顧曉東，常金花，劉 沛，劉翠哲

(河北省中藥研究與開發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，承德醫(yī)學(xué)院中藥研究所，河北承德 067000)

對乙酰氨基酚琥珀酸酯在家兔體內(nèi)的藥代動力學(xué)研究

顧曉東，常金花，劉 沛，劉翠哲△

(河北省中藥研究與開發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，承德醫(yī)學(xué)院中藥研究所，河北承德 067000)

目的:研究肌肉注射對乙酰氨基酚琥珀酸酯在健康家兔體內(nèi)的藥代動力學(xué)。方法:采用RP-HPLC法測定6只成年健康家兔肌肉注射對乙酰氨基酚琥珀酸酯后不同時間點(diǎn)血漿中對乙酰氨基酚的濃度，應(yīng)用DAS 2.0藥動學(xué)軟件處理血藥濃度數(shù)據(jù)，擬合對乙酰氨基酚琥珀酸酯在家兔體內(nèi)吸收模型，繪制藥時曲線，計(jì)算藥代動力學(xué)參數(shù)。結(jié)果:對乙酰氨基酚琥珀酸酯在家兔體內(nèi)代謝符合一級吸收二室模型(權(quán)重系數(shù)=1/ C2)，主要藥動學(xué)參數(shù):Tmax=0.25h、Cmax=95.44mg/L、t1/2(α)=0.73h、t1/2(β)=2.70h、AUC=82.44mg/L*h、Vd=45.65L/kg。結(jié)論:與肌肉注射對乙酰氨基酚相比，家兔肌肉注射乙酰氨基酚琥珀酸酯的Tmax、t1/2(β)均縮短，表明乙酰氨基酚琥珀酸酯在體內(nèi)起效迅速且消除較快。

對乙酰氨基酚琥珀酸酯;藥代動力學(xué);高效液相色譜法

對乙酰氨基酚為乙酰苯胺類解熱鎮(zhèn)痛藥，通過抑制下丘腦體溫調(diào)節(jié)中樞前列腺素合成酶減少前列腺素PEG1的合成和釋放，導(dǎo)致外周血管擴(kuò)張、出汗而發(fā)揮解熱作用，是全世界應(yīng)用最廣泛的解熱鎮(zhèn)痛類藥物[1-2]。對乙酰氨基酚易溶于有機(jī)溶劑、微溶于水，臨床上對乙酰氨基酚注射劑常用乙醇、丙二醇等有機(jī)溶劑做溶媒，但有機(jī)溶劑刺激性大且不利于吸收[3-4]。本課題組的前期研究利用對乙酰氨基酚與琥珀酸酐反應(yīng)，合成前藥對乙酰氨基酚琥珀酸酯，在對乙酰氨基酚的分子結(jié)構(gòu)中引入一個羧基，使之能夠與碳酸氫鈉形成鈉鹽，從而具有良好的水溶性。本研究觀察了該前體藥物在家兔體內(nèi)的藥代動力學(xué)，以評價它的體內(nèi)代謝行為。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 儀器設(shè)備 島津SHIMADZU LC-2010C HT(CLASSVP 6.13multi)高效液相色譜系統(tǒng)(島津國際貿(mào)易上海有限公司);800B離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠);GT16-3型高速臺式離心機(jī)(北京時代北利離心機(jī)有限公司);旋渦混合器(ZH-2，天津藥典標(biāo)準(zhǔn)儀器廠);氮吹儀(北京同泰聯(lián)科技發(fā)展有限公司);恒溫水浴鍋(上海愛朗儀器有限公司)。

1.2 試劑與藥品 甲醇(色譜純，天津協(xié)和昊鵬色譜科技有限公司);冰醋酸(天津科密歐化學(xué)試劑廠);三蒸水(實(shí)驗(yàn)室自制);肝素鈉(河北賽瑞科技有限公司);對乙酰氨基酚對照品(0716-200112，中國藥品生物制品檢定所);對乙酰氨基酚琥珀酸酯(實(shí)驗(yàn)室自制);碳酸氫鈉(河北賽瑞科技有限公司)。

1.3 實(shí)驗(yàn)動物 2.2-2.5kg健康家兔6只，雌雄各半，購于河北省藥品檢驗(yàn)所動物房，合格證號2229601123。

2 方法與結(jié)果

2.1 血漿中對乙酰氨基酚含量測定方法

2.1.1 色譜條件[5]:色譜柱:Kromasil C18柱(4.6mm×150 mm，5μm);柱溫:20℃;流動相:甲醇-1%冰醋酸=12:88(v/v);檢測波長:244nm;流速:1.0ml/min;進(jìn)樣量:20μl。

2.1.2 血樣處理:采集的血樣置于肝素化離心管中，5000r/min離心10min，精密吸取上清液1ml于試管中，精密加入甲醇2ml，渦旋混合1min，置高速離心機(jī)中，5000r/ min離心10min，精密吸取上清液1ml，50℃水浴，氮?dú)饬鞔蹈?，殘留物精密加入甲?.5ml，渦旋混合1min，復(fù)溶，12000r/min離心10min，取上清液，即得[6-7]。

2.1.3 線性范圍考察:精密稱定對乙酰氨基酚對照品適量，用蒸餾水配制成濃度分別為1.5、3.0、6.0、15、30、60、150、300、450μg/ml的對乙酰氨基酚對照品儲備液，分別精密吸取空白血漿(未給藥家兔血漿)0.5ml與上述對照品儲備液0.5ml，漩渦混合后按2.1.2(從精密吸取上清液1ml后開始)的方法處理，分別進(jìn)樣，以峰面積為縱坐標(biāo)(Y)、濃度為橫坐標(biāo)(X)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并計(jì)算回歸方程，回歸方程為Y=40471X-2278.8，r=0.9997，線性范圍是0.5-150μg/ml。

2.2 對乙酰氨基酚琥珀酸酯藥代動力學(xué)研究

2.2.1 配制對乙酰氨基酚琥珀酸酯注射液:按摩爾比1:2精密稱定對乙酰氨基酚琥珀酸酯與碳酸氫鈉，以注射用水配制成對乙酰氨基酚琥珀酸酯濃度為50mg/ml的藥液，0.22μm濾膜過濾，121℃滅菌30min。

2.2.2 給藥方案與血樣采集:每只家兔大腿肌肉注射對乙酰氨基酚琥珀酸酯注射液2ml，分別于給藥后0.083、0.167、0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、4、6、8、12h，分別心臟穿刺采血2ml，血樣處理方法見2.1.2。

2.2.3 測定血藥濃度:取2.2.2中的樣品，按2.1.1的色譜條件測定，以峰面積代入回歸方程，標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算血藥濃度，結(jié)果見附圖。

附圖 對乙酰氨基酚琥珀酸酯血藥濃度-時間曲線

2.2.4 計(jì)算藥代動力學(xué)參數(shù):將各采樣時間點(diǎn)血藥濃度數(shù)據(jù)經(jīng)DAS(Drug And Statistics，Vision2.0)程序處理，依據(jù)相關(guān)系數(shù)r最大和AIC最小的原則選擇合適的隔室模型，結(jié)果表明，對乙酰氨基酚琥珀酸酯在家兔體內(nèi)符合一級吸收、二室模型(權(quán)重系數(shù)=1/C2)，主要藥動學(xué)參數(shù)見附表。

附表 對乙酰氨基酚琥珀酸酯的主要藥動學(xué)參數(shù)

3 討論

對乙酰氨基酚琥珀酸酯經(jīng)肌肉注射后，其體內(nèi)代謝過程符合一級吸收二室模型。關(guān)皎等[8]的研究表明，健康家兔肌肉注射對乙酰氨基酚符合一級吸收二室模型，血藥濃度達(dá)峰時間Tmax=0.87±0.17h，消除半衰期t1/2(β)=3.66±0.32h。本研究中，健康家兔肌肉注射對乙酰氨基酚琥珀酸酯后，血藥濃度達(dá)峰時間為Tmax=0.25± 0.01h，消除半衰期t1/2(β) =2.70±0.12h，均短于健康家兔肌肉注射對乙酰氨基酚的Tmax和t1/2(β)。本研究結(jié)果表明，對乙酰氨基酚琥珀酸酯在家兔體內(nèi)吸收速度和消除速度均快于對乙酰氨基酚，因此，對乙酰氨基酚琥珀酸酯有可能更快發(fā)揮藥效和降低蓄積肝毒性[9]。并且，本研究中配制的對乙酰氨基酚琥珀酸酯注射液為水溶液，pH=6.5，不含有機(jī)溶劑，可避免使用有機(jī)溶劑所產(chǎn)生的注射疼痛和刺激性，增強(qiáng)用藥的順應(yīng)性，有較大的應(yīng)用前景。

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STUDY ON THE PHARMACOKINETICS OF ACETAMINOPHEN SUCCINATE IN RABBIT

GU Xiao-dong, CHANG Jin-hua, LIU Pei, et al
(Hebei Key Laboratory of Study and Exploitation of Traditional Chinese Medicine, Institute of Chinese Materia Medica, Hebei Chengde 067000, China)

Objective:To study the pharmacokinetics of acetaminophen succinate in healthy rabbit after intramuscular injection.Methods:RP-HPLC was used to determine the acetaminophen concentration of 6 adult healthy rabbits at different time after injecting acetaminophen succinate. Then the pharmacokinetic parameters were disposed by DAS 2.0 pharmacokinetic software.Results:The concentration-time curve of acetaminophen succinate in rabbit was singlecompartment model (weight coefficient=1/C2). The main pharmacokinetic parameters was:Tmax=0.25h, Cmax=95.44mg/ L, t1/2(α)=0.73h, t1/2(β)=2.70h, AUC= 82.44 mg/L*h, Vd=45.65L/kg.Conclusions:Compared with muscular injection of acetaminophen, the Tmaxand t1/2(β) of muscular injection of acetaminophen succinate shorten obviously, which indicates that acetaminophen succinate onset quickly and remove rapidly in vivo.

Acetaminophen succinate; Pharmacokinetics; HPLC

R917

A

1004-6879(2014)01-0003-03

2013-07-12)

△ 通訊作者