李海濱,李春日,荊 秦
(1.沈陽市大東區(qū)中醫(yī)院 藥劑科,遼寧 沈陽110041;2.遼寧中醫(yī)藥大學(xué) 針灸推拿學(xué)院,遼寧 沈陽110847)
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中藥鑒別依據(jù)及方法探析
李海濱1,李春日2*,荊 秦2
(1.沈陽市大東區(qū)中醫(yī)院 藥劑科,遼寧 沈陽110041;2.遼寧中醫(yī)藥大學(xué) 針灸推拿學(xué)院,遼寧 沈陽110847)
目的:探究近年來新發(fā)展起來的中藥鑒別的方法及其依據(jù),為臨床用藥提供一定的參考,以避免因混淆使用引發(fā)醫(yī)療事故。方法: 簡單分析目前中藥鑒別中應(yīng)用較多的幾種方法,并分析其鑒別方法。結(jié)果:七種中藥鑒別的新技術(shù),每種鑒別方法都有其自身的特色和依據(jù)以及相應(yīng)的應(yīng)用范圍。結(jié)論: 中藥的鑒別依據(jù)和方法具有多樣性,在實(shí)際操作過程中,應(yīng)博采眾長,靈活運(yùn)用各種不同的鑒別方法。
中藥鑒別;鑒別依據(jù);鑒別方法
我國對中藥的研究已經(jīng)有了相當(dāng)悠久的歷史,關(guān)于中藥形態(tài)特征的記載也非常之多,但是由于一些文獻(xiàn)記載并不詳盡,導(dǎo)致很多中藥品種混亂現(xiàn)象比較突出[1],因此就衍生了中藥鑒定學(xué)。中藥鑒定學(xué)是研究和鑒定有關(guān)中藥品種和特征,并制定中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)以開發(fā)新藥源的一種應(yīng)用學(xué)科[2]。而隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展,中藥鑒別方法也在不斷發(fā)展,新的學(xué)科理論和實(shí)驗(yàn)技術(shù)不斷滲透到中藥鑒別領(lǐng)域中。中藥鑒別依據(jù)和方法不斷向著科學(xué)化、規(guī)范化、信息化方向發(fā)展。本文主要對近些年出現(xiàn)的中藥鑒別新技術(shù)和新方法進(jìn)行簡單介紹。
色譜法又被成為層析法。其鑒別依據(jù)是中藥中的化學(xué)成分在固定相和流動(dòng)相中的分配系數(shù)差異。色譜法正是利用這種差異而使各組分離,并根據(jù)分離所得到的色譜圖進(jìn)行中藥鑒別。色譜法最早產(chǎn)生于20世紀(jì)初,在20世紀(jì)60年代開始用于中藥鑒別,它不僅能對中藥中所含有的化學(xué)成分進(jìn)行分析,還能對化學(xué)成分進(jìn)行定量分析,近年來色譜法已經(jīng)成為中藥鑒別最主要的方法之一。王雪蓮[1]對色譜法的具體分類進(jìn)行概括,提出其主要包括:薄層掃描法、薄層色譜法、高效液相色譜法、氣質(zhì)聯(lián)用法以及氣相色譜法。以薄層色譜法為例,它又被稱為薄層層析,是一種層析分離技術(shù),它通過將涂布于支持板上的支持物作為固定相,加以合適的溶劑作為流動(dòng)相,對藥品的化學(xué)成分進(jìn)行分離、鑒定。
光譜法的鑒別依據(jù)是:通過某一段波長,檢測中藥對這段波長的吸收情況和吸收光譜的情況。光譜法主要包括:紫外光譜法、紅外光譜法、導(dǎo)數(shù)光譜法、核磁共振波譜法、熒光光譜法以及質(zhì)譜法[3]。以紅外光譜法為例,楊飛勇等[9]提出通常我們所用的紅外光譜法主要是指中紅外光譜分析,它以波長為橫坐標(biāo),強(qiáng)度或者其它隨波長變化的性質(zhì)為縱坐標(biāo),將得到的能夠反映紅外射線與物質(zhì)作用的譜圖,具有特征性強(qiáng)、簡便迅速、取量小以及準(zhǔn)確等特點(diǎn)。比如,熊膽為較為名貴的藥材,但若用豬膽或者牛膽冒充,一般的鑒別方法是很難鑒別的,但用紅外光譜法則能顯著顯示熊膽和豬膽、牛膽的區(qū)別,迅速進(jìn)行真?zhèn)舞b別。
熱分析法的鑒別依據(jù)是:在相同環(huán)境下對中藥和參比物進(jìn)行加溫,對比兩者的溫度變化、加溫時(shí)間等,以達(dá)到鑒別中藥的目的。周雨箐[3]對熱分析法按照分析內(nèi)容進(jìn)行分類,主要包括以下幾種:熱重量法、差示掃描熱量法以及差示熱量分析法。應(yīng)用最多的是差示熱量分析法。
中藥指紋圖譜檢定技術(shù)借鑒了法醫(yī)學(xué)中的指紋鑒定,但又不單是簡單的概念重復(fù)。中藥指紋圖譜鑒定技術(shù)指的是中藥在經(jīng)過適當(dāng)?shù)奶幚碇?,將中藥中一部分化學(xué)成分信息通過一定的方法進(jìn)行表達(dá),比如中藥中的已知活性成分、非活性成分以及部分未知成分,將表達(dá)出來的數(shù)據(jù)進(jìn)行計(jì)算、分析,然后根據(jù)指紋特征和技術(shù)參數(shù)進(jìn)行說明[4]。中藥指紋圖譜是一種綜合鑒定手段,主要用于評價(jià)中藥質(zhì)量的真實(shí)性、穩(wěn)定性以及優(yōu)良性。
中藥生物效應(yīng)鑒定法的鑒別依據(jù)是:中藥的歸經(jīng)、功能主治,其主要是通過高效液相、氣-質(zhì)聯(lián)用、液-質(zhì)聯(lián)用等現(xiàn)代分析分離手段與放射性配體研究中藥中的活性成分,建立中藥質(zhì)量評價(jià)系統(tǒng)[5]。該方法的表征體現(xiàn)主要有:有效成分半數(shù)、有效成分含量、有效濃度EC50值、表現(xiàn)解離常數(shù)Ki值、半效抑制濃度IC50值等。
該方法主要是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR),產(chǎn)生于1985年,它是一種模擬自然DNA復(fù)制過程的快速體外DNA片段擴(kuò)增技術(shù),因此也被稱為無細(xì)胞分子克隆技術(shù)。該技術(shù)的問世給中藥鑒別開拓了一條嶄新的道路。PCR能夠?qū)⒅兴幹兴崛〕鰜淼暮哿康腄NA擴(kuò)增到足以用來檢測分析的數(shù)量[6]。而由PCR延伸出來的鑒別方法很多,比如:RAPD、RFLP、SSR、AP-PCR、DNA、AFLP等[8]。以DNA(隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA)最為常用,在目前這個(gè)絕大多數(shù)動(dòng)植物都并不具備基因組DNA資料的情況下,它不需要進(jìn)行專門設(shè)計(jì)擴(kuò)增反應(yīng)引物,也不需要預(yù)先知道要被研究生物基因組的相關(guān)核苷酸序列,能夠適合各種品種之間的差異,具有較強(qiáng)的通用性。并且該方法還具有快速、專屬性強(qiáng)、準(zhǔn)確以及重現(xiàn)性好等特點(diǎn)[7]。但是由于目前中藥中很少有DNA存在,因此該方法的使用還存在一定的局限性,它僅限于能夠被提取到DNA存在的藥材鑒別中。
20世紀(jì)60年代末,模式識(shí)別被引入化學(xué)領(lǐng)域,其鑒別依據(jù)為:物以類聚。即兩個(gè)相似或者同類樣本間的距離是比較近的,因此就能夠根據(jù)相近距離的函數(shù)來進(jìn)行判別和分類,然后對分類結(jié)果進(jìn)行分析。胡妮娜等[10]提出化學(xué)模式識(shí)別法主要有以下幾種具體技術(shù):主成分分析法、貝葉斯判別法、SIMCA分類法、聚類分析法、人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)技術(shù)、模糊動(dòng)態(tài)聚類分析法、導(dǎo)線譜線組法以及計(jì)算機(jī)圖像分析技術(shù)等。中藥鑒別就是運(yùn)用這些方法將中藥中的成分提取物的光譜或者其它一些經(jīng)量化的數(shù)據(jù)指標(biāo),運(yùn)用計(jì)算機(jī)進(jìn)行處理,從這些指標(biāo)中去偽存真、去粗取精,從而獲取能夠用于中藥鑒別的有效信息,也就是說它是以計(jì)算機(jī)代替人的一種對藥材進(jìn)行分析、判斷、鑒別的方法。
綜上所述,隨著新方法、新技術(shù)的不斷發(fā)展和應(yīng)用,中藥鑒別方法也在不斷創(chuàng)新,目前臨床上關(guān)于中藥的鑒別依據(jù)和方法多種多樣。但是由于我國中藥品種繁多、形態(tài)各異,尤其現(xiàn)在對于藥材的加工炮制方法也很多,對于藥材的加工在一定程度上改變了藥材的某些特性,容易造成藥物的真?zhèn)坞y辨。因此,筆者認(rèn)為在采用不同方法進(jìn)行中藥鑒別時(shí),應(yīng)該博覽眾法、靈活運(yùn)用,這樣才能真正做好中藥鑒別工作,保證臨床用藥安全。
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[6] 劉敏莉,李 柏.常用中藥鑒別方法研究進(jìn)展[J].吉林中醫(yī)藥,2009,10(25):212-213.
[7] 楊飛勇,宋宇鵬,周玉芬.紅外光潛在中藥鑒別中的應(yīng)用[J].科技致富向?qū)В?012,10(25):321-322.
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[10] 胡妮娜,田淑琴,于景偉,等.傳統(tǒng)中藥檢定方法的研究發(fā)展概況[J].中醫(yī)藥信息,2009,5(10):79-81.
(責(zé)任編輯:宋勇剛)
2013-12-07
李海濱(1972-), 男, 遼寧省沈陽市大東區(qū)中醫(yī)院副主任中藥師,研究方向?yàn)橹兴庤b別。
李春日(1973-),男, 遼寧中醫(yī)藥大學(xué)副教授, 研究方向?yàn)橹兴庤b別。
R282.5
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1673-2197(2014)09-0029-02