張建磊李郭飛常娜王朝輝劉大建賀維亞

血清同型半胱氨酸、葉酸、維生素B12濃度與多發(fā)性硬化的關系研究*

張建磊①李郭飛①常娜①王朝輝①劉大建①賀維亞①

目的：探討血清同型半胱氨酸水平（Hcy）與多發(fā)性硬化（MS）的關系。方法：檢測41例MS患者（MS組）和42例正常對照者（NC組）血清中Hcy濃度、葉酸及維生素B12濃度，并將結果進行比較分析。結果：MS組和NC組血清中Hcy濃度分別為（25.82±1.724）μmol/L、（13.60±1.517）μmol/L。MS組的Hcy濃度明顯高于NC組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01），而兩組的葉酸、維生素B12濃度比較差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。結論：MS患者血清Hcy水平升高，同型半胱氨酸可能在多發(fā)性硬化病理過程中起作用。

多發(fā)性硬化； 同型半胱氨酸； 葉酸； 維生素B12

First-author’s address：Huaihe Hospital of Henan University，Kaifeng 475000，China doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2014.18.018

多發(fā)性硬化（multiple sclerosis，MS）是一種病理特點為中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎性脫髓鞘的自身免疫性疾病，該病的發(fā)病機制同病原體感染、自身免疫反應、遺傳因素和外部環(huán)境作用等因素有關。同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）是一種氨基酸，具有神經(jīng)毒性，維生素B12、葉酸能促進Hcy的代謝。如果飲食中葉酸、維生素B12攝入不足、甲基化障礙，則Hcy無法代謝生成蛋氨酸，就有可能導致Hcy在血清中蓄積。已有研究資料顯示，多種神經(jīng)系統(tǒng)疾病和血清同型半胱氨酸的升高有關，如腦血管病、阿爾茨海默病、帕金森病等[1-5]。腦白質病變與Hcy的關系亦有研究證實[6]。目前有的研究表明，高Hcy血癥與MS具有相關性，但也有一些研究得出不同結論[7]。本研究擬通過比較MS患者與正常對照組的血清Hcy與維生素B12、葉酸的濃度，進一步探討其內在聯(lián)系，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2011年1月-2013年12月在本院神經(jīng)內科住院的41例MS患者作為多發(fā)性硬化組（MS組），其中男14例，女27例，所有患者均符合McDonald的多發(fā)性硬化診斷標準[4]：（1）≥2次發(fā)作+≥2個病灶。（2）≥2次發(fā)作+1處病灶+a、b、c附加之一（a、MRI證實空間病灶的彌散性；b、有與MS一致的2個或2 個以上的病灶，加上腦脊液的陽性證據(jù)；c、等待提示另一病變的又一次臨床發(fā)作）。（3）1次發(fā)作+≥2個病灶+a、b附加之一（a、MRI證實時間的彌散性；b、有第2次臨床發(fā)作）。（4）1次發(fā)作+1個病灶+a、b、c附加之一（a、MRI上病灶空間的彌散性；b、≥2個與MS一致的MRI病灶+腦脊液陽性證據(jù)+MRI時間上的彌散性；c、有第2次臨床發(fā)作）。入選的MS患者在3個月內未曾服用維生素B12以及葉酸，平均年齡（36.47±8.60）歲，病程3.5～74個月，平均（27.5±12.55）個月。另外選取42例健康志愿者作為正常對照組（NC組），其中男16例，女26例，無吸煙、酗酒等不良嗜好，平均年齡（37.82±10.31）歲。兩組研究對象的年齡、性別等一般資料比較差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 研究方法 被檢者早晨空腹抽取靜脈血3～5 mL，離心分離血清，-20 ℃冰箱保存待測。檢測Hcy的儀器為奧林巴斯AU2700全自動生化分析儀，采用循環(huán)酶法檢測血清Hcy濃度，檢測試劑由四川邁克生物科技股份有限公司提供；血清葉酸、維生素B12的檢測運用Beckman Coulter公司的ACESS2化學發(fā)光分析儀，采用化學發(fā)光免疫分析法檢測血清葉酸、維生素B12的濃度，檢測試劑由貝克曼庫爾特有限公司提供。

1.3 統(tǒng)計學處理 采用SPSS 13.0軟件對所得數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，計量資料用（±s）表示，比較采用t檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

MS組和NC組血清中Hcy濃度分別為（25.82±1.724）μmol/L、（13.60±1.517）μmol/L。MS組的Hcy濃度明顯高于NC組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01），而兩組的葉酸、維生素B12濃度比較差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見表1。

表1 兩組血清中Hcy、葉酸和維生素B12濃度的比較（±s）

表1 兩組血清中Hcy、葉酸和維生素B12濃度的比較（±s）

維生素B12（pg/mL）MS組（n=41） 25.82±1.724 6.329±1.224 352.6±26.4 NC組（n=42） 13.60±1.517 6.452±1.325 359.7±24.8 P值 ＜0.01 ＞0.05 ＞0.05組別 Hcy濃度（μmol/L）葉酸（ng/mL）

3 討論

多發(fā)性硬化（MS）是導致青壯年神經(jīng)功能障礙的常見病因之一。1868年法國神經(jīng)病學家Charcot首先提出，病程中神經(jīng)系統(tǒng)功能障礙間斷發(fā)展并伴有腦和脊髓白質血管周圍炎癥細胞浸潤。然而其病因和發(fā)病機制至今尚未完全清楚，多數(shù)學者認為，MS是由細胞和體液免疫共同參與導致的腦和脊髓白質損傷。Khan 等[6]研究發(fā)現(xiàn)，腦白質病變組血漿Hcy水平較無腦白質病變組的血漿Hcy水平明顯升高，并且腦白質病變的嚴重程度與血漿Hcy水平呈正相關。由于代謝過程中血漿Hcy的巰基可以發(fā)生氧化還原反應，產(chǎn)生自由基損傷血管內皮細胞；Hcy還可以使S腺苷聚集在細胞內，造成血管內皮細胞凋亡異常，導致血管內皮功能障礙；血管內皮功能障礙將使一氧化氮分泌減少，血管舒張調節(jié)能力降低，腦血管灌注下降，造成腦缺血、腦白質損傷。因此有學者認為，血漿Hcy是腦白質病變的一個獨立的危險因素，并且與病變損傷程度密切相關。

國外對多發(fā)性硬化與同型半胱氨酸的關系進行研究，結果差異較大。Ramsaransing等[8]和Vrethem等[9]發(fā)現(xiàn)MS患者的血清Hcy平均濃度較正常人升高，而Rio等[10]則報道，血清Hcy水平在MS患者和健康人

群中無明顯差異。對于造成差異的原因，目前尚無權威解釋。本研究的結果表明，MS患者血清Hcy平均濃度明顯高于正常人，由此認為Hcy可能在MS的病理發(fā)展過程起是一定作用的。研究證實，高Hcy血癥與腦梗死的發(fā)病密切相關[1，4-5]。但Hcy在MS和Hcy在腦梗死病理過程中的作用是否相似？筆者對葉酸、維生素B12進行了測定，結果表明，這兩者在MS患者血清中的濃度和正常對照組的差異均無統(tǒng)計學意義，這與Ramsaransing等[8]的研究結果是一致的。葉酸、維生素B12主要是在Hcy的再甲基化代謝過程中發(fā)揮作用，因此在心腦血管疾病、糖尿病等患者血清中有高濃度的Hcy以及相應低濃度的葉酸、維生素B[11]。

12而Hcy在MS患者血清中的升高機制可能不同于其在心腦血管疾病中。Hcy在MS病程中的可能作用有：（1）Hcy抑制甲基化過程，甲基化過程在控制DNA甲基化以及神經(jīng)遞質、膜磷脂、髓鞘的合成和分解中起重要作用，通過甲基化作用形成的髓鞘堿性蛋白是維護髓鞘和髓鞘再生的重要物質，Hcy可通過抑制此過程造成損傷[12-13]；（2）Hcy通過結合NMDA受體，間接增加鈣離子內流，發(fā)揮其興奮性神經(jīng)毒性，損傷神經(jīng)元DNA，誘導細胞凋亡，而中樞神經(jīng)系統(tǒng)對細胞外Hcy很敏感，所以輕度的血清Hcy濃度升高就可能導致中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷[14-15]；（3）Hcy能減少載脂蛋白A-I的產(chǎn)生，載脂蛋白A-I可以干擾巨噬細胞和淋巴細胞的相互作用或抑制白細胞介素-lβ發(fā)揮抗炎特性，它的生成減少會促進中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥的發(fā)展[16]；（4）Hcy通過核因子-kβ途徑產(chǎn)生大量細胞因子、促進巨噬細胞活化[15，17-18]；（5）Hcy通過誘導激活細胞外信號調節(jié)激酶直接損害中樞神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)元[14-15，18]。

綜上所述，本研究提示，多發(fā)性硬化與高同型半胱氨酸血癥存在相關性，但與血清中葉酸、維生素B12無明顯相關性，鑒于目前同型半胱氨酸在MS發(fā)病過程中所起機制不明，降低血清同型半胱氨酸水平是否對MS有防治作用目前不明確，需進一步臨床和基礎實驗研究。

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Study on Relationship between Homocysteine，F(xiàn)olic Acid ，Vitamin B12and Multiple Sclerosis

/ZHANG J ian-lei，LI Guo-fei，CHANG Na，et al.//Medical Innovation of China，2014，11（18）：054-056

Objective：To investigate the relationship between the serum level of homocysteine（Hcy） and multiple sclerosis（MS）.Method：The concentration of Hcy，folic acid and vitamin B12in serum in 41 MS patients（MS group） and 42 normal controls（NC group） were detected，and the results were compared and analyzed.Result：The mean concentrations of Hcy in MS group and NC group were （25.82±1.724）μmol/L，（13.60±1.517）μmol/L respectively. The mean concentration of Hcy in the MS group was significantly higher than the NC group，the difference was statistically significant（P＜0.01），while there were no statistically significant differences in folic acid and vitamin B12between the two groups （P＞0.05）.Conclusion：The level of Hcy is higher in MS patients，homocysteine may play a role in the pathological process of multiple sclerosis.

Multiple sclerosis； Homocysteine； Folic acid； Vitamin B12

2014-03-21） （本文編輯：歐麗）

河南省科技廳基礎與前沿技術研究項目（132300410383）

①河南大學淮河醫(yī)院 河南 開封 475000

張建磊