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        規(guī)模化豬場致病性仔豬黃白痢大腸桿菌耐藥性檢測

        2014-02-27 03:13:32毛君婷姜玲玲史開志
        獸醫(yī)導(dǎo)刊 2014年8期
        關(guān)鍵詞:耐藥

        毛君婷姜玲玲史開志

        (1.貴陽市花溪區(qū)農(nóng)業(yè)局,貴州貴陽 550025;2.貴州省畜牧獸醫(yī)研究所,貴州貴陽 550005)

        規(guī)?;i場致病性仔豬黃白痢大腸桿菌耐藥性檢測

        毛君婷1姜玲玲2史開志2

        (1.貴陽市花溪區(qū)農(nóng)業(yè)局,貴州貴陽 550025;2.貴州省畜牧獸醫(yī)研究所,貴州貴陽 550005)

        為揭示規(guī)?;i場致病性仔豬黃白痢大腸桿菌的耐藥性,為生豬養(yǎng)殖選擇用藥提供借鑒,2012年至2014年期間,通過細(xì)菌分離鑒定,從貴州省貴陽市21家發(fā)生仔豬黃白痢的規(guī)?;i場分離得到21株致病性仔豬黃白痢大腸桿菌。藥物敏感性檢測結(jié)果表明,分離細(xì)菌不同比例地對14種獸醫(yī)常用抗生素表現(xiàn)耐藥性,鏈霉素和氨芐青霉素耐藥性最為嚴(yán)重;頭孢噻呋鈉和氟苯尼考是較為敏感的抗生素藥物,但隨著時(shí)間推移,頭孢噻呋鈉和氟苯尼考的敏感菌株比例在逐步下降。

        規(guī)模化豬場;仔豬黃白??;致病性大腸桿菌;耐藥性

        致病性大腸桿菌是仔豬黃白痢的病原,在生豬養(yǎng)殖中嚴(yán)重威脅和危害新生和哺乳仔豬,可導(dǎo)致仔豬群體性腹瀉和死亡,是仔豬生產(chǎn)過程中重點(diǎn)防治的疫病[1]。由于該菌血清類型眾多,不同地區(qū)甚至相同地區(qū)不同養(yǎng)殖場之間優(yōu)勢血清型常各不相同,而不同血清型之間不存在明顯的交叉保護(hù),疫苗免疫通常不能獲得理想的防控效果,長期以來主要依賴抗生素預(yù)防和治療仔豬黃白痢[2]。

        雖然抗生素的大量使用在防控仔豬黃白痢的過程中曾取得重大功效,但抗生素的選擇壓力同時(shí)導(dǎo)致了耐藥菌株的不斷涌現(xiàn),為這一疾病的防控帶來了新的困擾和挑戰(zhàn)[3]。為揭示規(guī)?;i場致病性仔豬黃白痢大腸桿菌耐藥動態(tài),筆者對2012年至2014年期間貴州省貴陽市21個(gè)發(fā)生仔豬黃白痢的規(guī)?;i場進(jìn)行致病性大腸桿菌分離鑒定,并通過藥物敏感性試驗(yàn)對21株分離的病原菌耐藥性進(jìn)行檢測,為規(guī)?;i場利用抗生素有效應(yīng)對仔豬黃白痢提供參考和借鑒。

        1 材料與方法

        1.1 試驗(yàn)材料

        營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基和麥康凱培養(yǎng)基為北京奧博星生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品;大腸桿菌生化鑒定管及藥敏片購自杭州微生物試劑有限公司,氟苯尼考和頭孢噻呋鈉(藥敏片自制)為成都中牧生物藥業(yè)有限公司產(chǎn)品;試驗(yàn)小白鼠購至貴陽醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心;大腸桿菌質(zhì)控菌株ATCC25922購自中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所。

        1.2 致病性菌株分離鑒定

        用滅菌直腸拭紙無菌操作采集發(fā)生黃痢或白痢的仔豬肛門樣本,接種麥康凱培養(yǎng)基、伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基進(jìn)行大腸桿菌分離純化,通過革蘭氏染色鏡檢進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定,根據(jù)大腸桿菌生化特征進(jìn)行生化特性鑒定、通過小白鼠接種試驗(yàn)進(jìn)行分離細(xì)菌致病性鑒定。

        1.3 分離致病性大腸桿菌耐藥性檢測

        利用大腸桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC25922進(jìn)行質(zhì)控,按照世界衛(wèi)生組織(WHO)推薦的K-B法,對分離得到的致病性大腸桿菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn),抗生素種類及判斷標(biāo)準(zhǔn)見表1。

        表1 藥敏片名稱及敏感性判斷標(biāo)準(zhǔn)

        1.4 不同年度流行菌株耐藥性比較

        根據(jù)分離細(xì)菌流行年限對其進(jìn)行劃分,比較不同年度流行菌株對同一種抗生素的耐藥比例變化。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 致病性仔豬黃白痢大腸桿菌分離鑒定

        通過細(xì)菌分離純化、革蘭氏染色鏡檢、生化圖譜鑒定和小白鼠接種試驗(yàn),從21個(gè)發(fā)生仔豬黃白痢的規(guī)?;i養(yǎng)殖中,共分離到33株大腸桿菌,其中12株大腸桿菌接種小白鼠后無致病性,分別分離自12家豬場;21株大腸桿菌為致病性菌株,來自21個(gè)不同豬場。從分離年限看,2012年分離8株、2013年分離9株、2014年分離4株。

        2.2 分離致病菌耐藥性測試

        通過藥敏試驗(yàn),對21株分離致病菌進(jìn)行耐藥性檢測,結(jié)果見表2。

        表2 分離致病菌耐藥性檢測

        從表2可見,在14種獸醫(yī)常用抗生素中,分離菌株出現(xiàn)不同程度的耐藥,其中鏈霉素耐藥最為嚴(yán)重,共有16株病原菌出現(xiàn)耐藥性;耐藥性最為輕微的是頭孢噻呋鈉,僅4株耐藥。沒有發(fā)現(xiàn)一種抗生素對所有分離菌株均表現(xiàn)敏感。

        2.3 不同時(shí)間分離菌株耐藥性比較

        將分離菌株按流行時(shí)間分類,比較不同年度流行菌株耐藥比例變化,發(fā)現(xiàn)變化最大的抗生素為頭孢噻呋鈉,在2012年分離的8株致病菌中,僅有1株細(xì)菌耐藥,2013年分離的9株細(xì)菌中,2株出現(xiàn)耐藥,2014年分離的4株中,1株細(xì)菌出現(xiàn)耐藥;其次是氟苯尼考2012年,8株分離菌中,耐藥菌株僅2株,2013年,檢測的9株細(xì)菌中,4株耐藥,2014年,4株流行菌株中2株耐藥。其它12種抗生素,各年流行菌株中耐藥菌株比例變化并不明顯。

        3 討論

        2012年至2014年期間,從貴州省貴陽市21家發(fā)生仔豬黃白痢的豬場分離到致病性仔豬黃白痢大腸桿菌21株,利用14種生豬養(yǎng)殖中常用的抗生素,測定分離菌株的藥物敏感性,發(fā)現(xiàn)分離菌株出現(xiàn)不同程度耐藥。

        致病菌耐藥性的出現(xiàn),給仔豬黃白痢的藥物防控帶了了困難。從試驗(yàn)檢測的結(jié)果看,分離菌株中,大部分菌株出現(xiàn)嚴(yán)重的多重耐藥,這可能是近年來養(yǎng)殖場仔豬黃白痢藥物預(yù)防和治療效果較差的原因。針對耐藥細(xì)菌的出現(xiàn),豬場應(yīng)針對性地選擇敏感抗生素進(jìn)行仔豬黃白痢的的預(yù)防和治療,從而保證治療效果和節(jié)約用藥成本。從對21株致病性大腸桿菌的藥物敏感性檢測結(jié)果看,頭孢噻呋鈉是最理想的仔豬黃白痢預(yù)防和治療用藥;其次是氟苯尼考和頭孢噻肟;四環(huán)素、多西環(huán)素、阿米卡星和多粘菌素有一定的預(yù)防和治療可能,但比例敏感細(xì)菌比較低;其它的藥物敏感性很低,特別是氨芐青霉素和鏈霉素,從藥敏試驗(yàn)結(jié)果看,已不適于仔豬黃白痢的預(yù)防和治療。

        細(xì)菌隨在抗生素的選擇壓力下,其耐藥譜會發(fā)生變化。通過對不同年度分離病原菌耐藥性進(jìn)行比較,發(fā)現(xiàn)在2012年屬于比較敏感的頭孢噻呋鈉和氟苯尼考,在2013和2014年具有耐藥性的菌株比例已經(jīng)大幅上升。這可能是因?yàn)樵?012年和2013年中,因?yàn)樯显V2種抗生素比較敏感,治療效果較好,因此豬場大量使用,從而導(dǎo)致了抗頭孢噻呋鈉和抗氟苯尼考的病原菌比例的上升。針對這一現(xiàn)象,規(guī)?;i場在選擇抗生素預(yù)防和治療仔豬黃白痢時(shí),不應(yīng)該長期只依靠少數(shù)幾種抗生素,應(yīng)定期篩選敏感藥物并適度交替使用,盡量縮短耐藥菌株出現(xiàn)的時(shí)間。

        [1] 蔡寶祥.家畜傳染病學(xué)(第四版)[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2001.

        [2] 王秀梅,蔣紅霞,廖曉萍,等.豬源致病性大腸桿菌的血清型、毒力基因及抗菌藥耐藥性的調(diào)查[J].中國農(nóng)業(yè)科學(xué),2010,43(19):4109-4115.

        [3] 湯景元,王紅寧,張鵬舉,等.95個(gè)豬場大腸桿菌耐藥表型及氨基糖苷類藥物耐藥基因型調(diào)查[J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào),2008,39(4):472-477.

        毛君婷(1985-),女, 重慶銅梁人,碩士,主要從事畜牧獸醫(yī)技術(shù)推廣,通訊作者:史開志。

        貴州省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)(生豬)產(chǎn)業(yè)體系疫病防制功能實(shí)驗(yàn)室建設(shè)(GZCYTX2013-0902);貴州省科技廳農(nóng)業(yè)攻關(guān)項(xiàng)目(黔科合NY[2013]3072);貴陽市科技特派員計(jì)劃項(xiàng)目(筑科合同[2011207]27號);貴州省科技廳改革轉(zhuǎn)制項(xiàng)目(黔科合體Z字[2012]4004號)。

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