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（山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，山東泰安 271000）

山東牛場常見傳染病血清流行病學(xué)調(diào)查

岳瑞超，程子龍，李寧，劉思當(dāng)

（山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，山東泰安 271000）

2013年7月到2014年1月，從山東省濟南市某奶牛場、濟寧市某肉牛場、萊西市某奶牛場隨機采集牛血清共266份，應(yīng)用虎紅平板凝集試驗（RBPT）、試管凝集試驗（SAT）及ELISA試驗進行布魯氏菌病抗體檢測；應(yīng)用口蹄疫A型、亞洲I型、O型液相阻斷ELISA檢測試劑盒分別檢測3個血清型口蹄疫抗體水平。應(yīng)用牛傳染性鼻氣管炎gB抗體及牛病毒性腹瀉-黏膜病抗體ELISA檢測試劑盒檢測兩病抗體。結(jié)果顯示，山東省某些奶牛群存在不同程度的布魯氏菌感染，總陽性率高達10.5%，肉牛群陽性率為0；不同牛場三型口蹄疫抗體陽性率差異明顯，口蹄疫A型、亞I型和O型抗體平均陽性率分別為65.4%、70.3%和77.8%；傳染性鼻氣管炎的抗體陽性率為27%，病毒性腹瀉-黏膜病的抗體陽性率為38.3%。針對以上血清學(xué)檢測結(jié)果，對牛場上述疫病的防控進行了分析。

布病；口蹄疫；傳染性鼻氣管炎；黏膜病；抗體檢測；防治

2003年我國公布的一、二、三類動物疫病病種名錄中，將口蹄疫列為一類第一位烈性傳染病，布魯氏菌病、傳染性鼻氣管炎（IBR）列為二類動物疫病，牛病毒性腹瀉-黏膜?。˙VD）列為三類動物疫病。為及時了解當(dāng)前山東省布病、傳染性鼻氣管炎、黏膜病的感染狀態(tài)，對口蹄疫的免疫狀況，以便為山東省規(guī)模牛場主要傳染病的防控提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和科學(xué)依據(jù)，2013年7月到2014年1月，從山東省3個不同地區(qū)3個規(guī)模化牛場共采集266份牛血清進行了初步調(diào)查，并將調(diào)查結(jié)果進行了分析討論。

1 材料與方法

1.1 材料

布魯氏菌虎紅平板凝集抗原及試管凝集抗原均購自中國疾病預(yù)防控制中心，布魯氏菌抗體檢測ELISA試劑盒、牛傳染性鼻氣管炎gB抗體檢測試劑盒、牛病毒性腹瀉-黏膜病抗體檢測試劑盒均購于IDEXX公司，口蹄疫A型、亞洲I型及O型液相阻斷ELISA診斷試劑盒由內(nèi)蒙古金宇集團提供。

1.2 方法

布病抗體檢測（虎紅平板凝集試驗、試管凝集試驗）按照中華人民共和國國家標(biāo)準（ GB/ T18646 -2002）操作[1]，布病、口蹄疫、傳染性鼻氣管炎、牛病毒性腹瀉-黏膜病的抗體檢測均按照ELISA試劑盒的說明書進行操作。

2 結(jié)果

對濟南148份奶牛血清及濟寧76份肉牛血清、萊西42份奶牛血清進行布病抗體檢測，結(jié)果見表1，表2；口蹄疫抗體檢測見表3，表4；傳染性鼻氣管炎抗體檢測見表5；病毒性腹瀉-黏膜病的抗體檢測見表6。結(jié)果顯示，山東省被檢奶牛群的布魯氏菌陽性率高達10.5%，肉牛陽性率為0；在被檢的牛群中，口蹄疫抗體水平合格率分別為：口蹄疫A型65.4%，亞洲I型70.3%，口蹄疫O型77.8%；傳染性鼻氣管炎以及病毒性腹瀉-黏膜病也存在不同程度的感染，總體陽性率分別為27%，38.3%。

表1布魯氏菌檢測結(jié)果

表2布魯氏菌檢測匯總

表3口蹄疫檢測結(jié)果

表4口蹄疫檢測結(jié)果匯總

表5傳染性鼻氣管炎抗體檢測結(jié)果

表6黏膜病抗體檢測結(jié)果

3 分析

3.1 布魯氏菌病是一種人畜共患的慢性傳染病 ，以生殖器官和胎膜發(fā)炎、流產(chǎn)、不育、死胎為特征。本病可通過正常的皮膚、黏膜侵入機體 ，也可通過呼吸道、消化道和生殖道傳染[2]。我國目前對牛群不實行布魯氏菌病疫苗的接種 ，而是定期對牛群進行血清學(xué)檢測 ，剔除布魯氏菌病陽性牛 ，保證生產(chǎn)者和消費者的身體健康 。目前國家法定的布病檢測方法是虎紅平板凝集試驗進行初篩，通過試管凝集試驗對陽性樣品進行確認。虎紅平板凝集試驗具有操作簡單、成本低廉、用時短等優(yōu)點，適合于田間大規(guī)模檢測，但是特異性和靈敏度都不高。試管凝集試驗準確性高，但是操作煩瑣，用時較長。ELISA方法敏感性高、特異性強，而且操作簡便，用時短，而且從本次調(diào)查數(shù)據(jù)來看，IDEXX公司生產(chǎn)的ELISA試劑盒與試管凝集試驗的檢測結(jié)果完全一致，因此可以作為布病確診的輔助方法。本次調(diào)查結(jié)合三種方法對山東省濟南、濟寧、萊西三處牛場進行抽樣檢測，檢測結(jié)果顯示：肉牛群為陰性，可能與肉牛的生長周期短用，還未達到易感年齡有關(guān)。因為有關(guān)文獻表明，動物的易感性是隨性成熟年齡接近而增高，犢牛在配種年齡前不易感染；兩個奶牛群布病抗體陽性率分別為10.8%和9.5%，由于不清楚這兩個奶牛場是否免疫過布魯氏菌疫苗，也不知道奶牛的來源（是否從免疫過布氏桿菌疫苗的地區(qū)調(diào)牛），因此抗體陽性牛并不能說明是布魯氏菌感染，但也應(yīng)該引起我們的高度重視。

3.2 農(nóng)業(yè)部規(guī)定口蹄疫抗體的標(biāo)準為陽性率（抗體滴度≥1∶64）大于等于70%，本次口蹄疫的血清學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，濟南市與萊西市兩個被檢牛場口蹄疫亞洲I型與O型抗體陽性率均為90%左右，A型抗體陽性率分別為50%和66.7%。亞洲I型與O型高于國家口蹄疫免疫的標(biāo)準要求，說明該場在O型和亞洲I型口蹄疫的防疫上取得了比較理想的免疫效果，但A型口蹄疫明顯低于國家規(guī)定的免疫合格率標(biāo)準；濟寧市的被檢肉牛群血清亞洲I型與O型、A型抗體陽性率分別為21.1%，50%，94.7%，該肉牛群亞I型與O型陽性率遠低于國家口蹄疫免疫規(guī)定標(biāo)準，而A型陽性率則高達94.7%。3個牛場均進行過口蹄疫滅活疫苗免疫，但不同廠家所用疫苗的類型、廠家，以及所執(zhí)行的免疫程序不盡相同，致使3個牛群三型口蹄疫的免疫狀態(tài)有如此大的差異，但有一點是共同的，三型口蹄疫的整體免疫水平均不理想。所以，我省規(guī)?；龅目谔阋呙庖哂写谝?guī)范，監(jiān)控力度有待于加強。

3.3 牛傳染性鼻氣管炎又稱壞死性鼻炎，是由牛傳染性鼻氣管炎病毒引起的牛的一種急性、熱性、接觸性傳染病，臨床表現(xiàn)為上呼吸道及氣管黏膜發(fā)炎、呼吸困難、流鼻汁等，還可以引起生殖道感染、結(jié)膜炎、腦膜炎、流產(chǎn)、乳房炎等多種病癥[3]。張鵬飛等（2007）報道，內(nèi)蒙古地區(qū)的血清陽性率為46.62%[4]； 王延濤等（2008）報道，北京、內(nèi)蒙古等國內(nèi)11個省市IBR血清抗體陽性率為46%[5]； 王永艷等（2009）報道，山西荷斯坦奶牛的血清陽性率為41.6%[6]； 季新成（2010）檢測的新疆地區(qū)血清陽性率為54.1%[7]；鄒世穎等（2011）檢測的山東地區(qū)血清陽性率為46%，河北28%，河南86%，內(nèi)蒙58%，新疆68%，北京40%[8]。本次調(diào)查結(jié)果顯示，濟南、濟寧、萊西的抗體陽性率20%，40.5%，23.8%，也與相關(guān)文獻基本一致。本次被檢的牛群均未接受免疫接種，抗體陽性牛實際上就是本病的帶毒者，說明我省依然普遍存在不同程度的傳染性鼻氣管炎病毒的感染，控制本病，勢在必行。

3.4 牛病毒性腹瀉/黏膜?。˙VDV）是由黃病毒科、瘟病毒屬中的牛病毒性腹瀉黏膜病病毒感染牛引起的一種以發(fā)熱、消化道黏膜糜爛潰瘍、白細胞減少、腹瀉、咳嗽、免疫耐受與持續(xù)感染、懷孕母牛流產(chǎn)、產(chǎn)死胎或畸形胎為臨床癥狀的傳染病。王新平等（1993） 在長春、內(nèi)蒙古地區(qū)運用雙抗夾心ELISA檢測BVDV，陽性率為16.5%～89%[9]。邱昌慶等（1998） 對山東、河南和河北等部分省份的規(guī)?；鲞M行BVD的流行病學(xué)監(jiān)測，中和抗體陽性率平均為46.2%～65.0%[10]。2006—2008年，楊得勝等對福建省規(guī)?；龊蜕B(yǎng)戶的牛進行BVD的流行病學(xué)監(jiān)測，調(diào)查發(fā)現(xiàn)，2006、2007和2008年，散養(yǎng)戶牛BVDV 的血清學(xué)陽性率分別為12.3%、21.4 %和18.5%；規(guī)?；鯞VD的血清學(xué)陽性率分別為92.4%、96.5%和80%[11]。本次山東省的調(diào)查結(jié)果顯示，濟南、濟寧、萊西三市的抗體陽性率分別為35%，15.8%，90.5%，總陽性率38.3%，與相關(guān)資料基本一致。被檢牛場均未接種過相關(guān)疫苗，說明我省普遍存在不同程度的BVDV感染，而且個別地區(qū)已相當(dāng)嚴重，達到90.5%，不得不引起重視。

4 防控措施

4.1 布魯氏菌病是國家二類重大疫病，是一種人畜共患病，對公共衛(wèi)生安全有重大威脅，根據(jù)國家相關(guān)規(guī)定，對實驗室檢出的布病陽性牛立即進行撲殺，并做無害化處理，對整個牛場進行3次徹底清掃消毒，嚴格采取生物安全措施。對陰性牛進行隔離觀察，再經(jīng)過2次檢測之后，若未發(fā)現(xiàn)布病陽性牛，方可作為健康牛群進行飼養(yǎng)。

4.2 提倡牛場自繁自養(yǎng)，確需引進奶牛時，要嚴格把好檢疫關(guān)，要從布魯氏菌病陰性場購買牛，查看檢疫證明，嚴格執(zhí)行檢疫。牛購回后隔離飼養(yǎng)觀察45天，同時，進行2次布魯氏菌病的檢查，陰性時方可混入原奶牛群[12]。

4.3 鑒于濟南市和萊西市被檢牛場A型口蹄疫抗體的陽性的合格率低于70%，濟寧市被檢牛場亞Ⅰ型、O型陽性率較低，均低于國家標(biāo)準，因此建議濟南市和萊西市被檢牛場盡快進行一次口蹄疫A型疫苗注射，濟寧市被檢牛場注射一次亞Ⅰ型-O型二聯(lián)滅活苗，以提高牛群口蹄疫抗體水平，降低發(fā)病風(fēng)險。注射疫苗2周后再進行一次口蹄疫抗體跟蹤檢測，看是否達標(biāo)，并建議牛場重新考查疫苗選購及免疫程序。

4.4 由于傳染性鼻氣管炎病毒侵入牛體后可潛伏于一定部位，導(dǎo)致持續(xù)性感染，并引起免疫抑制、延緩育肥牛群的生長、降低產(chǎn)奶量甚至停乳、流產(chǎn)等，因此發(fā)病時，應(yīng)立即隔離病牛，要對牛舍、場地及一切用具進行緊急、嚴格、徹底、全面的消毒，不留死角，糞便及污染物要做無害化處理，以殺死病原體，防止疫情擴散。對健康畜圈舍要每日進行消毒，防止疫病傳播。病畜采取廣譜抗生素防止細菌繼發(fā)感染，再配合對癥治療以減少死亡[13]。

4.5 對于病毒性腹瀉發(fā)病的牛場，沒有特效療法。應(yīng)用收斂劑和補液療法可縮短恢復(fù)期，減少損失。使用抗生素和磺胺類藥物，可減少繼發(fā)性細菌感染。在國內(nèi)進行牛只調(diào)撥或交易時，要加強檢疫，防止本病的擴大或蔓延。國外主要采用淘汰持續(xù)感染動物和疫苗接種進行預(yù)防，但活疫苗不穩(wěn)定，且能引起胎兒感染，誘發(fā)免疫抑制；滅活苗對妊娠母牛安全，通常需多次免疫[14]。

4.6 對奶牛場每年實施2次布病、口蹄疫、牛傳染性鼻氣管炎、黏膜病的定期抗體監(jiān)測，掌握奶牛重大疫病的免疫防控及感染狀況，做到未雨綢繆。

4.7 加強平時的衛(wèi)生防疫消毒工作，健全生物安全措施以切斷傳播途徑，如在養(yǎng)殖場或養(yǎng)殖小區(qū)門口設(shè)立消毒池或消毒間，每月進行一次全場消毒，包括飲水槽也要清洗干凈，及時清理剩余的飼料。普通的消毒藥如1%～3%的石炭酸溶液3min就可殺死布魯氏菌，2%的福爾馬林溶液15min可將其殺死。另外，使用3%的漂白粉溶液，20%的石灰乳、苛性鈉溶液消毒效果都很好。對被病?；蜿栃耘Ｎ廴镜膱鏊?、用具和物品要進行嚴格地消毒。飼養(yǎng)場的金屬設(shè)施、設(shè)備可采取火焰、熏蒸等方式消毒；牛場場地，可采用20%石灰乳、10%漂白粉乳劑，圈舍可用3%來蘇兒噴灑消毒。流產(chǎn)胎兒、胎衣應(yīng)深埋或燒毀，被污染的圈舍、場地、用具等用以上藥液進行徹底消毒，糞便經(jīng)生物發(fā)酵消毒[15]。

[1] 姚火春. 獸醫(yī)微生物學(xué)實驗指導(dǎo)[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社.2003：46-49.

[2] 蔡寶祥. 家畜傳染病學(xué)[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社.1997：75-81.

[3] Siegl G. The Parovovirus[M].New York：Plenum Press.1984：363-388.

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[15] 劉紅光. 奶牛布魯氏菌病的防控措施[J]. 中國畜牧獸醫(yī)文摘. 2012（9）： 91.

Serological survey and analysis of bovine common infectious diseases some cattle farms in Shandong Province

Yue Ruichao，Cheng Zilong，Li Ning， Liu Sidang
（College of Animal Science and Technology， Shandong Agriculture University，Tai’an， Shandong 271000）

From July 2013 to January 2014，266 serum samples were collected from two dairy farms in Jinan and Laxi， and a beef cattle farm in Jining. Rose bengal plate agglutination test（RBPT），tube agglutination test（SAT）and ELISA were conducted to detect Brucellosis Antibodies；The serum antibody of foot and mouth disease（FMD）was tested by liquid blocking ELISA test kits； IBR and BVD antibodies were detected by IBRV gB antibody and BVDV antibody ELISA test kits. The results showed that some dairy herds in Shandong Province were infected with brucellosis in various degrees，and the total positive rate reached 10.5%，while no positive rate was detected in the meat cattle herds；The differences among three FMD types antibody positive rate were signifcant：the average positvie rates of A，Asia I and O were 65.4%，70.3% and 77.8%；The positive rate of infectious rhinotracheitis antibody was 27%，and the positive rate of viral diarrhea-mucosal disease antibody was 38.3%. Accordingly the prevention and control were discussed.

Brucellosis；FMD；IBR；BVD-MD；antibody detection；prevention

S851.31

：B

：1005-944X（2014）06-0058-04

山東省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系創(chuàng)新團隊資助（SDAIT-12-011-04）

劉思當(dāng)