術后的炎癥免疫反應過程。方法 篩選50例該中心給予腦血管支架植入的患者，另有30例同期住院未接受支架術治療的同病患者為對照組。簽署知情同意書后，分別在兩組患者術前、術后7 d和術后6個月，用ELISA檢測其相關炎性細胞因子MCP-1的表達水平。結果 與對照組比較，支架治療患者外周血中MCP-1水平在術前分布接近(P＞0.05)，在術后7 d和術后6個月明顯升高(P＜0.01)。支架治療組患者術后6個月經影像學檢查證實發(fā)生再狹窄患者16例(32%)，其血清MCP-1水平分布在術前和術后7 d與支架術后無再狹窄患者接近(P＞0.05)，但術后 6個月MCP-1水平顯著高于后者(P＜0.01)。結論 血漿MCP-1的表達增高可能參與了腦血管支架植入后引發(fā)的局部和系統(tǒng)的急性炎癥反應，且指標隨訪期間高表達是支架術后再狹窄的危險因素。

支架置入術；炎性反應；圍術期；隨訪；MCP-1

動脈粥樣硬化(Atherosclerosis，AS)與60%～80%的缺血性卒中有關[1]，是卒中的主要原因。支架成形術是顱內動脈粥樣硬化狹窄藥物治療以外的一種重要治療手段，在預防卒中復發(fā)方面發(fā)揮重要作用，目前已經比較廣泛的應用于臨床。研究表明支架植入術后再狹窄的發(fā)生過程中炎癥因素是重要環(huán)節(jié)[2]。單核細胞趨化蛋白-1(Monocyte Chemotactic Pro-tein-1，MCP-1)是通過趨化單核/巨噬細胞遷移至動脈內膜下大量吞噬脂質，促進AS斑塊的形成。那么腦血管支架植入術后的炎癥反應中是否也有MCP-1的參與作用？該研究觀察了2012年1月—2014年1月期間50例腦動脈支架植入術圍術期及隨訪期間外周血中MCP-1的表達水平的變化及其意義，并與30例未接受支架成形術的同類疾病患者比較，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取在該院介入科腦血管病區(qū)行腦動脈支架植入術的患者50例。入選標準：①有短暫性腦缺血發(fā)作或神經功能障礙的缺血性卒中患者；②經CTA、MRA或全腦血管造影術(DSA)證實供應病灶的責任血管狹窄≥70%；③愿意行責任血管支架（單枚）植入術、并鑒定知情同意書。

排除標準：①既往行心腦血管介入治療者；②近期 1個月內患有惡性腫瘤，感染性疾病，自身免疫性疾病者；③支架植入術圍手術期出現并發(fā)癥：如主要分支閉塞、夾層形成、高灌注腦出血、腦水腫、嚴重血管痙攣者。

對照組選擇同期住院具有腦血管狹窄的危險因素患者30例，該組入選對象皆因經濟條件或其他原因放棄行腦動脈支架植入術，簽署同意書并行DSA。對照組符合支架治療組納入標準的①和②及全部排除標準。

兩組患者的平均年齡、性別、疾病分類、伴隨危險因素、術前C-反應蛋白水平、狹窄部位和程度差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，見表1。

表1 支架治療組與對照組臨床資料特征[n(%)]

1.2 支架植入術圍手術期用藥及操作

所有患者術前7 d起開始口服氯毗格雷75 mg/d和阿司匹林100 mg/d；術前2 h起持續(xù)靜脈泵注射尼莫地平；術中給予肝素70～100 U／kg；術后口服阿司匹林0.1 g/d，立普妥20 mg/d，長期維持；玻立維75 mg/d，口服6～9個月。支架置入按常規(guī)方法進行，全部患者行預擴張后置入支架，支架完全覆蓋病變，術后殘余狹窄＜20%。術后6個月復查DSA。

1.3 研究方法

兩組患者均于支架植入和DSA術前、術后7 d及術后6個月采集空腹靜脈血，3 000 r/min離心 10 min，分離血清，-20℃冰箱保存待檢。嚴格按照酶聯(lián)免疫-雙抗體夾心法試劑盒說明書進行操作，應用全自動酶標儀測定測定光密度值，據標準曲線同時成批測定兩組患者血漿MCP-1濃度。酶標儀型號：DENLEY DRAGON Wellscan MK3，產自芬蘭。

1.4 統(tǒng)計方法

采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件對數據進行分析，計量資料采用組間 t檢驗，計數資料采用χ2檢驗。

2 結果

2.1 兩組血清 MCP-1的狀況

支架治療組患者術前MCP-1濃度與對照組接近(P＞0.05)；術后7 d、術后6個月顯著高于術前和對照組同期(P＜0.01)。頸內動脈和椎基底動脈支架治療組之間在各個時間點MCP-1水平分布，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，這兩個亞組術后7 d、術后6個月血清MCP-1水平高于術前和對照組同期(P＜0.05～0.01)。見表2。

表2 支架治療組和對照組MCP-1的血漿濃度

表2 支架治療組和對照組MCP-1的血漿濃度

注:a與術前比較，P＜0.01;b與術前比較，P＜0.05;c與對照組同期比較, P＜0.01。

組別MCP-1蛋白（pg/mL）術前 術后7 d 術后6個月支架治療組(n=50)頸內動脈支架組(n=29)椎基底動脈支架組(n=21)對照組(n=30) 55.42±11.84 55.9±12.71 54.75±10.77 57.48±12.26 (132.79±23.86)ac(129.75±24.15)ac(136.99±23.37)bc55.87±10.82 (123.15±22.21)ac(116.12±20.49)bc(132.87±21.21)bc54.34±9.86

2.2 支架術后有無再狹窄患者圍術期、隨訪期間血清MCP-1水平比較

支架內再狹窄的判斷標準為直徑減少50%，術后6個月經影像學檢查證實16例發(fā)生再狹窄(32%)。支架內再狹窄組與無支架內再狹窄組術前（P=0.661）、術后7 d（P=0.379）MCP-1水平相比差異無統(tǒng)計學意義，支架內再狹窄組較無支架內再狹窄組術后6個月（P=0.005）MCP-1水平明顯增高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表3。

表3 支架術后有無再狹窄患者圍術期、隨訪期間血清MCP-1水平比較

表3 支架術后有無再狹窄患者圍術期、隨訪期間血清MCP-1水平比較

注:a與對照組同期比較，P＜0.01。

組別MCP-1蛋白（pg/mL）術前 術后7 d 術后6個月支架術后再狹窄組(n=16)支架術后無狹窄組(n=34) 54.05±13.15 56.06±11.32 138.05±28.1 130.32±21.61 (130.2±30.14)a119.84±16.86

3 討論

關于缺血性卒中的主要原因，歐美人群以顱外動脈粥樣硬化引起的血管狹窄為主，而在亞洲人群中30%的缺血性卒中由顱內動脈粥樣硬化引起[3]。研究表明支架植入后，炎性細胞浸潤和血小板聚集的共同作用會釋放出各種由化學趨化因子和白細胞介素所介導的細胞因子、生長因子激活血管中層平滑肌細胞[4]，使平滑肌細胞遷移增生，分泌大量細胞外基質，最終導致血管內膜的增厚和血管的重塑。支架作為外來物體以及后期支架釋放產生的機械張力對血管壁持續(xù)性的損傷必將引起機體產生免疫應答[5]。結合病變血管狹窄程度，殘余狹窄率以及斑塊性質等因素，在手術過程中選擇性地進行球囊擴張或者使用保護傘等操作，均會不同程度的使斑塊破裂，使血管壁處于一個持續(xù)受壓的狀態(tài)，細胞-配體間的黏附反應被啟動，從而激發(fā)一系列的局部炎癥反應。

MCP-1是一種分泌性蛋白質，調控成纖維細胞，參與血管再生等過程，在AS中具有促炎作用，并通過誘導MMP家族的表達，參與斑塊破裂的過程[6]。該研究中，支架治療組患者外周血中術前MCP-1水平分布與對照組接近，在術后7 d、術后6個月濃度高于術前和對照組同期患者，差異有統(tǒng)計學意義。我們考慮MCP-1可能參與了支架植入術后動脈的亞急性和慢性炎癥、結構重建和纖維化等過程。機理主要包括以下 3個方面：①誘導多種前炎癥因子的釋放，介導炎癥細胞在支架損傷內皮局部浸潤，在清除病原體的同時也引起組織損傷；②參與中性粒細胞的增殖和趨化過程，同時募集單核細胞和巨噬細胞至炎癥反應處；③同TNF-α、IL-1β和 IFN-γ等其他炎癥細胞因子產生相互協(xié)同效應，加強和放大炎癥反應。我們的研究顯示外周血中MCP-1細胞水平在支架植入術后6個月較支架植入急性期術后7 d降低，這可能是因為腦動脈支架術后6個月時以自然殺傷細胞、輔助性T細胞和抗原提呈現細胞的損害為主[7]，炎癥反應減輕，體內免疫系統(tǒng)受到一定程度抑制[8]。

支架內再狹窄（In-stent restenosis,ISR）是支架術后卒中復發(fā)的重要原因也是評價支架成形術遠期效果的重要指標[9]。其病理機制為內膜增生、血栓形成、負性重構[10]以及炎性遞質和抗炎遞質間的失衡。我們的結果顯示，支架內再狹窄組較無支架內再狹窄組術后6個月 MCP-1水平明顯增高，差別有統(tǒng)計學意義。MCP-1參與支架再狹窄過程的分子和細胞機制可能存在以下環(huán)節(jié)：支架置入可引發(fā)內皮剝脫、斑塊破裂，表達P-選擇素等粘附分子，通過巨噬細胞表面抗原1等整聯(lián)蛋白家族的作用?？墒寡芷交〖毎蚋叻置谛院驮鲋承缘谋硇娃D化，并向內膜遷移，動脈就進入了重構階段，包括胞外基質蛋白降解和重新合成，加速管腔狹窄[11]。

該研究還存在隨訪時間較短、患者更多的臨床預后信息不完善、沒有對支架植入處局部血管壁組織進行分析研究等不足之處，今后將進一步進行追蹤研究。綜上，該組研究提示MCP-1參與了腦動脈支架成形術后各個時期的炎癥反應，其在支架術后持續(xù)高濃度的表達導致了再狹窄事件增加。從而為今后腦血管支架植入后的早期干預措施提供新的思路，將對于預防和治療支架內再狹窄具有重要意義。

[1]Panorchan P,Thompson MS,Davis KJ,et al.Single molecule analysis of cadherin mediated celladhesion[J].J Cell Sci,2006,119(1):66-74.

[2]Kraiss LW,Geary RL,Mattsson EJ,et al.Acute reductions in blood flow and shear stress induce platelet derived growth factor A expression in baboon prosthetic grafts[J].Circulation research,1996,79:45-53.

[3]Wong KS.Use of transcranial Doppler ultrasound to predict outcome in patients with intracranial large artery occlusive disease[J].Stroke,2000, 31:2641-2647.

[4]Landzberg BR，Frishman W H，Lerfick K．Pathophysiology and pharmacologicala approaches for prevrntion of coronary artery restenosis following coronary balloon angioplasty and related procedures[J]．Progress Cardi0vascular Disease，1997，9：361．

[5]Maulik N,Das DK.Redox signaling in vascular angiogenesis[J].Free radical biology&medicine,2002,33:1047-1060.

[6]Dag mar H,Artiom P,Nezam H,et al.Radiolabeled monocyte chemotactic protein-1 for the detection of inflammation in experi-mental atherosclerosis[J]．J NuclMed，2007，48(11):181-182.

[7]Meisel C,Meisel A.Suppressing immunosuppression after stroke[J]．The New England journal of medicine，2011，365:2134-2136.

[8]Galkina E,Ley K.Immune and inflammatory mechanisms of atherosclerosis[J]．Annual review of immunology，2009，27:165-197.

[9]Levy EI,Turk AS,Albuquerque FC,et al.Wingspan in-stent restenosis and thrombosis：incidence，clinicalpresentation，and management[J]．Neurosurgery，2007，61:644-650.

[10]Turk AS,Levy EI,Albuquerque FC,et al.Influence of patient age and stenosis location on wingspan in·stent restenosis[J]．AJNR AmJ Neuroradiol，2008,29:23-27.

[11]Malek AM,Gibbons GH,Dzau VJ,et al.Fluid shear stress differentially modulates expression of genes encoding basic fibroblast growth factor and Platelet derived growth factor B chain in vascular endothelium[J]．The Journal of clinical investigation,1993,92:2013-2021.

The Inflammatory Response of MCP-1 in Patients with Cerebral Stent Implantation During Perioperative and Follow-up Periods

HAN Bingsha CHEN Jiajia LI Tianxiao LI Zhaoshuo XU Gangqin
Invasive Technology Department,Zhengzhou University People's Hospital,Zhengzhou,Henan Province,450003,China

Objective To explore the expression of monocyte chemoattractant protein-1(MCP-1)in patients with cerebral stent implantation during perioperative and follow-up periods by ELISA so as to further investigate the inflammation immune response process of MCP-1 after stent implantation.Methods 50 cases underwent cerebral stent implantation in our center were enrolled as the investigating subjects,another 30 subjects had the same disease hospitalized during the same period without accepting stenting were considered as the control group.And the informed consent was signed in both groups.Then,the expression levels of inflammatory cytokine MCP-1 were measured by ELISA before operation,7 days and 6 months after operation in the two groups.Results The contents of MCP-1 in peripheral blood of the stent group were similar to the control group before angiography or catheterization(P＞0.05),but significantly higher than those of the control group 7 days and 6 months after stent insertion(P＜0.01).Among 50 patients of the stent group,16 cases had restenosis 6 months after operation confirmed by imaging examination(32%),the contents of serum MCP-1 of the patients were similar to those without restenosis in stages before angiography or catheterization and 7 days after stent insertion (P＞0.05),but significantly higher than that of the cases without restenosis 6 months after stent insertion(P＜0.01).Conclusion The increase of the expression of MCP-1 in plasma may involve in the local and systematic acute inflammatory reaction due to cerebral stent implantation,and the high expression level of MCP-1 in the follow-up period is the risk factor of poststent restenosis.

Endovascular stent;Inflammatory reaction;Perioperative period;Follow-up;MCP-1

R687.3；R687.4

A

1674-0742（2014）11（a）－0001-03

2014-08-02)

韓冰莎（1982-），女，河南平頂山人，碩士，主治醫(yī)師，研究方向：神經病學神經介入。

李天曉（1962.7-），男，河南郟縣人，博士，主任醫(yī)師，研究方向：神經介入。