邢琳琳，聶 磊

（1.山東大學(xué)藥學(xué)院，山東濟(jì)南250012；2.山東新華制藥股份有限公司，山東淄博255000）

GC法測(cè)定聚卡波非鈣中殘留異丙醇

邢琳琳1，2，聶 磊1

（1.山東大學(xué)藥學(xué)院，山東濟(jì)南250012；2.山東新華制藥股份有限公司，山東淄博255000）

目的建立頂空氣相色譜法測(cè)定聚卡波非鈣中殘留異丙醇的方法。方法采用氣相色譜頂空進(jìn)樣法，ZB－624毛細(xì)管柱，以氮?dú)鉃檩d氣，F(xiàn)ID檢測(cè)器。結(jié)果殘留異丙醇含量在50～5 000μg·g－1范圍內(nèi)具有良好的線性，線性方程為Y＝－2 933＋4 947X，相關(guān)系數(shù)r＝0.999 66（n＝5），平均回收率為94.6%，RSD＝1.79%，檢測(cè)限為2.5μg·g－1。結(jié)論該方法靈敏、準(zhǔn)確，可以有效控制聚卡波非鈣中異丙醇?xì)埩簟?/p>

聚卡波非鈣；異丙醇；氣相色譜法

聚卡波非鈣（calcium polycarbophil）最早由美國(guó)雅培公司開(kāi)發(fā)，在歐美、日本已廣泛使用，用于腸易激綜合征（IBS）及各種原因便秘癥狀的緩解。2011年9月，聚卡波非鈣片（商品名為利波非）在中國(guó)上市。該藥適用于不宜攝入鈉的患者，如水腫、高血壓、心衰的慢性便秘等患者［1］。在聚卡波非鈣原料藥的生產(chǎn)過(guò)程中用到了異丙醇，因此可能在聚卡波非鈣中殘留，異丙醇為《中國(guó)藥典》2010年版中規(guī)定的要求限制使用的第三類溶劑［2］，考慮到其毒害，為了聚卡波非鈣的用藥安全，需要建立準(zhǔn)確、可靠的分析方法用于聚卡波非鈣原料藥中殘留異丙醇含量的檢測(cè)［3～8］，對(duì)其殘留量加以控制，以確保藥品中殘留的異丙醇不會(huì)對(duì)人體造成危害。

1 儀器和試藥

1.1 儀器 氣相色譜儀（島津GC－2010），頂空進(jìn)樣器（PE Turbomatrix40），電子天平（Mettler XS105），色譜柱：ZB－624（6%氰丙基苯基－94%二甲基聚硅氧烷，30 m×0.53 mm，膜厚3.0μm）。

1.2 試藥 異丙醇（分析純）；水（超純水）；聚卡波非鈣（山東新華制藥股份有限公司，批號(hào)：14037、14038、14039）等。

2 方法和結(jié)果

2.1 色譜條件 采用程序升溫方式，柱溫：70℃保持7 min，以每分鐘30℃的升溫速率升至100℃，保持5 min；檢測(cè)器溫度：250℃；進(jìn)樣口溫度：150℃；檢測(cè)器：氫火焰離子化檢測(cè)器（FID）；載氣：N2；載氣流速：5 mL·min－1；分流比：10∶1。

自動(dòng)頂空進(jìn)樣器條件：爐溫：90℃；針溫：100℃；傳輸線溫度：105℃；加熱時(shí)間：30 min；加壓時(shí)間：2 min；進(jìn)樣體積：1 mL。

2.2 溶液制備 標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取異丙醇約0.1 g，于已加有少量超純水的100 mL容量瓶中，然后加超純水稀釋至刻度，搖勻，作為標(biāo)準(zhǔn)溶液A。取1.0 mL標(biāo)準(zhǔn)溶液A，于200 mL容量瓶中，加超純水至刻度，搖勻，作為標(biāo)準(zhǔn)溶液B。取標(biāo)準(zhǔn)溶液B 5.0 mL，于20 mL頂空瓶中，加1.0 g無(wú)水硫酸鈉，密封。

供試品溶液：精密稱取聚卡波非鈣樣品約200 mg，于50 mL的帶蓋離心管中，加10 mL超純水，密封離心管，劇烈振搖使樣品充分分散，然后在振蕩器上機(jī)械振搖60 min后（平放于振蕩器上），放在離心機(jī)內(nèi)，轉(zhuǎn)速2 000 rpm，離心10 min，將上清液小心轉(zhuǎn)移至20 mL容量瓶中；再加5 mL超純水，密封離心管，劇烈振搖，然后在振蕩器上機(jī)械振搖30 min后，離心10 min，將上清液小心轉(zhuǎn)移至同一20mL容量瓶中；再加5 mL超純水，重復(fù)上述操作，將上清液小心轉(zhuǎn)移至同一20 mL容量瓶中，用超純水稀釋至刻度，搖勻。取上述溶液5.0 mL，于20 mL頂空瓶中，加1.0 g無(wú)水硫酸鈉，密封。

樣品空白溶液：精密稱取已于105℃干燥48 h的聚卡波非鈣樣品0.2 g，按供試品溶液的制備方法制備。

2.3 專屬性測(cè)試 取空白溶液、標(biāo)準(zhǔn)溶液、樣品空白溶液、標(biāo)準(zhǔn)加樣品空白的混合溶液（向已于105℃干燥48 h的樣品中加入5.0 mL標(biāo)準(zhǔn)溶液和5.0 mL超純水，按樣品制備方法同法操作），依次放入自動(dòng)頂空進(jìn)樣器中，依法測(cè)定，結(jié)果空白溶液、樣品空白溶液中在異丙醇峰附近均無(wú)干擾峰。圖譜見(jiàn)1，2。

圖1 標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖

2.4 線性試驗(yàn) 精密稱取異丙醇適量，用水溶解并稀釋成每1 mL中分別含0.5、5、10、30、50μg的溶液，依法測(cè)定，以濃度（X）為橫坐標(biāo)，峰面積（Y）為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖，計(jì)算回歸方程，Y＝－2 933＋4 947X，r＝0.999 66（n＝5），異丙醇濃度在50～5 000μg·g－1范圍內(nèi)，具有良好的線性。

圖2 混合溶液色譜圖

2.5 回收率試驗(yàn) 精密稱取9份聚卡波非鈣（105℃干燥48 h）0.2 g，分別加入異丙醇溶液（10、100、1 000μg·mL－1）各1 mL，按供試品溶液制備方法同法制備，使測(cè)試液中異丙醇含量分別為0.5、5、50 μg·mL－1（每個(gè)濃度制備3份），取標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣6次、樣品空白溶液進(jìn)樣1次、準(zhǔn)確度測(cè)試液各進(jìn)樣1次，依法測(cè)定，平均回收率為94.6%，具有良好的準(zhǔn)確度。測(cè)試數(shù)據(jù)見(jiàn)表1。

表1 回收率試驗(yàn)結(jié)果

2.6 重復(fù)性試驗(yàn) 按標(biāo)準(zhǔn)溶液制備方法制備6份標(biāo)準(zhǔn)溶液于頂空瓶中，將頂空瓶依次放入自動(dòng)頂空進(jìn)樣其中，依法測(cè)定，計(jì)算異丙醇峰面積的RSD＝1.4%，重復(fù)性良好。

2.7 檢測(cè)限與定量限 取適當(dāng)濃度的異丙醇溶液加入樣品空白溶液中，依法制備，同法配制3個(gè)頂空瓶溶液。頂空進(jìn)樣測(cè)定，記錄色譜圖，當(dāng)信噪比S／N＝3時(shí)，即為異丙醇的檢測(cè)限，經(jīng)測(cè)定此時(shí)異丙醇濃度為0.025μg·mL－1，相當(dāng)于樣品中異丙醇含量2.5 ppm；當(dāng)信噪比S／N＝10時(shí)，即為異丙醇的定量限，經(jīng)測(cè)定此時(shí)異丙醇濃度為0.100μg·mL－1，相當(dāng)于樣品中異丙醇含量10.0 ppm。

2.8 樣品測(cè)定 分別取3個(gè)批號(hào)的聚卡波非鈣樣品（批號(hào)：14037、14038、14039），依法測(cè)定，結(jié)果3批樣品中均未檢出異丙醇?xì)埩簟?/p>

3 討論

3.1 本方法是應(yīng)日本雅培公司要求開(kāi)發(fā)。在此之前，中方和日方對(duì)聚卡波非鈣中殘留異丙醇的分析方法做了大量的研究工作，氣相色譜、液相色譜均做了方法研究。因聚卡波非鈣本身理化性質(zhì)的原因，到目前為止，該樣品尚未找到能有效溶解它的溶劑，給方法研究帶來(lái)很大難度。我們?cè)?jīng)嘗試用酸、堿破壞的方法對(duì)樣品進(jìn)行溶解，但酸堿試劑中存在的不明有機(jī)雜質(zhì)給方法的專屬性帶來(lái)很大的困難，在異丙醇峰附近存在很多比異丙醇峰峰面積大得多的不明峰，給檢測(cè)限、定量限和專屬性帶來(lái)干擾。通過(guò)全面考察聚卡波非鈣的整個(gè)工藝流程，我們最終確定了現(xiàn)有方法，經(jīng)過(guò)驗(yàn)證，該方法準(zhǔn)確可靠、重現(xiàn)性好，日本雅培公司對(duì)該方法予以了肯定和接受。

3.2 頂空瓶壓力的確定在方法開(kāi)發(fā)過(guò)程中，最初的頂空瓶加壓壓力定在10 psi（約0.069 MPa），但出現(xiàn)了頂空預(yù)進(jìn)樣現(xiàn)象，通過(guò)多次試驗(yàn)，最后調(diào)節(jié)頂空加壓壓力到13 psi（約0.090 MPa），預(yù)進(jìn)樣現(xiàn)象消除。

4 結(jié)論

用氣相色譜頂空進(jìn)樣法對(duì)聚卡波非鈣中殘留異丙醇進(jìn)行測(cè)定，回收率高，檢測(cè)靈敏度高，重現(xiàn)性好，測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確可靠，各項(xiàng)驗(yàn)證的結(jié)果均符合要求，證明該分析方法適用于聚卡波非鈣中殘留異丙醇的測(cè)定。

［1］ 韓振杰，袁耀宗.聚卡波非鈣的藥理及臨床研究［J］.中國(guó)新藥與臨床雜志，2012，31（6）：291－294.

［2］ 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典2010年版（二部）［S］.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄.

［3］ 趙勁松，張弘，周天杰，等.西沙比利原料中異丙醇?xì)埩袅康臍庀嗌V測(cè)定［J］.中國(guó)藥業(yè)，2003，12（4）：38－39.

［4］ 王春霞，王新牛，張言軍，等.用GC測(cè)定阿替洛爾片中異丙醇?xì)埩簦跩］.醫(yī)學(xué)信息，2013，26（4）：457－458.

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［7］ 馮光玲，丁文娟，馮愛(ài)國(guó)，等.毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定依諾昔酮原料藥中6種有機(jī)溶劑殘留量［J］.中國(guó)藥房，2014，25（13）：1210－1211.

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Determ ination of isopropanol in calcium polycarbophil by gas chromatography

XING Lin-lin1，2，NIE Lei1
（1.School of Pharmaceutical Sciences，Shandong University，Jinan 250012，China；2 Shandong Xinhua Pharmaceutical Co.，Ltd.，Zibo 255000，China）

ObjectiveUsing GCmethod for the determination of isopropanol in calcium polycarbophil.MethodsU-sing Head－Space GCmethod，the column was ZB－624 capillary column；The carrier gas was nitrogen and FID detector was adopted.ResultsIsopropanol had a good linearity in the range of 50～5 000μg·g－1，the linear equation was Y＝－2 933＋4 947X（r＝0.999 66）（n＝5）.The average recovery was 94.6%，and the RSD＝1.79%.The detectability was 2.5μg·g－1.ConclusionThemethod was sensitive and accurate，and suitable for the determination of isopropanol in calcium polycarbophil.

Calcium polycarbophil；Isopropanol；GC

R927.1

A

2095－5375（2014）08－0461－003

山東省研究生教育創(chuàng)新計(jì)劃（No.SDYY12074）

邢琳琳，女，研究方向：藥物分析，E－mail：13853328043＠163.com

聶磊，男，博士研究生，副教授，研究方向：中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)，Tel：0531－88382330，E－mail：nielei2004＠sdu.edu.cn