顏攜國(guó)，陶安進(jìn)

（1.山東大學(xué)藥學(xué)院，山東濟(jì)南250012；2.深圳翰宇藥業(yè)股份有限公司，廣東深圳518057）

單硝酸異山梨酯緩釋片的制備及穩(wěn)定性研究

顏攜國(guó)1，2，陶安進(jìn)2

（1.山東大學(xué)藥學(xué)院，山東濟(jì)南250012；2.深圳翰宇藥業(yè)股份有限公司，廣東深圳518057）

目的制備單硝酸異山梨酯緩釋片，并對(duì)其進(jìn)行穩(wěn)定性研究。方法以羥丙甲纖維素為骨架材料，與參比制劑（Imdur，阿斯利康）進(jìn)行體外釋放度比較，采用均勻設(shè)計(jì)法優(yōu)化單硝酸異山梨酯緩釋片處方，并考察緩釋片在（40±2）℃、相對(duì)濕度75%±5%條件下的穩(wěn)定性。結(jié)果經(jīng)f2（相似因子）判斷單硝酸異山梨酯緩釋片釋放曲線，與參比制劑相似。在（40±2）℃、相對(duì)濕度75%±5%條件下6個(gè)月的穩(wěn)定性良好。結(jié)論單硝酸異山梨酯緩釋片制備工藝簡(jiǎn)單易行，質(zhì)量可控，符合大規(guī)模生產(chǎn)要求。

單硝酸異山梨酯；緩釋片；穩(wěn)定性

單硝酸異山梨酯（5－isosorbidemononitrate，5－ISMN）是新一代硝酸酯類抗心絞痛藥物，也是硝酸異山梨酯的體內(nèi)主要活性代謝產(chǎn)物［1］。口服單硝酸異山梨酯可使容量血管擴(kuò)張，回心血流量減少，從而使心臟前負(fù)荷減少，達(dá)到保護(hù)心肌的目的，臨床廣泛用于防止心絞痛、充血性心力衰竭、缺血性心臟病等疾病的治療［2，3］。設(shè)計(jì)合理的制劑處方是保證產(chǎn)品質(zhì)量的前提，通過實(shí)驗(yàn)找出合理的處方有著重要的意義。因此，課題組采用均勻設(shè)計(jì)法，以羥丙甲纖維素（HPMC）為骨架材料制備單硝酸異山梨酯緩釋片，與原研廠制劑阿斯利康制藥公司的依姆多（Imdur）進(jìn)行體外釋放曲線對(duì)比，并考察自研制劑的穩(wěn)定性。

1 材料與儀器

1.1 藥品與試劑 單硝酸異山梨酯原料（山東科源制藥有限公司）；單硝酸異山梨酯對(duì)照品（中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)：100694－200401）；羥丙甲纖維素（HPMC K4M，美國(guó)陶氏化學(xué)公司）；硬脂酸（湖州展望藥業(yè)有限公司）；乳糖（德國(guó)美劑樂集團(tuán)）；微粉硅膠（贏創(chuàng)工業(yè)集團(tuán)）；硬脂酸鎂（湖州展望藥業(yè)有限公司）；乙醇（安徽安特食品有限公司）；歐巴代（上?？房蛋录夹g(shù)有限公司）。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器 高效液相色譜儀（美國(guó)Waters公司）；全自動(dòng)智能藥物溶出儀（瑞士Sotax公司）；C＆C800旋轉(zhuǎn)式壓片機(jī)（北京創(chuàng)博佳維科技有限公司）；LabcoatingⅠ高效包衣鍋（深圳信宜特科技有限公司）。

2 方法和結(jié)果

2.1 分析方法的建立和考察

2.1.1 色譜條件 甲醇－水（25∶75）為流動(dòng)相，十八烷基鍵合硅膠柱為色譜柱；檢測(cè)波長(zhǎng)為210 nm。色譜柱的理論塔板數(shù)以單硝酸異山梨酯峰計(jì)算應(yīng)不低于3 000。單硝酸異山梨酯峰與2－單硝酸異山梨酯峰的分離度應(yīng)符合要求，與硝酸異山梨酯峰的分離度應(yīng)不小于6.0。

2.1.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 精密稱取單硝酸異山梨酯對(duì)照品25 mg，用水溶解并定容至25.0 mL，分別量取此溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 mL置25 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，照“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件，分別取20μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖。以峰面積A對(duì)濃度C（μg·mL－1）作曲線，按最小二乘法計(jì)算回歸方程及相關(guān)系數(shù)，得回歸方程A＝15 810C＋1 380，r＝0.999 9。線性試驗(yàn)結(jié)果表明單硝酸異山梨酯濃度在20.53～143.70μg·mL－1范圍內(nèi)與其峰面積呈良好線性關(guān)系。

2.1.3 回收率 分別精密稱取單硝酸異山梨酯對(duì)照品20、25、30 mg，置250 mL量瓶中，按比例加入處方量的輔料，加水適量并超聲15 min使單硝酸異山梨酯溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，作為供試品溶液。另精密稱取單硝酸異山梨酯對(duì)照品25 mg，不加輔料，同法操作，制備對(duì)照品溶液。分別精密量取上述兩種溶液各20μL，按上述色譜條件測(cè)定峰面積，計(jì)算結(jié)果顯示，上述3個(gè)濃度供試品溶液平均回收率分別為99.1%、100.5%、99.9%，RSD分別為0.31%、0.70%、0.51%，回收率結(jié)果符合規(guī)定。

2.1.4 精密度 取一份濃度為0.1 mg·mL－1的供試品溶液，分別進(jìn)樣6次，測(cè)得峰面積RSD為0.067%。試驗(yàn)結(jié)果表明，精密度符合要求。

2.1.5 專屬性 按本品處方制備缺單硝酸異山梨酯的空白輔料，取適量，以水制成溶液，濾過，作為空白輔料溶液，照含量測(cè)定項(xiàng)下色譜條件，取20μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖。試驗(yàn)證明，輔料不干擾測(cè)定，見圖1。

2.1.6 含量測(cè)定 取本品20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于單硝酸異山梨酯25 mg），置250 mL量瓶中，加流動(dòng)相適量，超聲15 min使單硝酸異山梨酯溶解，用水稀釋至刻度，搖勻，濾過，作為供試品溶液；另取單硝酸異山梨酯對(duì)照品，同法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。

圖1 空白輔料溶液

2.2 體外釋放度測(cè)定 根據(jù)已有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，采用釋放度測(cè)定法《中國(guó)藥典》2010年版（二部）附錄ⅩD第一法［4］，以水500 mL為溶劑，轉(zhuǎn)速為50 rpm，依法操作，經(jīng)1、4、8 h，取溶液5 mL，濾過，并即時(shí)在操作容器中補(bǔ)充水5 mL，照“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件，分別取續(xù)濾液20μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另精密稱取經(jīng)減壓干燥至恒重的單硝酸異山梨酯對(duì)照品適量，加水溶解并定量稀釋制成每1mL中約含單硝酸異山梨酯120μg的溶液，作為對(duì)照品溶液，同法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算出每片在不同時(shí)間點(diǎn)的釋放量。

2.3 處方優(yōu)化 稱取過80目的單硝酸異山梨酯、HPMC－K4M、乳糖和硬脂酸，充分混勻；加入適量的75%乙醇制成軟材，過20目篩制得濕顆粒；將濕顆粒在45℃的恒溫箱里烘至水分≤2%；干顆粒以20目篩整粒，加入微粉硅膠和硬脂酸鎂，混合均勻；取樣檢測(cè)，確定片重范圍，壓片，包衣。

單硝酸異山梨酯易溶于水，單純使用HPMCK4M作為骨架很難有效控制藥物釋放，因此加入阻滯劑硬脂酸，以減少HPMC－K4M的用量，同時(shí)加入適量乳糖作為稀釋劑，使物料更易于制粒和壓片。以HPMC－K4M為骨架材料，硬脂酸為阻滯劑，乳糖為稀釋劑，按照下列均勻設(shè)計(jì)方案進(jìn)行實(shí)驗(yàn)［5～7］，考察HPMC－K4M、硬脂酸和乳糖的合適用量。

設(shè)計(jì)每片含主藥60 mg，微粉硅膠約1%，硬脂酸鎂約1%，其他3種輔料考察范圍如表1。

表1 骨架材料用量考察范圍

表2 骨架材料用量選擇均勻設(shè)計(jì)因素水平表U5（54）

續(xù)表2：

將考察因素的范圍分為5水平，選擇U5（54）表，根據(jù)其使用表的規(guī)定，選取其中的1，2，4列組成U5（52）表。把A，B，C 3因素分別放在U5（52）表的3列上面，將對(duì)應(yīng)的各因素的各水平填入表內(nèi)，得到實(shí)驗(yàn)方案如表2。

表3 均勻設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)各方案藥物累積溶出釋放度

用SPSS統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行處理［8，9］，得到回歸方程：K＝56.880 8＋0.001 1×（A）2－0.0133×A× B＋0.004 8×A×C；

s＝0.978 8，r＝0.999 8，F(xiàn)＝495.6，n＝5。結(jié)果，通過F檢驗(yàn)（0.05），得到優(yōu)化處方為：A＝100 mg，B＝80 mg，C＝60 mg。

2.4 優(yōu)化處方驗(yàn)證 照優(yōu)化的處方制備單硝酸異山梨酯緩釋片，測(cè)定體外釋放度，并與參比制劑比較，結(jié)果見表3。按照相似因子法f2（f2＝50×lg［1＋1／n∑（Rt－Tt）2］－1／2×100，Rt和Tt分別為參比制劑和自制樣品在t時(shí)間內(nèi)的累積釋放度）判斷自制緩釋片與參比制劑體外釋放行為的相似程度，見表4。

表4 單硝酸異山梨酯緩釋片釋放度測(cè)定結(jié)果

2.5 穩(wěn)定性考察結(jié)果 按照《中國(guó)藥典》2010年版（二部）附錄ⅪⅩC中的原料藥與藥物制劑穩(wěn)定性指導(dǎo)原則［2］，對(duì)優(yōu)化后處方進(jìn)行穩(wěn)定性考察：將自制單硝酸異山梨酯緩釋片置溫度（40±2）℃、相對(duì)濕度75%±5%條件下放置，分別于第1、2、3和第6月末取樣，考察片劑的外觀性狀、含量、有關(guān)物質(zhì)及釋放度，見表5。

表5 單硝酸異山梨酯緩釋片穩(wěn)定性（加速試驗(yàn)）結(jié)果

3 結(jié)論

3.1 均勻設(shè)計(jì)法是我國(guó)自行開發(fā)的一套科學(xué)的試驗(yàn)方法，在各科學(xué)領(lǐng)域發(fā)揮了重要作用。經(jīng)過工藝優(yōu)化最終確定了單硝酸異山梨酯緩釋片的最佳制備工藝：以HPMC為骨架材料，硬脂酸為阻滯劑，乳糖為稀釋劑，采用濕法制粒工藝。該制備工藝簡(jiǎn)單易行，易于過程控制，符合大規(guī)模生產(chǎn)要求。

3.2 單硝酸異山梨酯容易吸潮，而且味苦，進(jìn)行薄膜包衣，這樣既可以掩蓋藥物不良?xì)馕?，提高患者服藥依從性，同時(shí)對(duì)于緩釋片的穩(wěn)定性起到提高作用［10］。

3.3 通過加速穩(wěn)定性6個(gè)月考察，以外觀、體外釋放度、有關(guān)物質(zhì)和含量作為指標(biāo)，評(píng)價(jià)本課題組制備的單硝酸異山梨酯緩釋片，結(jié)果顯示自研制劑與原研廠制劑（阿斯利康制藥公司的Imdur，60 mg規(guī)格）質(zhì)量相當(dāng)甚至更優(yōu)。

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Study on the preparation and stability of Isosorbide M ononitrate Sustained－release Tablets

YAN Xie-guo1，2，TAO An-jin2
（1.School of Pharmaceutical Sciences，Shandong University，Jinan 250012，China；2.Hybio Pharmaceutical Co.，Ltd.，Shenzhen 518057，China）

ObjectiveTo prepare Isosorbide Mononitrate Sustained－release Tablets，and to investigate the stability of the tablets.M ethodsThe formulation of sustained－release tablets of isosorbidemononitrate was optimized by uniform design，and hydroxypropylmethycellulose（HPMC）as matrix material.The release profile was compared with that of Imdur.The stability of tabletswas studied under conditions of（40±2）℃and relative humidity 75%±5%exposure.ResultsThe samples had the similar sustained－release property with that of Imdur.The tablets were stable to the temperature and relative humidity conditions of（40±2）℃and 75%±5%for 6 months.ConclusionPreparation process of Isosorbide Mononitrate Sustained－release Tablets was simple and the quality can be controlled，which met the requirement for large scale production.

Isosorbidemononitrate；Sustained－release tablets；Stability

R944.9

A

2095－5375（2014）11－0651－004

顏攜國(guó)，男，研究方向：藥物新劑型，E－mail：yanxieguo34＠126.com