韓金潭, 劉群, 王賽, 康蓮蓮, 楊榮

（西南民族大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院, 四川 成都 610041）

藏藥綠蘿花對正常小鼠糖耐量影響的試驗研究

韓金潭, 劉群, 王賽, 康蓮蓮, 楊榮

（西南民族大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院, 四川 成都 610041）

探討藏藥綠蘿花的降血糖作用, 為臨床合理用藥和進(jìn)一步開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù). 以L9(34)正交設(shè)計試驗獲得綠蘿花水萃取干膏制劑為研究材料, 將實驗動物分為空白組、高、中、低劑量綠蘿花組和陽性藥物組, 以尾靜脈血糖值、糖耐量曲線下面積為檢測指標(biāo), 研究不同劑量綠蘿花對正常小鼠糖耐量影響. 實驗結(jié)果: 灌胃后30min, 高劑量綠蘿花血糖值(11.72 mmol/L)與中劑量綠蘿花組血糖值(11.41mmol/L)顯著低于空白組(P<0.05); 三個劑量綠蘿花組的糖耐量曲線下面積無顯著差異(P>0.05), 但都均低于空白對照組的糖耐量曲線下面積, 尤以中、高劑量綠蘿花和鹽酸二甲雙胍片效果較明顯. 研究結(jié)果表明: 綠蘿花在連續(xù)服用5d后具有抑制機(jī)體對葡萄糖吸收的能力、增強(qiáng)機(jī)體對糖耐受的能力.

藏藥綠蘿花; 血糖含量; 糖耐量曲線下面積

藏藥綠蘿花[Scindapsus aureus(Linden ex Andre) Engl]產(chǎn)于西藏寒冷地帶及喜馬拉雅山脈區(qū)域, 為天南星科喜林芋屬植物綠蘿花的干燥花蕾[1]. 《藏醫(yī)養(yǎng)身圖說》記載, 藏藥綠蘿花主治冠心病、糖尿病、高血壓、血管炎、高血脂、脈管炎等[2]. 西藏民間常將綠蘿花晾干泡水飲用,作為預(yù)防和治療高血脂、糖尿病等慢性疾病. 本研究采用水萃取法制備綠蘿花干膏制劑, 將實驗動物分為空白組和不同劑量的綠蘿花組, 采用尾靜脈血糖值、糖耐量曲線下面積作為檢測指標(biāo), 研究不同劑量的綠蘿花對正常小鼠糖耐量的影響, 旨在為藏藥綠蘿花的降血糖作用與臨床合理用藥提供科學(xué)依據(jù), 現(xiàn)將研究結(jié)果報告如下.

1 材料

1.1 實驗動物

4周齡ICR雄性小鼠, 50只, 18～22g(由成都達(dá)碩有限公司提供, 批號: 0011221).

1.2 受試藥物藏藥綠蘿花由成都國際商貿(mào)城荷花池中藥材專業(yè)市場提供. 由四川省獸藥監(jiān)察所鑒定. 室溫密封干燥保存.

1.3 主要試劑和儀器

鹽酸二甲雙胍片(哈爾濱同仁堂藥業(yè)有限公司, 批號: 2013010431); 血糖儀(羅康全活力型血糖儀, 批號: 0508852001); 血糖試紙(羅康全活力型血糖試紙, 批號: 23464623); PH檢測儀(METTLER TOLEDO, 批號: 20050281)等.

2 方法

2.1 綠蘿花口服液的制備

以L9(34)正交設(shè)計試驗獲得綠蘿花水萃取干膏制劑(浸泡0.5h、20倍加水量、煎煮4次、煎煮時間1h), 所得干膏率為24.5%, 4℃冰箱保存. 將干膏換算成生藥含量并配制成50%、100%、200%濃度的口服液, 4℃冰箱保存?zhèn)溆?

2.2 動物分組及處理

ICR雄性小鼠50只, 適應(yīng)性喂養(yǎng)7天. 隨機(jī)分為5組, 每組10只. 各組處理如下:

空白組: 常規(guī)飼養(yǎng), 正常飲水, 灌服25%的葡萄糖水0.5 ml/d/只, 連續(xù)5d;

高劑量組: 常規(guī)飼養(yǎng), 正常飲水, 灌胃200%濃度的綠蘿花口服液0.5 ml/d/只(口服液中加入25%的葡萄糖),連續(xù)5d;

中劑量組: 常規(guī)飼養(yǎng), 正常飲水, 灌胃100%濃度的綠蘿花口服液0.5 ml/d/只(口服液中加入25%的葡萄糖),連續(xù)5d;

低劑量組: 常規(guī)飼養(yǎng), 正常飲水, 灌胃50%濃度的綠蘿花口服液0.5ml/d/只(口服液中加入25%的葡萄糖),連續(xù)5d;

陽性藥物組: 常規(guī)飼養(yǎng), 正常飲水, 每天灌服二甲雙胍片溶液(250 mg/kg, 口服液中加入25%的葡萄糖), 連續(xù)5d.

2.3 檢測指標(biāo)

各組實驗動物在第5次灌胃前禁食6h(正常飲水), 第5次灌胃前測得的各組實驗動物的血糖值作為零基準(zhǔn)血糖值, 第5次灌胃后15min、30 min、60 min、120 min血糖儀測尾靜脈血糖含量, 計算糖耐量曲線下面積.

糖耐量曲線下面積計算公式[3]:

0-120min曲線下面積(AUC)(mmol/L·h)=[(BG0+BG15)×0.25/2]+[(BG15+BG30) ×0.25/2]+[(BG30+BG60) ×0.5/2]+[(BG60+BG120) ×1/2](BG分別代表糖負(fù)荷后各時間點(diǎn)的血糖值)

2.4 實驗數(shù)據(jù)處理

3 結(jié)果與分析

3.1 小鼠血糖含量

各組小鼠血糖值的變化見表1、表2, 圖1、圖2.

表1 各組血糖值組內(nèi)變化(mmol/L,n=10)Tab.1 The change value of the blood glucose level intra-group at each time(mmol/L,n=10)

表2 各組血糖值組間變化(mmol/L ,n=10)Tab.2 The change value of the blood glucose level inter-group at each time(mmol/L ,n=10)

圖1 血糖值組內(nèi)比較折線圖Fig.1 The line chart of the blood glucose level intra-group at each time

圖2 血糖值組間比較柱狀圖Fig.2 The histogram of the blood glucose level inter-group at each time

表1表明: 空白組糖耐量實驗在第5次灌胃后15、30、60、120min的血糖值極顯著高于0基準(zhǔn)血糖值(P<0.01), 60min血糖值顯著性高于120min的血糖值(0.01

表2表明: 0時間點(diǎn)各組實驗動物的血糖含量無顯著性差異(P>0.05); 灌胃后15min, 空白組的血糖值極顯著高于高、中、低劑量綠蘿花組和陽性藥物組的血糖值(P<0.01); 灌胃后30min, 高、中劑量綠蘿花組血糖值顯著低于空白組的血糖值(P<0.05), 陽性藥物組的血糖值達(dá)到極顯著差異(P<0.01); 灌胃后60min, 低劑量綠蘿花組的血糖值顯著性低于空白組的血糖值(P<0.05), 陽性藥物組的血糖值極顯著低于空白組、高、中、低劑量綠蘿花組的血糖值(P<0.01); 灌胃后120min, 空白組、高、中、低劑量綠蘿花組之間的血糖值無顯著性差異(P>0.05), 陽性藥物組的血糖值極顯著低于空白組、高、中、低劑量綠蘿花組的血糖值(P<0.01). 結(jié)合圖2, 實驗結(jié)果表明: 糖耐量實驗期間, 三個劑量的綠蘿花在連續(xù)給藥5d后的各時間點(diǎn)小鼠血糖含量均低于空白對照組, 說明不同劑量的藥物對糖的吸收產(chǎn)生不同的影響, 其中高、中劑量綠蘿花組作用優(yōu)于低劑量綠蘿花組, 陽性藥物組作用尤為明顯.

3.2 糖耐量曲線下面積

各組小鼠糖耐量曲線下面積統(tǒng)計結(jié)果見表3, 圖3.

表3 每組實驗動物糖耐量曲線下面積值的比較(mmol/L·h, ,n=10)Tab.3 The comparison of SBG in each group(mmol/L·h, ,n=10)

圖3 各組實驗動物糖耐量曲線面積值比較柱狀圖Fig.3 The histogram of the SBG‵s comparison in each group

表3表明: 中、低劑量綠蘿花組的糖耐量曲線下面積顯著性低于空白組的糖耐量曲線下面積(P<0.05),陽性藥物組的糖耐量曲線下面積極顯著低于空白組(P<0.01). 三個劑量綠蘿花組的糖耐量曲線下面積無顯著差異(P>0.05). 結(jié)合圖3, 實驗結(jié)果表明: 高、中、低劑量綠蘿花組、陽性藥物組的糖耐量曲線下面積值均小于空白對照組的糖耐量曲線下面積, 其中陽性藥物組的糖耐量曲線下面積最小, 說明三個劑量綠蘿花和陽性藥物鹽酸二甲雙胍片有抑制機(jī)體吸收葡萄糖的作用, 其中以中、高劑量綠蘿花和鹽酸二甲雙胍片效果較明顯.

4 討論與結(jié)論

糖尿病是一種由多種原因引起的臨床綜合癥, 在中醫(yī)上屬于“消渴癥”的范疇, 以多飲、多食、多尿、乏力、消瘦, 尿糖含量超標(biāo)等為主要臨床表現(xiàn). 目前臨床常用的降血糖的藥物大多作用單一靶點(diǎn). 因此尋找新型、有效、不良反應(yīng)少的降血糖藥物就顯得十分重要. 我國應(yīng)用中藥以及民族藥的歷史十分悠久, 積累了大量臨床應(yīng)用經(jīng)驗及有效藥物. 目前有關(guān)藏藥綠蘿花的研究報道較少, 僅限于其化學(xué)成分如揮發(fā)油、黃酮、還原糖的提取分離及其抗氧化、降血糖等藥理作用研究[1,3～7]. 糖耐量降低是Ⅱ型糖尿病發(fā)展的一個中間階段, 因此使糖耐量得到一定程度恢復(fù)是治療糖尿病的一個重要手段, 也是評價治療糖尿病的藥物其療效的一個重要方面; 葡萄糖耐量試驗(GTT)是正常情況下,在一次性攝入大量葡萄糖后,通過體內(nèi)的各種調(diào)節(jié)機(jī)制的調(diào)節(jié),血糖濃度暫時升高,2h后恢復(fù)到正常水平,這種現(xiàn)象稱為耐糖現(xiàn)象; 機(jī)體的糖耐量降低時,血糖水平難以保持這一狀態(tài), 此時血糖曲線表現(xiàn)為先上升后緩慢下降,在2h后仍保持在較高的水平; 通過糖耐量實驗,可以了解個體對葡萄糖的負(fù)荷能力; 糖耐量試驗是選糖負(fù)荷后30、60、120min 各時相分別測BG水平. 如果2h后BG仍高于空腹水平,認(rèn)為糖耐量異常[8～10],.

本研究實驗結(jié)果表明: 實驗小鼠的尾靜脈血糖測定結(jié)果表明空白組灌胃后15min左右血糖值達(dá)到峰值, 高劑量組和中劑量綠蘿花組灌胃后60min左右血糖值達(dá)到峰值, 低劑量組和陽性組在灌胃后30min左右血糖值達(dá)到峰值; 三個劑量的綠蘿花組在連續(xù)服用5d后的各時間點(diǎn)小鼠血糖含量均低于空白對照組; 三個劑量的綠蘿花組和陽性藥物組的糖耐量曲線下面積值均小于空白對照組的糖耐量曲線下面積, 其中陽性藥物組的糖耐量曲線下面積最小. 綜合以上分析表明: 綠蘿花在連續(xù)服用5d后具有增強(qiáng)機(jī)體對糖耐受的能力、抑制機(jī)體對葡萄糖吸收的能力, 尤以高、中劑量綠蘿花和陽性藥物鹽酸二甲雙胍片效果較明顯. 綠蘿花為西藏民間常用的藥物, 常用于預(yù)防和治療糖尿病、高血脂等慢性疾病, 其天然特殊的地理環(huán)境生長的藥物, 在糖尿病的防治方面具有進(jìn)一步開發(fā)利用的前景.

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The experimental study of the effect of Scindapsus aureus on the glucose tolerance of normal rats

HAN Jin-tan, LIU Qun, WANG Sai, KANG Lian-lian, YANG Rong
(School of Life Science and Technology, Southwest University for Nationalities, Chengdu 610041, P.R.C.)

This paper discusses the action of Scindapsus aureus in declining the blood sugar(BS), provides scientific basis for using drugs reasonably and exploiting further. The dry paste of Scindapsus aureus was obtained for research materials by L9(34) orthogonal test of water extraction technology. Experimental animals were divided into blank group, high, middle and low dose of Scindapsus aureus groups and positive drug group to study the effects of Scindapsus aureus on the glucose tolerance of normal rats with the test indexes of caudal vein blood sugar and SBG. The results showed that the BS(11.72 mmol/L) of the high dose of Scindapsus aureus group and the BS(11.41mmol/L) of the middle dose of Scindapsus aureus group were significantly lower than the blank group (P < 0.05) after 30 minutes of oral gavage; the SBG of the three doses of Scindapsus aureus groups were of no significant difference (P > 0.05), but were all lower than the SBG of the blank group, and the effects were obvious especially in the middle and high dose of Scindapsus aureus groups and metformin hydrochloride tablets group. The research results showed that Scindapsus aureus can inhibit the body’s ability to absorb glucose and ameliorate glucose tolerance after taking it 5 days continuously.

Scindapsus aureus; blood glucose content; SBG

R285,R29

A

1003-4271(2014)04-0518-05

10.3969/j.issn.1003-4271.2014.04.09

2014-04-22

劉群(1965-), 男, 漢族, 四川資中人, 博士, 副教授；E-mail：liuqun2567@163.com.

國家“十二五”科技支撐計劃項目(2011BAD34B02-4); 中央高校基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)科研建設(shè)平臺(11NPT03).