王存琴，張艷華（皖南醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，安徽蕪湖 241002）

大葉冬青的化學(xué)成分及藥理活性研究進(jìn)展Δ

王存琴＊，張艷華（皖南醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，安徽蕪湖 241002）

目的：為大葉冬青的進(jìn)一步研究提供參考。方法：查閱國(guó)內(nèi)、外有關(guān)大葉冬青文獻(xiàn)，對(duì)其化學(xué)成分、藥理活性進(jìn)行歸納、總結(jié)。結(jié)果與結(jié)論：大葉冬青含有多種化學(xué)成分，包括三萜、黃酮、甾體、氨基酸、多糖、核苷等；其具有降血脂、降血壓、降血糖、抗生育、抗氧化、抗菌消炎、抗腫瘤等作用，可用于治療口齒疼痛、目赤、熱病煩渴及痢疾等癥。加強(qiáng)大葉冬青的化學(xué)成分及藥理作用研究，對(duì)分析大葉冬青的物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)制有重要意義。

大葉冬青；化學(xué)成分；藥理活性

＊講師，博士。研究方向：天然產(chǎn)物活性成分的研發(fā)。E-mail：wcq5188b@163.com

大葉冬青（Ilex latifoliaThunb.）為冬青科（Aqulfoliaceae）冬青屬（Ilex）常綠喬木，又名寬葉冬青（《云南植物種子名錄》），藥用其葉?？喽〔铻槎嗫浦参锎笕~冬青、枸骨和苦丁茶冬青的嫩葉[1]。大葉冬青作為苦丁茶藥材的主要來(lái)源之一，主要分布于浙江、福建、廣西及海南等省區(qū)，具有散風(fēng)熱、清頭目、除煩渴之功效，用于治療口齒疼痛、目赤、熱病煩渴及痢疾等癥[2]。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，大葉冬青的水煎液具有降血脂、降血壓、降血糖、抗生育、抗氧化、抗菌消炎等作用[2-6]。目前，大葉冬青已成為嶺南地區(qū)苦丁茶藥用和保健用品種的主要原料藥材。本文著重對(duì)大葉冬青的化學(xué)成分和藥理活性研究現(xiàn)狀作一綜述。

1 化學(xué)成分

大葉冬青中含有多種化學(xué)成分，迄今從中已分離并獲得的有三萜及其苷類(lèi)、黃酮類(lèi)、甾體類(lèi)、氨基酸類(lèi)、多糖類(lèi)、核苷類(lèi)等成分。

1.1 三萜類(lèi)成分

三萜類(lèi)化合物因其廣泛的生物活性和獨(dú)特的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)成為迄今為止被研究最為廣泛和歷史最悠久的化合物之一。其在生物體中以游離形式存在，也有成醚、成酯及成糖苷的形式存在。五環(huán)三萜是最主要也是研究最廣泛的一類(lèi)三萜類(lèi)成分。目前，從大葉冬青中分離鑒定的三萜及其苷類(lèi)成分的苷元幾乎均為五環(huán)三萜，結(jié)構(gòu)類(lèi)型主要可分為苦丁內(nèi)酯型、齊墩果烷型、烏蘇烷型和羽扇豆烷型。迄今為止，從大葉冬青葉中分離得到45種三萜和35種皂苷類(lèi)成分。最近，范春林[7]從大葉冬青中分得了17個(gè)三萜皂苷和2個(gè)三萜類(lèi)化合物，其中大葉冬青皂苷R、大葉冬青皂苷S、大葉冬青皂苷T、大葉冬青皂苷U、大葉冬青皂苷V為5個(gè)新的三萜皂苷類(lèi)化合物。Wang CQ等[8]還從大葉冬青中分離得到了2個(gè)C環(huán)為七元環(huán)的三萜類(lèi)化合物和3個(gè)六環(huán)的三萜類(lèi)化合物，其中Ilelic acid A為1個(gè)具有新骨架結(jié)構(gòu)的化合物。大葉冬青葉中的新三萜類(lèi)化合物及其理化常數(shù)見(jiàn)表1；大葉冬青中新三萜類(lèi)化合物結(jié)構(gòu)式見(jiàn)圖1。

1.2 黃酮類(lèi)化合物

劉祖生等[9]、Liang YR等[10]從大葉冬青葉中分離鑒定了等[11]從大葉冬青葉中分離鑒定了黃酮類(lèi)成分Kaempferol。

表1 大葉冬青葉中的新三萜類(lèi)化合物及其理化常數(shù)

1.3 其他類(lèi)化合物

大葉冬青中還有谷甾醇（β-Sitosterol）、cis-Roseoside、d-Glucose、Polyphenols、Caffeine、Vitamine C[10]及游離氨基酸[12]等其他類(lèi)化合物。

2 藥理活性

大葉冬青葉作為苦丁茶重要的基原植物，在浙江、廣西、廣東、福建及海南等省區(qū)均有廣泛使用，其藥理作用主要表現(xiàn)在抗腫瘤、降血脂、降血糖、降血壓、抗氧化、抗生育、抗炎殺菌等方面。

2.1 抗腫瘤作用

Wang CQ等[8]的研究結(jié)果表明，從大葉冬青中分離得到的6個(gè)三萜類(lèi)化合物能有效抑制乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231細(xì)胞增殖，其中化合物7顯示出較為明顯的效果，其對(duì)兩組乳腺癌細(xì)胞的IC50值分別為（12.65±0.94）、（4.58±0.56）mol/L。另外，所有測(cè)試化合物對(duì)MCF-7細(xì)胞增殖的抑制效果均優(yōu)于對(duì)MDA-MB-231的效果。同時(shí)，通過(guò)加入雌激素受體拮抗藥ICI-182780對(duì)化合物7進(jìn)行測(cè)試，初步探討了雌激素受體對(duì)細(xì)胞增殖抑制效果的影響?？喽〔枥蠘?shù)葉中富含熊果酸[13]，熊果酸能抑制HuH7型肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)[14]，對(duì)食管癌KYSE105細(xì)胞增殖、凋亡也可產(chǎn)生效應(yīng)[15]。研究發(fā)現(xiàn)，從苦丁茶中提取的熊果酸對(duì)鼻咽癌細(xì)胞有較強(qiáng)的抑制作用，能阻滯癌細(xì)胞生長(zhǎng)于G0/ G1期[16]，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡[17]，并能同步下調(diào)腫瘤細(xì)胞細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶（ERK）和細(xì)胞周期蛋白（Cyclin）D1的表達(dá)，苦丁茶中提取的熊果酸對(duì)鼻咽癌細(xì)胞藥物干預(yù)的最適宜作用濃度為40μmol/L，藥物干預(yù)后形態(tài)學(xué)觀察的最適宜時(shí)間為24 h?？喽〔铇?shù)葉中熊果酸有良好的抗腫瘤效應(yīng)，使其成為近年的研究熱點(diǎn)[15]。

圖1 大葉冬青中新三萜類(lèi)化合物結(jié)構(gòu)式

2.2 降血脂作用

高脂血癥和脂肪肝是一種因脂質(zhì)代謝紊亂引起的代謝性疾病。降血脂作用是大葉冬青葉的重要活性作用之一，近年來(lái)，隨著研究的不斷深入，對(duì)其降血脂活性部位和作用機(jī)制有了進(jìn)一步的認(rèn)識(shí)。

申梅淑等[18]報(bào)道認(rèn)為，苦丁茶的水煎液具有明顯降低大鼠血中載脂蛋白（Apo）B/ApoA比值，升高高密度脂蛋白（HDL-C）、ApoA水平的作用，表明苦丁茶可明顯改善正常大鼠的脂蛋白代謝，使脂蛋白水平及其運(yùn)載機(jī)制趨于正常。并提示其作用機(jī)制可能與其含有的苦丁茶素、β-香樹(shù)脂醇、β-甾醇，熊果酸等成分有關(guān)。

潘慧娟等[19]的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，以不同劑量的苦丁茶水提取液喂飼高脂模型大鼠和小鼠，通過(guò)檢測(cè)大鼠和小鼠的血清脂質(zhì)含量發(fā)現(xiàn)，苦丁茶能顯著降低高脂血癥大鼠與小鼠的血清總膽固醇（TC）和甘油三脂（TG），對(duì)HDL-C、低密度脂蛋白（LDL-C）也有一定的調(diào)節(jié)作用，同時(shí)可以降低高脂血癥大鼠與小鼠的動(dòng)脈粥樣硬化指數(shù)（AI，AI＝LDL-C/HDL-C）及冠心指數(shù)（R-CHR，R-CHR＝TC/HDL-C），表明苦丁茶有顯著的降脂效果和一定程度的對(duì)抗動(dòng)脈粥樣硬化作用。此外，苦丁茶水提物能顯著降低高脂模型大鼠血清和肝臟中脂質(zhì)的含量，使大鼠肝質(zhì)量和脂肪濕質(zhì)量下降，由此降低大鼠高脂血癥和脂肪肝形成的可能，并能有效抑制高脂飲食引發(fā)的SD大鼠肥胖，說(shuō)明苦丁茶有減肥的作用。

2.3 抗氧化作用

Pirker KF等[20]研究表明，用大葉冬青葉提取制備的中藥飲料具有抗氧化的活性。超氧化物岐化酶（SOD）是有機(jī)體對(duì)抗自由基、防衰老的第一道防線。大葉冬青葉內(nèi)富含SOD，其含量由高到低依次為冷凍干燥葉、微波干燥葉、鮮葉。兩種干燥葉含量分別是鮮葉的4.8和4.2倍。實(shí)驗(yàn)表明，大葉冬青葉水提取液具有較好的體外抗氧化活性，多酚為大葉冬青葉水提取液抗氧化能力的主要物質(zhì)來(lái)源[21]。大葉冬青葉水提取液的多酚含量為120.93mg/g（以干質(zhì)量計(jì)）。Lien EJ等[22]、Stratu P等[23]利用TEAC法測(cè)定了大葉冬青葉提取液的總抗氧化能力，結(jié)果顯示大葉冬青葉提取液對(duì)DPPH自由基、ABTS+·及·OH具有一定的清除能力，其自由基清除率達(dá)50%時(shí)所需要的質(zhì)量濃度（IC50）為133.1μg/m l。周才瓊等[24]發(fā)現(xiàn)，大葉冬青葉不論在自然沖泡還是磨碎沖泡時(shí)對(duì)NO2-和·OH均有較好的清除作用，是一種很好的綠色健康保健飲品。由于大葉冬青葉中的多酚、黃酮類(lèi)等成分具有良好的抗氧化活性，故其提取物可作為油脂、食品及日化產(chǎn)品的抗氧化添加劑[25]。另外，大葉冬青葉中黃酮類(lèi)化合物的含量為綠茶中的1.6～14.7倍，大葉冬青葉中的茶多酚、總黃酮、多糖、生物堿類(lèi)等活性部位的抗氧化效果順序在豬油中為：多酚＞黃酮＞多糖類(lèi)＞生物堿；在花生油中，各提取物的抗氧化性能差別不明顯。

2.4 抗菌作用

李曉儲(chǔ)等[26]研究表明，大葉冬青葉提取物具有明顯抗菌作用。其水層物、總生物堿、總黃酮苷元對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌均有較強(qiáng)的抑菌活性。測(cè)定結(jié)果顯示，各組分對(duì)大腸桿菌的抑菌活性次序?yàn)椋核畬游铮究偵飰A＞總黃酮苷和總黃酮苷元；除總黃酮苷以外，各組分對(duì)金黃色葡萄球菌均有較強(qiáng)的抑菌活性，抑菌活性次序?yàn)椋核畬游铮旧飰A＞總黃酮苷元＞總黃酮苷。體外抑菌實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，大葉冬青葉水煎液對(duì)大腸桿菌、綠膿桿菌、金黃色葡萄球菌、傷寒桿菌、福氏痢疾桿菌、肺炎雙球菌、乙型溶血性鏈球菌、普通變形桿菌均有明顯的抑制作用，其中對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和痢疾桿菌的抑制作用較強(qiáng)。

2.5 其他作用

Woo AYH等[27]研究發(fā)現(xiàn)，大葉冬青葉水提液可以抑制大鼠腦組織微粒體酶活性和鈍化大腦皮質(zhì)酶活性，對(duì)心臟產(chǎn)生明顯的影響，大葉冬青葉中存在的化合物有很強(qiáng)的三磷酸腺苷（ATP）酶抑制活性。另外，實(shí)驗(yàn)還表明，大葉冬青葉具有提高小鼠耐低溫、耐缺氧的作用。蔣建敏等[28]研究發(fā)現(xiàn)，大葉冬青葉對(duì)離體豚鼠氣管平滑肌有明顯的舒張作用。哮喘發(fā)作與氣道平滑肌內(nèi)Ca2+濃度變化有關(guān)，大葉冬青葉水提取液可拮抗Ca2+引起的氣管平滑肌收縮。研究表明[29]，大葉冬青葉在小鼠的急性毒性實(shí)驗(yàn)和大鼠的長(zhǎng)期毒性實(shí)驗(yàn)中顯示出安全、無(wú)毒副作用，表明在一定劑量范圍內(nèi)大葉冬青葉的使用有較大的安全性。

3 結(jié)語(yǔ)

綜上所述，大葉冬青資源豐富，化學(xué)成分結(jié)構(gòu)多樣，臨床療效顯著，具有明顯的抗腫瘤、降血脂、抗氧化、抗菌等藥理作用。因此，對(duì)大葉冬青進(jìn)行進(jìn)一步的化學(xué)成分和藥理作用研究，弄清其確切的物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)制具有重要意義。

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R282；R285

A

1001-0408（2014）11-1052-03

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2014.11.32

安徽高校省級(jí)自然科學(xué)研究項(xiàng)目；皖南醫(yī)學(xué)院博士科研啟動(dòng)基金（No.201401）

2013-10-13

2014-01-08）