鄭立發(fā)，周建平，呂慧俠

（中國藥科大學藥劑學教研室，江蘇 南京210009）

目前，國內在藥物新劑型方面的研究較多，尤其專注于納米給藥系統(tǒng)的研究，如以新型高分子材料作為給藥載體，同時修飾以具有靶向功能的蛋白、多肽、單克隆抗體等生物材料，最后制成復合物、納米晶體、納米粒、脂質體、膠束等劑型。本文通過查閱2012年我國學者在國內外期刊上發(fā)表的論文，分類概述我國在納米制劑、微球、亞微乳、復合物、納米晶體、立方液晶以及碳納米管等藥物新劑型方面的研究進展。

1 納米制劑

大多數(shù)抗腫瘤藥物生物利用度低、副作用大，而粒徑為1～1 000 nm的納米囊、納米球、脂質納米粒、脂質體、納米乳和聚合物膠束等納米給藥系統(tǒng)具有提高藥物靶向性、降低藥物毒副作用等優(yōu)點，因而成為抗腫瘤藥物制劑的首選考察劑型。

1.1 高分子材料載體

目前用于制備納米給藥系統(tǒng)載體的高分子材料，主要為合成的可生物降解的高分子聚合物，如聚乳酸(PLA)、乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)、聚氰基丙烯酸烷酯(PACA)和多肽等；另一種則是被大量用于實驗研究的可生物降解的天然高分子材料，如殼聚糖、明膠、海藻酸鈉及透明質酸等多糖類材料。

透明質酸(hyaluronic acid，HA)及其衍生物因具有良好的生物相容性、可降解性、高黏彈性以及與細胞表面特異受體專一性結合的能力而被廣泛用作藥物載體，以達到藥物增稠、藥物緩釋、促進藥物透皮能力及靶向性的目的。利用HA的靶向性而將其用于載體時，其可在靶腫瘤組織中透明質酸酶的作用下，釋放出其他載體或藥物而發(fā)揮作用。如，以脂質體為載體，并用具有腫瘤細胞選擇性（pH敏感）的穿膜肽硬脂酸-R6H4修飾，同時將具有腫瘤組織靶向性的HA包覆其外，即制得具有雙重腫瘤靶向作用的復合納米載體HA-R6H4-Lipsome[1]。以HA作為紫杉醇（PTX）的載體，并用甘草次酸（GA）修飾，即可制得載藥納米粒PTX/GAHA，MTT實驗顯示，其對多種腫瘤細胞均具有較強的殺傷作用，尤其對肝癌HepG2細胞的生長抑制作用最強；此外，細胞攝取實驗表明，該納米粒易被腫瘤細胞攝取[2]。

殼聚糖用作藥物載體，可有效控制藥物釋放，延長藥物療效，降低藥物毒副作用，并能提高疏水性藥物對細胞膜的通透性和藥物穩(wěn)定性，且可用于改變藥物的給藥途徑，增強制劑的靶向能力。如，Huo等[3]利用N-去氧膽酸-O,N-羥乙基殼聚糖（DAHC）作為PTX的載體，并用奧曲肽-PEG-去氧膽酸偶合物（OPD）修飾，制成載藥膠束OPD-DAHC-PTX，實驗顯示，相較于未用OPD修飾的DAHC-PTX，其對乳腺癌MCF-7細胞具有更強的靶向性和細胞毒性，從而產(chǎn)生更強的腫瘤抑制作用。通過偶聯(lián)反應制得的α-生育酚丁二酸修飾的殼聚糖（CS-TOS）在水溶性介質中可自組裝形成膠束，實驗表明，其用作PTX載體而形成的載藥膠束對腫瘤具有強細胞毒性，尤其對U14腫瘤細胞具有較強的抑制作用[4]。有研究表明，將辛基連接于殼聚糖的側鏈氨基，并偶聯(lián)上具有促吸收作用的精氨酸，有可能模擬出寡聚精氨酸穿膜肽所具有的促吸收作用。利用該方法合成的N-辛基-N-精氨酸殼聚糖(OACS)能在水中自組裝形成具有載藥能力的聚合物膠束，MTT實驗表明OACS 在50～1 000 μmol·L-1濃度范圍內安全性良好，且HepG2細胞攝取實驗結果表明，隨著精氨酸取代度的升高，OACS膠束的細胞攝入量也隨之增加，其細胞攝入量最大時可較殼聚糖增加40倍?？梢姡琌ACS膠束有望成為一種兼具促吸收和載藥功能的新型納米載體[5]。

1.2 蛋白質載體

蛋白質與生物體具有良好的親和性，排斥反應小，而且其分子鏈上往往帶有羥基、氨基、羧基等大量可反應的官能團，可用作化學修飾的位點，故其作為藥物載體材料具有廣闊的應用前景。常用的蛋白質載體材料包括人/牛血清白蛋白、乳鐵蛋白等。

采用溶劑蒸發(fā)法制備的牛血清白蛋白（BSA）包覆的脂質納米載體(BSA-cNLC)相較于未包覆白蛋白的普通陽離子脂質納米載體(cNLC)，其在血漿中的穩(wěn)定性顯著提高，且靜注后，其在荷瘤小鼠腫瘤組織中最高濃度顯著提高，腫瘤組織靶向能力增強，而在血液中的滯留時間也顯著延長，表現(xiàn)出更好的長循環(huán)效果[6]。用乳鐵蛋白（Lf）修飾聚乙二醇（PEG）化脂質體（PLS）而制得的乳鐵蛋白-PEG化脂質體（Lf-PLS）經(jīng)激光共聚焦和流式細胞儀實驗顯示，其能更有效地結合于HepG2細胞；且體內試驗顯示，相較于未用Lf修飾的PLS，其在HepG2腫瘤組織中具有更強的積聚作用，表明Lf-PLS作為藥物載體具有較強的腫瘤靶向性[7]。

1.3 基因轉運載體

基因轉運載體主要包括病毒載體和非病毒載體。病毒載體的基因轉運能力強，但所攜基因的大小和數(shù)量有限，且在臨床應用上存在安全性問題。因此，非病毒載體材料的開發(fā)成為熱點。

有研究者合成了氧化還原調控的甲氧基聚乙二醇-二硫鍵-聚乙烯亞胺（mPEG-SS-PEI），并將其用作pEGFP質粒的非病毒載體，實驗結果顯示，與不含有二硫鍵的mPEG-PEI-pEGFP相比，mPEG-SS-PEI-pEGFP 能顯著提高對U87細胞的轉染效率，且體外細胞毒性未顯著增加[8]。而制備的一種超支化聚乙二胺非病毒基因轉運載體（hPAMAM）經(jīng)體外實驗顯示，其細胞毒性很小，且所攜人類血管內皮細胞生長因子（hVEGF165）基因轉染的細胞可穩(wěn)定表達hVEGF165達14 d，其間的第2 d出現(xiàn)表達峰值[9]。此外，用PLA納米粒構建的腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體（TRAIL）基因與PTX的共同遞送系統(tǒng)經(jīng)體內試驗顯示，相較于單純PTX遞送系統(tǒng)CDX–PEG–PLA–PTX和單純基因遞送系統(tǒng)RGD–PEG–PEI/pORF-hTRAIL，其具有更強的抗腫瘤作用，可致腦膠質瘤模型動物的存活期更長[10]。

2 微球

選用聚乳酸-羥基乙酸共聚物（PLGA）為載體、采用新型超微粒制備系統(tǒng)制得的利培酮微球經(jīng)體外實驗顯示，其載藥量為20%時的1 h釋藥率僅為4.2%，突釋率低，且其釋放速率和釋放時間與市售利培酮微球快速釋放期基本一致而無延滯期[11]。Li等[12]在比較常壓溶劑蒸發(fā)法（ASE）和減壓溶劑蒸發(fā)法（RSE）制備的阿奇霉素微球時發(fā)現(xiàn)，采用ASE制得的微球呈零級釋藥，而采用RSE制得的微球呈一級釋藥；除了具有更好的釋藥行為，RSE制得的微球在外觀和包封率方面也更具優(yōu)勢。實驗顯示，采用反向懸浮交聯(lián)聚合法制備的利多卡因聚乳酸微球（LMs）有良好的外觀及適宜的粒徑和彈性，且具緩釋作用，可持續(xù)釋藥，從而能使藥物充分發(fā)揮療效，并具有良好的骨細胞相容性[13]。

3 亞微乳

亞微乳乳滴粒徑一般在100～1 000 nm范圍內，其穩(wěn)定性介于納米乳與普通乳之間。亞微乳常被用作胃腸外給藥的載體，具有提高藥物穩(wěn)定性、降低藥物毒副作用、促進藥物體內及經(jīng)皮吸收等優(yōu)點，并具有靶向性及對藥物的緩控釋作用。近年來已有地西泮、異丙酚、依托咪酯等藥物的亞微乳制劑上市[14]。

艾秀麗等[15]以注射用大豆油和注射用中鏈脂肪酸三酰甘油為混合油相，以蛋黃卵磷脂、泊洛沙姆188和聚山梨酯-80為復合乳化劑，采用高壓均質法制得硫酸氫氯吡格雷亞微乳注射液，實驗證實，該制劑理化性質穩(wěn)定，符合靜脈注射要求，其制備工藝可行。劉玉紅等[16]采用單因素正交試驗對石芎揮發(fā)油亞微乳處方和制備工藝進行優(yōu)化，結果，所制得的亞微乳樣品符合《中國藥典》中有關亞微乳的質量標準，處方工藝合理，其室溫或冷藏放置達12個月時仍可保持穩(wěn)定。華海嬰等[17]發(fā)現(xiàn)，制得的乙酰氧基胡椒酚乙酸酯（ACA）亞微乳與ACA原料藥相比，其對宮頸癌HeLa細胞增殖的抑制和誘導凋亡作用更顯著。使用泊洛沙姆、大豆磷脂、乙醇和PEG400制成的輔酶Q10水包油(O/W)型注射用亞微乳具有黏度低、粒徑小、包封率高等優(yōu)點，且大鼠體內藥動學實驗表明，其靜注給藥后具有明顯的緩釋作用，平均滯留時間（MRT）為6.55 h[18]。

4 復合物

劉微等[19]將布洛芬制成可溶性鈉鹽后，采用不同交聯(lián)度的離子交換樹脂為載體以靜態(tài)法制得布洛芬樹脂復合物，體外實驗發(fā)現(xiàn)，其釋放呈pH依賴性，且具有一定的緩釋作用。Xin等[20]通過透皮實驗比較雙氯芬酸的離子交換樹脂復合物、離子交換膜復合物和離子交換纖維復合物時發(fā)現(xiàn)，雙氯芬酸離子交換纖維復合物的透皮效果最佳，故其可作為促進可電離藥物透皮吸收的有效手段。載有多柔比星的海藻酸（ALG-H）/聚[（2-甲氨基）乙基甲基丙烯酸酯]復合物納米粒經(jīng)體外實驗顯示，通過調節(jié)釋放介質的pH和鹽濃度，可控制其對多柔比星的釋放[21]。

5 納米晶體

藥物納米晶體技術（drug nanocrystals）是通過將微米級的藥物顆粒經(jīng)研磨分散或沉淀結晶，使其粒徑減小至亞微米級（100～1 000 nm）甚至毫微米級（1～ 100 nm），并在穩(wěn)定劑的作用下穩(wěn)定存在。而藥物晶體粒徑的變化會影響其理化性質，根據(jù)Noyes -Whitney方程，藥物晶體粒徑的減小意味著其比表面積增加和擴散層厚度降低，從而有助于溶出。

在含有高聚物（聚乙烯醇和PEG）的藥物（尼群地平）無定形顆?；鞈乙褐校ㄟ^溶媒介導，可實現(xiàn)尼群地平從不定形至結晶型的轉變[22]。通過高壓均質法制得尼群地平納米晶體，再用殼聚糖修飾，制成殼聚糖修飾的尼群地平納米晶體，其穩(wěn)定性較未用殼聚糖修飾的納米晶體顯著提高，生物利用度也大大提高，且具有緩釋作用[23]。在比較殼聚糖、N-三甲基殼聚糖和聚乙酰亞胺的修飾對高壓均質法制備的伊曲康唑納米晶體理化性質的影響時也發(fā)現(xiàn)，伊曲康唑納米晶體經(jīng)陽離子聚合物修飾后，不但不會影響其晶體形態(tài)，而且可明顯提高其穩(wěn)定性[24]。

6 立方液晶

實驗研究顯示，以單油酸甘油酯為液晶材料、兩性霉素B為主藥制備的載藥立方液晶前體膠囊在生理溫度下接觸水性介質后可快速吸水而形成立方液晶，并具有一定的緩釋作用，在含有0.25%十二烷基硫酸鈉(SDS)的pH7.4磷酸鹽緩沖液中可持續(xù)釋藥達9 h[25]。載有PTX的立方液晶納米粒（PTX-DSPE-PEG-LCNPs）在體外釋藥實驗中顯示其具有快速釋放和持續(xù)釋放的兩相釋放形式，且體內研究證實，相較于市售PTX制劑，PTX-DSPE-PEG -LCNPs的生物利用度大大提高[26]。

7 碳納米管

碳納米管（carbon nanotubes，CNTs）最初由日本科學家Sumio Iijima于1991年發(fā)現(xiàn)，是由石墨烯層片繞中心軸按一定的螺旋角卷曲而成的直徑為納米級的無縫、中空管體，可容納生物活性分子及藥物。

多壁碳納米管（MWCNTs）經(jīng)混合強酸氧化處理后，可成功接枝羧基而形成羧基化碳納米管（c-CNTs），使得MWCNTs水溶性大大改善，且載藥及藥物釋放性能實驗表明，改性后的c-CNTs可用作藥物緩釋載體[27]。另有研究顯示，通過DSPE-PEG-氨基活化而制備的載有siRNA的單壁碳納米管對siRNA的裝載率可達83.55%，且體外實驗證實，其能通過靶向MDM2基因而有效抑制B-Cap-37乳腺癌細胞的增殖，72 h抑制率達44.53%[28]。

8 結語

根據(jù)國家食品藥品監(jiān)督管理局藥品審評中心發(fā)布的《2012年度中國藥品審評報告》，在2012年化藥類申請中，1.1類新藥申請有78個，其他3類以上新藥申請有942個；在前3年中，1.1類新藥申請數(shù)量基本維持在70個上下，3類新藥申請量每年增加近百個。但在新劑型方面，2012年僅有常州金遠藥業(yè)制造有限公司和上海復旦張江生物醫(yī)藥股份有限公司各自申報的鹽酸多柔比星脂質體注射液?？梢姡壳靶聞┬偷膽媒^大多數(shù)還僅僅停留在研發(fā)階段，而真正能夠通過審批并應用于臨床的新劑型藥物鳳毛麟角。

綜上所述，2012年國內藥物新劑型研究的熱點多集中在納米制劑方面，主要原因可能是目前藥物研究的熱點仍然是抗腫瘤藥物，而大多數(shù)抗腫瘤藥物為難溶性藥物，其普通制劑在體內的釋放性能、靶向性和生物利用度都很差，難以充分發(fā)揮藥效。因此，采用各種載體材料將抗腫瘤藥物制成納米制劑，不但可以解決藥物難溶性所致釋放效果差的難題，而且還可以使制劑具有靶向性和緩控釋性能，大大提高了藥物的生物利用度。同時，近些年隨著基因藥物的發(fā)展，如何有效地將其靶向輸送到治療部位，也已成為藥物新劑型研究的重點之一，顯然納米載體目前仍然是基因藥物體內輸送的有效途徑，因此，脂質體、納米粒、聚合物膠束等傳統(tǒng)納米制劑仍將是國內學者研究的一大熱點。

除此之外，一些特殊的納米劑型，例如納米晶體、立方液晶和碳納米管等也將得到越來越廣泛的研究與開發(fā)。這些納米劑型均是利用晶體的一些特殊理化性質或者空間結構，并采用現(xiàn)代技術制成的特殊遞藥系統(tǒng)，也可提高藥物的靶向性及緩控釋性能。國內學者對其他新劑型，如微球、亞微乳、復合物等的研究也很廣泛，但由于起步較晚，研究的時間尚短，大多尚處仿制階段，普遍技術含量不高。

雖然2012年我國對藥物新劑型的研究取得了一定進展，但大多還為學術性研究，能真正實現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化的新劑型為數(shù)極少，尚需廣大藥劑學研究者不斷努力，使藥物新劑型和新技術盡快真正實現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化，造福大眾。

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