尚小云

遼寧省撫順市中心醫(yī)院檢驗科，遼寧撫順113006

自身抗體檢測的臨床應(yīng)用與質(zhì)量控制

尚小云

遼寧省撫順市中心醫(yī)院檢驗科，遼寧撫順113006

自身抗體的檢驗項目種類較多，檢驗方法也比較豐富，目前已有效應(yīng)用到多種自身免疫性疾病中以協(xié)助臨床診斷與治療，受到臨床醫(yī)師的廣泛認可。檢測過程中保障嚴密的操作流程以及相關(guān)設(shè)備準備，可充分保證良好的檢驗質(zhì)量，能夠為臨床診治提供更有效依據(jù)。

自身抗體檢測；臨床應(yīng)用；質(zhì)量控制

目前，我國對自身抗體檢測的重視程度已廣泛提升，通過相關(guān)指標(biāo)檢測可直接協(xié)助合理的診治開展。但由于臨床檢驗的特殊性，以及設(shè)備、試劑、檢驗人員的不確定性，仍會存在檢測不當(dāng)?shù)南嚓P(guān)表現(xiàn)[1]。筆者通過分析該種檢驗的臨床應(yīng)用范圍，合理提出質(zhì)量控制建議，旨在為日后檢測提供有效的參考建議。

1 自身抗體檢測應(yīng)用分析

1.1 檢測常見項目

存在自身免疫性疾病的病患中多數(shù)均能夠自血清中獲取具有良好價值的自身抗體，即便部分項目與疾病進展的關(guān)系并不明確，但均存在一定程度的關(guān)聯(lián)。部分指標(biāo)已成為臨床診斷中的有效依據(jù)[2]，可充分評估疾病的發(fā)生與緩解，其臨床中常見檢測項目如下。

①抗核抗體（ANA）：多項研究已證實該指標(biāo)對自身免疫性疾病存在良好的診斷價值，也是美國風(fēng)濕病學(xué)會所認可的系統(tǒng)性紅斑狼瘡的主要診斷指標(biāo)之一。②扛單鏈DNA（ss-DNA）：以脫氧核糖與核糖為靶抗原，可作為系統(tǒng)性紅斑狼瘡的參考指標(biāo)，對類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎也存在一定價值。③抗雙鏈DNA抗體（ds-DNA）：以雙螺旋DNA為靶抗原，是系統(tǒng)性紅斑狼瘡病患的特異性標(biāo)志物，并且能夠通過滴度檢測分析疾病程度。④抗可提取性核抗原抗體（ENA）：該類別由眾多核苷酸與其蛋白質(zhì)顆粒共同組成，包括多種抗原組成，能夠準確評估彌漫性結(jié)締組織疾病的發(fā)生。⑤類風(fēng)濕因子（RF）：其靶抗原為變形IgG，對類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎具有明確診斷作用[3]，但針對指標(biāo)表現(xiàn)為陰性這并不可直接排除疾病存在。除此之外，混合型結(jié)締組織疾病，全身性紅斑狼瘡等患者也會存在RF陽性表現(xiàn)。⑥抗嗜中性粒細胞胞漿抗體（ANCA）：其靶抗原為人嗜中性粒細胞胞漿成分，能夠準確評估系統(tǒng)性血管炎疾病，多與血管炎性病變存在關(guān)聯(lián)。⑦抗角蛋白抗體（AKA）：主要為類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者的特異性指標(biāo)，但對于其他免疫性疾病不具備顯著的檢出作用。⑧抗肝抗原自身抗體：此項目包含的抗體類型較多，經(jīng)臨床檢測可充分辨別自身免疫性肝炎與病毒性肝炎，為治療提供可靠保障。⑨抗環(huán)瓜氨酸肽抗體（CCP）：此項目對與所有類型風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎均具備特異性，在疾病的早期發(fā)現(xiàn)中具有良好作用。⑩抗胰島細胞抗體（ICA）：該指標(biāo)主要針對胰島素依賴型糖尿病具有診斷價值，但病患經(jīng)長期治療后其檢驗水平也存在降低趨勢。

1.2 檢測方法分析

①酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）：該檢驗方式主要為非放射性免疫檢測，其臨床操作具有較好的簡易程度，不存在放射性傷害，并且試劑相對穩(wěn)定，在臨床中的應(yīng)用范圍較廣泛。由于試劑制品的日趨成熟，其開展方法已經(jīng)在國內(nèi)外獲得良好的推廣。②間接免疫熒光法（IIF）：當(dāng)前臨床主要以Hep-2細胞作為該種檢測的抗原，經(jīng)反應(yīng)發(fā)生后形成復(fù)合物，再聯(lián)合應(yīng)用抗人IgG最終獲得檢驗結(jié)果，最終采用熒光顯微鏡辨別免疫圖形與著染狀況。③放射免疫法（RIA）：以放射性標(biāo)記物作為檢驗基礎(chǔ)，但臨床開展過程中存在放射源污染等不良事件。④免疫印跡法（WB）：檢驗過程中主要以抗原吸附的硝酸纖維膜作為載體，通過凝膠電泳分離分子，再通過檢驗標(biāo)準評估各區(qū)帶情況，經(jīng)轉(zhuǎn)印到固相載體后完成載體膜。血清標(biāo)本受檢過程中分別結(jié)合抗原區(qū)帶，經(jīng)IgG抗體標(biāo)記后形成復(fù)合物，通過顯色表現(xiàn)總結(jié)抗ENA抗體。⑤免疫斑點法（IDA）：該種方法由WB改進而來，同樣也主要應(yīng)用于抗ENA抗體檢驗中。

2 臨床檢驗質(zhì)量控制分析

自身抗體檢測能夠保證多項疾病的良好診斷，但其檢驗結(jié)果準確程度與質(zhì)量控制存在密切相關(guān)性，其質(zhì)控為臨床檢測的主要指標(biāo)。當(dāng)前檢驗中大部分均為半定量或定性試驗，在獲取結(jié)果的同時需存在陽性與陰性對照，進而確保準確程度，也為實驗室質(zhì)控評估提供比較作用。

2.1 設(shè)備規(guī)范化

①檢測科室需具備良好的環(huán)境因素，保證檢驗質(zhì)控的基礎(chǔ)作用，需配備合理的空間、完善的室溫與照明調(diào)節(jié)設(shè)備，以保證相關(guān)檢測的順利開展；②確保良好的熒光顯微鏡質(zhì)量，并同時保證適合的光源強度對提高分辨度具有重要作用[4]；③檢驗醫(yī)師需定期校準相關(guān)器械的精密程度，避免檢測過程中存在誤差；④開展檢測時所應(yīng)用的相關(guān)試劑盒需由資質(zhì)豐富的生產(chǎn)商提供，收到試劑盒后依據(jù)指示說明給予保存；⑤保證酶標(biāo)儀的良好校準措施，給予良好的維護處理；⑥開展免疫熒光法檢驗前需著重評估相關(guān)標(biāo)記物的稀釋方法，保證檢驗操作無誤；⑦針對不同檢驗項目均需建立完善的流程操作標(biāo)準；⑧保證病患標(biāo)本與質(zhì)控版本的檢測環(huán)境相同，切勿由于保存不當(dāng)引發(fā)檢驗結(jié)果準確率下降；⑨獲取結(jié)果后應(yīng)先對以往病例記錄進行對照分析，核實無誤后再給予結(jié)果。2.2實驗基質(zhì)合理化

開展簡潔免疫熒光法時需采用實驗基質(zhì)作為處理依據(jù)，針對不同自身抗體項目檢測需保證針對性的實驗基質(zhì)，避免發(fā)生選擇不當(dāng)而降低實驗效果。同時，還需關(guān)注熒光標(biāo)記二抗的實際質(zhì)量，保證良好的摩爾比值。

2.3 結(jié)果判定準確化

檢測過程中熒光染色不可辨認情況時，將其結(jié)果與陰性對照進行合理比較，如水平表現(xiàn)相同則為陰性。存在可辨認熒光染色情況時，則與陽性對照開展比較，如水平相同或略高均可判定為陽性。在實際報告中需存在各圖形與滴度[5]，辨別與疾病存在關(guān)聯(lián)可進一步開展特異性免疫實驗[6]。同時，在判定結(jié)果是需結(jié)合病患個性化特征給予分析，檢驗結(jié)果不明確時相應(yīng)給予注解，協(xié)助臨床醫(yī)師認知。

自身抗體檢驗在臨床中具有良好的診斷作用，但在實際實驗過程中需要保證合理的質(zhì)量控制措施，提升檢測的合理性以及結(jié)果的準確性。

[1]胡朝軍,李永哲.重視自身抗體檢測質(zhì)量管理和臨床應(yīng)用[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2013,36(8):673-676.

[2]朱珍,張宏宇,何梅芳,等.肝病患者血清自身抗體檢測及臨床意義[J].重慶醫(yī)學(xué),2014,43(10):1246-1248.

[3]董旭才,張婧,沈建軍,等.類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者自身抗體的檢測及應(yīng)用[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2014,35(4):406-407.

[4]王廣杰,劉輝.自身抗體檢測新技術(shù)及其臨床應(yīng)用[J].醫(yī)學(xué)與哲學(xué):臨床決策論壇版,2014,16(4):65-69.

[5]吳斌,巫志宇,陳鳴.自身抗體檢測在自身免疫性疾病篩查中的臨床應(yīng)用分析[J].現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生,2014,30(3):407-408.

[6]萬本愿,李勝遠,姜青龍.自身抗體檢測的臨床應(yīng)用與質(zhì)量控制[J].實驗與檢驗醫(yī)學(xué),2013,31(1):52-55.

Clinical Applications and Quality Control of Autoantibody Testing

SHANG Xiaoyun
Laboratory department of central hospital of fushun City of Liaoning province,Fushun 113006，China

There are many types of test items in autoantibody testing.The test methods are relatively abundant.Currently,it has been effectively applied to a variety of autoimmune diseases in order to assist the clinical diagnosis and treatment,has widely recognized clinicians.Protect Rigorous operational processes and well preparation related equipment in testing process can sufficient to ensure good inspection quality.Finally,providing more effective basis for clinical diagnosis and treatment.

Autoantibody Testing;Clinical Applications;Quality Control

R575

A

1672-5654（2014）11（b）-0164-02

2014-09-21）

尚小云(1982-),女,遼寧省撫順市,本科,畢業(yè)于大連醫(yī)科大學(xué),主管檢驗師,研究方向：醫(yī)學(xué)臨床檢驗。