郭乃勇 仇國琴

（鹽城市鹽都區(qū)動(dòng)物檢疫站，江蘇鹽城 224001）

小型奶牛場布魯氏菌病的流行病學(xué)及防治對策

郭乃勇 仇國琴

（鹽城市鹽都區(qū)動(dòng)物檢疫站，江蘇鹽城 224001）

通過采用虎紅平板凝集試驗(yàn)法初檢，試管凝集實(shí)驗(yàn)復(fù)檢的方法對鹽城市某個(gè)感染了布病的奶牛場檢測，通過對奶牛場108頭奶牛布病的檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)陽性奶牛數(shù)為8頭。在現(xiàn)有的檢測方法和淘汰處理的基礎(chǔ)上，結(jié)合改進(jìn)現(xiàn)有的檢測方法，采取有效的措施控制和撲滅布病的發(fā)生。

布魯氏菌?。涣餍胁W(xué)；防制；對策

1 材料與方法

目前本實(shí)驗(yàn)室常用的方法是虎紅平板凝集試驗(yàn)法（RBPT）和試管凝集法

1.1 虎紅平板凝集試驗(yàn)

1.1.1 檢測材料:布病虎紅平板診斷液（購于中國農(nóng)科所），玻璃平板，被檢血樣（鹽城市某奶牛場）。

1.1.2 檢測方法

（1）離心被檢血樣，10000轉(zhuǎn)速離心5分鐘，提取血清備用。

（2）洗凈玻璃平板，干燥

（3）無菌環(huán)境下用30um移液器將虎紅平板診斷液整齊滴于平板上

（4）用30ul移液器分別取步驟a 所提取被檢血清與平板上虎紅平板診斷液混合，靜置三分鐘

1.2 試管凝集試驗(yàn)

1.2.1 材料:稀釋液，經(jīng)虎紅平板凝集試驗(yàn)檢測呈陽性的血清，布病標(biāo)準(zhǔn)抗原（購于中國農(nóng)科所），試管架，小試管及滅菌吸管等。

1.2.2 方法

（1）被檢血清的稀釋度：本次實(shí)驗(yàn)采用1：50，1：100，1：200，1：400四個(gè)稀釋度.

（2）血清的稀釋與抗原的加入：見表1

（3）出現(xiàn)50%以上的凝集的最高稀釋度為血清的凝集價(jià)，試管充分振蕩后，置37～38℃溫箱中，22～24h后用比濁管進(jìn)行比濁并記錄結(jié)果（比濁管的制作：見表2）。

表1 試管凝集試驗(yàn)步驟

表2 比濁管的配制

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 虎紅平板凝集試驗(yàn)

反應(yīng)后出現(xiàn)絮狀沉淀顆粒的判為陽性。

本次實(shí)驗(yàn)檢測的奶牛數(shù)為108頭，檢出布病陽性奶牛數(shù)為10頭。

2.2 試管凝集試驗(yàn)

本次實(shí)驗(yàn)檢測出陽性8頭。

3 試驗(yàn)結(jié)果分析

表3 虎紅平板凝集試驗(yàn)和試管凝集試驗(yàn)比較

通過用虎紅平板凝集試驗(yàn)和試管凝集試驗(yàn)對鹽城地區(qū)采集的108份奶牛血清進(jìn)行檢測，其中用虎紅平板凝集試驗(yàn)檢出10份為陽性，檢出率為9.3%，用試管凝集試驗(yàn)檢出8份陽性，檢出率為7.4%?；⒓t平板的敏特率、特異性分別為100%和98%。

4 小結(jié)與討論

4.1 試驗(yàn)小結(jié)

我們先用虎紅平板凝集試驗(yàn)法檢出陽性血清，再用試管凝集法對這些陽性血清進(jìn)行復(fù)檢。從檢測結(jié)果可以看出，發(fā)生陽性的奶牛比較集中，分析認(rèn)為可能為某一奶牛感染后未及時(shí)檢出進(jìn)而向兩旁傳染造成。故及時(shí)進(jìn)行迅速有效的檢測十分重要。

4.2 布魯氏菌病發(fā)病率持續(xù)上升的原因分析

（1）大力發(fā)展奶牛業(yè)，通過市場大流通，疫病有了更為廣泛的流通主體。

（2）儀器設(shè)備不到位

儀器設(shè)備陳舊，檢疫技術(shù)落后難以適應(yīng)檢疫任務(wù)。

（3）養(yǎng)殖戶盲目購進(jìn)淘汰奶牛，給當(dāng)?shù)仞B(yǎng)牛業(yè)帶來了嚴(yán)峻的考驗(yàn)。

由于工作宣傳力度不大，不全面，范圍小，布魯氏菌病的檢疫工作未真正得到各級政府領(lǐng)導(dǎo)的重視，另外，一些養(yǎng)殖戶對檢疫的認(rèn)識不夠，對其目的和作用不理解，出于自身利益，在檢疫人員進(jìn)行檢疫時(shí)不配合工作，甚至逃避檢疫，甚至盲目購進(jìn)淘汰奶牛，給徹底杜絕疫病的流行設(shè)置了極大的障礙。

4.3 防治對策

4.3.1 建立可靠快速的檢測方法。傳統(tǒng)方法的凝集試驗(yàn)（包括試管凝集試驗(yàn)、平板凝集試驗(yàn)）法檢測率不高，假陽性率很高，在發(fā)達(dá)國家已基本上停止使用。取代的方法是緩沖布魯氏菌抗原試驗(yàn)，包括卡片試驗(yàn)、虎紅平板凝集試驗(yàn)（RBPT）、緩沖平板凝集試驗(yàn)（BBAT）。在國際貿(mào)易中，緩沖布魯氏菌抗原試驗(yàn)是牛、羊、豬種布魯氏菌病診斷的指定試驗(yàn)，作為篩選試驗(yàn)用。

4.3.2 采取有效的生物安全手段。推廣以“檢疫、免疫、捕殺病畜”的綜合性防治措施，同時(shí)針對疾病流行的三個(gè)環(huán)節(jié)采取相應(yīng)措施，

（1）管理傳染源 對牧場、乳廠和屠宰場的牲畜定期衛(wèi)生檢查。檢出的病畜，及時(shí)隔離治療，必要時(shí)宰殺之。病畜的流產(chǎn)物及死畜必需深埋。對其污染的環(huán)境用20%漂白粉或10%石灰乳消毒。病畜乳及其制品必需煮沸消毒。皮毛消毒后還應(yīng)放置三個(gè)月以上，方準(zhǔn)其運(yùn)出疫區(qū)。

病、健畜分群分區(qū)欄養(yǎng)，病畜用過的牧場需經(jīng)三個(gè)月自然凈化后才能供健康畜使用。

（2）切斷傳播途徑 加強(qiáng)對畜產(chǎn)品的衛(wèi)生監(jiān)督，禁食病畜肉及乳品。防止病畜或患者的排泄物污染水源。對與牲畜或畜產(chǎn)品接觸密切者，要進(jìn)行宣傳教育，做好個(gè)人防護(hù)。

（3）保護(hù)易感人群及健康家畜 除注意防護(hù)外，重要措施是進(jìn)行菌苗免疫。

做好收購、調(diào)運(yùn)、飼養(yǎng)、屠宰等各級檢疫，如：在收購時(shí)發(fā)現(xiàn)可以病畜（如關(guān)節(jié)炎、睪丸炎、流產(chǎn)等）應(yīng)進(jìn)行隔離處理；在運(yùn)輸布魯氏菌病患畜時(shí)，應(yīng)按指定路線走，不得與當(dāng)?shù)匦笕航佑|，防止傳播等。

4.3.3 采取疫苗免疫和撲殺相結(jié)合的方法是目前控制疫病流行的有效方法。隨著奶牛業(yè)的不斷壯大與經(jīng)濟(jì)投入的不斷增加，靠單純的撲殺已經(jīng)不現(xiàn)實(shí)，根據(jù)現(xiàn)行的生產(chǎn)管理制度可以了解到每年有20%的奶牛因?yàn)楦腥静剪斒暇粨錃?，這樣造成的經(jīng)濟(jì)損失是極其巨大的。通過研究和不斷的摸索，目前正在走上一條把使用疫苗和撲殺相結(jié)合的道路。