齊 勇，聶 磊

（1.山東大學(xué)藥學(xué)院，山東濟(jì)南250012；2.山東新華制藥股份有限公司，山東淄博255000）

HPLC法測(cè)定布洛芬鈉有關(guān)物質(zhì)

齊 勇1，2，聶 磊1

（1.山東大學(xué)藥學(xué)院，山東濟(jì)南250012；2.山東新華制藥股份有限公司，山東淄博255000）

目的采用高效液相色譜法測(cè)定布洛芬鈉有關(guān)物質(zhì)。方法儀器：高效液相色譜儀（紫外檢測(cè)器）；色譜柱：Supelco discovery C18（4.0 mm×150 mm，5μm）；流動(dòng)相：水（用H3PO4調(diào)pH為2.5）－乙腈（66∶34）；檢測(cè)波長(zhǎng)：214 nm；柱溫：（30±0.5）℃；流速：2 mL·min－1；進(jìn)樣體積：5μL。結(jié)果布洛芬鈉主峰與雜質(zhì)B主峰分離度為3.0，分離良好；布洛芬鈉鹽檢測(cè)限為0.100 6μg·mL－1，定量限為0.503μg·mL－1；雜質(zhì)B檢測(cè)限為0.06μg· mL－1，定量限為0.24μg·m L－1；精密度：樣品雜質(zhì)含量測(cè)試結(jié)果的RSD＝0＜2.0%。結(jié)論該方法靈敏、簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確，適用于布洛芬鈉有關(guān)物質(zhì)的測(cè)定。

高效液相色譜法；布洛芬鈉；有關(guān)物質(zhì)

布洛芬鈉是布洛芬的鈉鹽產(chǎn)品，與布洛芬一樣，具有解熱鎮(zhèn)痛及抗炎作用。用于扭傷、勞損、下腰疼痛、肩周炎、滑囊炎、肌腱及腱鞘炎、牙痛和術(shù)后疼痛、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎以及其他血清陰性（非類風(fēng)濕性）關(guān)節(jié)疾病［1］。可以減輕中度疼痛，如關(guān)節(jié)痛、肌肉痛、偏頭痛、頭痛、牙痛、痛經(jīng)、神經(jīng)痛，也可用于減輕普通感冒或流行性感冒引起的發(fā)熱［2］。相關(guān)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)沒(méi)有對(duì)其有關(guān)物質(zhì)的測(cè)定方法做出規(guī)定。本文建立了布洛芬鈉有關(guān)物質(zhì)的HPLC測(cè)定方法，該方法操作簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確度高及重現(xiàn)性好，為布洛芬鈉有關(guān)物質(zhì)的準(zhǔn)確定量提供參考。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器 島津LC－20AT高效液相色譜儀，色譜柱為Supelco discovery C18（4.0 mm×150 mm，5 μm）。

1.2 試藥及溶液配制 2－（4－正丁基苯）丙酸（雜質(zhì)B），批號(hào)：7.0，EDQM官方購(gòu)買；布洛芬鈉，批號(hào)：1308002，山東新華制藥生產(chǎn)；苯戊酮，批號(hào)：A0105592；乙腈為色譜純；磷酸、磷酸二氫鉀、氫氧化鈉均為分析純?cè)噭?/p>

稀釋液：稱取磷酸二氫鉀約6.8 g，用水溶解至1 000 mL，用50%氫氧化鈉溶液調(diào)pH至7.2，再加1 000 mL甲醇，混勻［3］。

2－（4－正丁基苯）丙酸溶液：量取2－（4－正丁基苯）丙酸對(duì)照品1.0 mL，加乙腈稀釋至10.0 mL，取此溶液1.0 mL用稀釋液稀釋到10.0 mL，搖勻。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 采用等度洗脫方式，流動(dòng)相：水（用H3PO4調(diào)pH為2.5）－乙腈（66∶34）；檢測(cè)波長(zhǎng)：214 nm；柱溫：（30±0.5）℃；流速：2 mL· min－1；進(jìn)樣體積：5μL；記錄至布洛芬主峰保留時(shí)間的2倍。

2.2 專屬性 取布洛芬鈉120 mg，加2－（4－正丁基苯）丙酸溶液1.0 mL，用稀釋液制成100.0 mL，進(jìn)樣測(cè)定，布洛芬鈉主峰與2－（4－正丁基苯）丙酸峰分離度為3.0，分離良好。取布洛芬鈉分別在紫外光照、高溫、酸、堿、氧化條件下破壞，按本方法分別進(jìn)行測(cè)定［4］，結(jié)果表明，未破壞的樣品與紫外光照、高溫、酸化、堿化破壞后的樣品單個(gè)最大雜質(zhì)均為0.06%，總雜質(zhì)均為0.17%，雜質(zhì)個(gè)數(shù)均為5個(gè)。氧化破壞后的樣品單個(gè)最大雜質(zhì)為0.50%，總雜質(zhì)為1.24%，雜質(zhì)個(gè)數(shù)為11個(gè)，布洛芬鈉在紫外光照、高溫、酸、堿條件下雜質(zhì)數(shù)量及含量無(wú)明顯變化，在氧化條件下雜質(zhì)個(gè)數(shù)及含量增加顯著，證明布洛芬鈉在氧化條件下有明顯的降解。本方法對(duì)各雜質(zhì)分離良好，對(duì)測(cè)定無(wú)干擾，專屬性符合要求，圖譜見(jiàn)圖1～7。

圖1 分離度色譜圖

圖2 未破壞樣品色譜圖

圖3 紫外光照破壞色譜圖

圖4 高溫破壞色譜圖

圖5 酸化破壞色譜圖

2.3 精密度 取樣品0.12 g，置100 mL容量瓶中，用稀釋液溶解并稀釋至刻度，搖勻。連續(xù)進(jìn)樣6次，6次雜質(zhì)含量測(cè)試結(jié)果的RSD為0＜2.0%，精密度符合要求［5］，測(cè)試數(shù)據(jù)見(jiàn)表1。

表1 精密度測(cè)試數(shù)據(jù)

2.4 檢測(cè)限與定量限

圖6 堿化破壞色譜圖

圖7 氧化破壞色譜圖

2.4.1 布洛芬鈉的檢測(cè)限和定量限 取布洛芬鈉稀釋進(jìn)樣測(cè)定，按3倍信噪比計(jì)算，布洛芬鈉的檢測(cè)限為0.100 6μg·mL－1；取布洛芬鈉稀釋進(jìn)樣測(cè)定，按10倍信噪比計(jì)算，布洛芬鈉的定量限為0.503μg·mL－1。

2.4.2 2－（4－正丁基苯）丙酸（雜質(zhì)B）的檢測(cè)限和定量限 取2－（4－正丁基苯）丙酸稀釋進(jìn)樣測(cè)定，按3倍信噪比計(jì)算，2－（4－正丁基苯）丙酸的檢測(cè)限0.06μg·mL－1；取2－（4－正丁基苯）丙酸稀釋進(jìn)樣測(cè)定，按10倍信噪比計(jì)算，2－（4－正丁基苯）丙酸的定量限0.24μg·mL－1［6］。

2.5 溶液穩(wěn)定性 取布洛芬鈉樣品溶液在溶液制備后的0、2、4、8、12和24 h，分別進(jìn)樣測(cè)定，統(tǒng)計(jì)有關(guān)物質(zhì)測(cè)定結(jié)果，各項(xiàng)雜質(zhì)含量變化均＜0.02%，可認(rèn)為布洛芬鈉樣品溶液在24 h內(nèi)雜質(zhì)含量無(wú)顯著性變化，溶液在24 h內(nèi)是穩(wěn)定的，測(cè)試結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 溶液穩(wěn)定性測(cè)試數(shù)據(jù)

2.6 布洛芬鈉樣品測(cè)定 分別取連續(xù)5個(gè)批號(hào)的布洛芬鈉120 mg，加稀釋液溶解稀釋至100 mL，作為供試品溶液；精密量取供試品溶液1 mL，加流動(dòng)相稀釋至100 mL，取1 mL上述溶液稀釋至10 mL，作為對(duì)照溶液。按上述色譜條件測(cè)定，按主成分自身對(duì)照法計(jì)算雜質(zhì)含量，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 布洛芬鈉有關(guān)物質(zhì)的測(cè)定

3 討論

3.1 在布洛芬鈉質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中，單個(gè)最大雜質(zhì)要求≤0.10%，總雜質(zhì)要求≤0.30%，從“2.6”項(xiàng)下的檢測(cè)數(shù)據(jù)可以看出，單個(gè)最大雜質(zhì)已接近限度，因此建立布洛芬鈉有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)方法對(duì)其有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行質(zhì)量控制是十分必要的［7］。

3.2 在布洛芬鈉的生產(chǎn)原料布洛芬的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中，《美國(guó)藥典》規(guī)定：雜質(zhì)2－（4－正丁基苯）丙酸不得過(guò)0.1%，其他單個(gè)雜質(zhì)不得過(guò)0.1%，總雜質(zhì)不得過(guò)0.3%。在參考上述規(guī)定的基礎(chǔ)上，從嚴(yán)要求限度，制定本次布洛芬鈉有關(guān)物質(zhì)的限度為：?jiǎn)蝹€(gè)最大雜質(zhì)≤0.10%，總雜質(zhì)≤0.30%，“2.6”項(xiàng)下的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，5批布洛芬鈉樣品均符合規(guī)定［8］。

3.3 本文只對(duì)雜質(zhì)2－（4－正丁基苯）丙酸進(jìn)行了研究，沒(méi)有對(duì)其他雜質(zhì)進(jìn)行進(jìn)一步分析，下一步工作中將對(duì)其他雜質(zhì)進(jìn)行研究，達(dá)到對(duì)布洛芬鈉有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行更好地質(zhì)量控制。

4 結(jié)論

用HPLC法測(cè)定布洛芬鈉有關(guān)物質(zhì)，回收率高，重現(xiàn)性好，測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確可靠，該法適用于布洛芬鈉有關(guān)物質(zhì)含量的測(cè)定。

［1］ 李成平，施青紅，李立，等.高效液相色譜手性流動(dòng)相法拆分布洛芬對(duì)映體［J］.藥物分析雜志，2005，25（4）：426－428.

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［5］ 國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局.藥物研究技術(shù)指導(dǎo)原則（2005年）［M］.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2005：17－27.

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Determ ination of the related substances in ibuprofen sodium by HPLC

QIYong1，2，NIE Lei1
（1.School of Pharmaceutical Sciences，Shandong University，Jinan 250012，China；2.Shandong Xinhua Pharmaceutical Co.，Ltd.，Zibo 255000 China）

ObjectiveTo establish an HPLCmethod for the determination of the related substances in ibuprofen sodium.MethodsInstrument：HPLC（UV detector），column：Supelco discovery C18（4.0 mm×150 mm，5μm），mobile phase：water（adjusted pH to 2.5 with phosphoric acid）－acetonitrile（66∶34），the detection wavelength was 214 nm，the column temperaturewas（30±0.5）℃；The flow ratewas2 mL·min－1and the inject volume was5μL.ResultsThemain peak of ibuprofen sodium was separated from impurity B completely，the resolution was3.0；The limitof detection（LOD）of ibuprofen sodium was0.100 6μg·m L－1，and its limit of quantitation（LOQ）was0.503μg·m L－1；The LOD of impurity B was 0.06μg·mL－1，and its LOQ was 0.24μg·mL－1；Precision：the RSD of test results of sample impuritieswas 0＜2.0%.ConclusionThemethod was highly selective，simple and accurate，and was suitable for the determination of related substances in ibuprofen sodium.

HPLC；Ibuprofen sodium；Related substances

R927.1

A

2095－5375（2014）08－0446－003

山東省自然科學(xué)基金（No.ZR2011HM080）

齊勇，男，研究方向：藥物分析，E－mail：43934617＠qq.com

聶磊，男，博士研究生，副教授，研究方向：中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)，Tel：0531－88382330，E－mail：nielei2004＠sdu.edu.cn