羅國(guó)君 艾志兵 唐春雷 張 磊 劉 振

(上海第六醫(yī)院金山分院神經(jīng)內(nèi)科,上海 210599)

內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPCs)是血管內(nèi)皮細(xì)胞的前體細(xì)胞，亦稱(chēng)為成血管細(xì)胞，在病理或生理因素刺激下，可從骨髓動(dòng)員到外周血參與損傷血管的修復(fù)〔1，2〕。近年來(lái)國(guó)內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)，EPCs在心腦血管疾病、外周血管疾病、腫瘤血管形成及創(chuàng)傷愈合等方面均發(fā)揮重要作用，并為缺血性疾病的研究治療提供了新思路〔3〕。本研究通過(guò)檢測(cè)缺血性腦血管(ICVD)患者的EPCs水平，旨在探討其與ICVD患者頸動(dòng)脈粥樣硬化程度的相關(guān)性。

1 資料和方法

1.1一般資料 隨機(jī)選取2010年1月至2014年2月在我院神經(jīng)內(nèi)科收治的ICVD患者206例，男114例，女92例，年齡55～80〔平均(61.67±3.48)〕歲。所有患者符合國(guó)際疾病分類(lèi)(ICD-10)的腦血管病診斷標(biāo)準(zhǔn)〔4〕。其中急性腦梗死患者82例(急性腦梗死組)，男45例，女37例，平均年齡(63.49±3.24)歲；短暫性腦缺血發(fā)作患者46例(短暫性腦缺血發(fā)作組)，男25例，女21例，平均年齡(61.33±3.40)歲；頸動(dòng)脈粥樣硬化患者78例(頸動(dòng)脈粥樣硬化組)，男44例，女34例，平均年齡(65.18±3.27)歲。另外隨機(jī)選取90例本院同期健康體檢者(對(duì)照組)，男50例，女40例，平均年齡(62.45±3.37)歲。四組一般資料均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，具有可比性。研究獲得倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者對(duì)研究過(guò)程已知曉。

1.2血管狹窄程度判定 所有研究對(duì)象均進(jìn)行頸動(dòng)脈數(shù)字減影血管造影(DSA)，通過(guò)造影結(jié)果判斷其頸動(dòng)脈的狹窄程度：狹窄率即血管管徑與最狹窄處管徑的差值與血管管徑的比值，70%以下即為輕中度狹窄，70%及以上為重度狹窄〔5〕。

1.3EPCs水平檢測(cè) 采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)所有研究對(duì)象血液樣本的EPCs水平：在入院第2日清晨采集靜脈血液5 ml，1.5 ml乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝保存，取50 μl加入含5 μl 抗人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體(CD33)和3 μl抗人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體(KDR)的試管中，避光孵育10 min后加入磷酸鹽緩沖液，2 000 r/min離心10 min，去上清，加入適量鞘液將樣本制成單細(xì)胞懸液，通過(guò)流式細(xì)胞儀計(jì)算EPCs百分比(CD33和KDR均陽(yáng)性即為EPCs)。

2 結(jié) 果

2.1四組EPCs水平比較 急性腦梗死組〔(0.044±0.015)%〕、短暫性腦缺血發(fā)作組〔(0.047±0.029)%〕和頸動(dòng)脈硬化組〔(0.039±0.021)%〕的EPCs水平均低于對(duì)照組〔(0.097±0.039)%〕(P<0.05)，急性腦梗死組與短暫性腦缺血發(fā)作組均高于頸動(dòng)脈硬化組(P<0.05)；對(duì)同一組而言，重度狹窄者的EPCs水平均低于輕中度狹窄者(P<0.05)。急性腦梗死組輕中度狹窄vs重度狹窄：(0.060±0.032)%vs(0.031±0.011)%;短暫性腦缺血發(fā)作組輕中度狹窄vs重度狹窄：(0.051±0.034)%vs(0.030±0.023)%;頸動(dòng)脈硬化組輕中度狹窄vs重度狹窄：(0.045±0.026)%vs(0.028±0.021)%。

2.2EPCs與頸動(dòng)脈狹窄程度的相關(guān)性 急性腦梗死組、短暫性腦缺血發(fā)作組和頸動(dòng)脈硬化組的EPCs水平與其頸動(dòng)脈內(nèi)膜中層厚度均呈負(fù)相關(guān)(r=-0.437、-0.296、-0.542，均P<0.05)。

3 討 論

ICVD是指在供應(yīng)腦的血管壁病變或血流動(dòng)力學(xué)障礙的基礎(chǔ)上所發(fā)生腦部血液供應(yīng)障礙，相應(yīng)供血區(qū)所在腦組織由于缺血、缺氧而出現(xiàn)腦組織壞死或軟化，引起短暫或持久的局部或彌漫性損害，進(jìn)而造成患者出現(xiàn)一系列神經(jīng)功能缺損癥狀〔6〕。作為導(dǎo)致人類(lèi)死亡的三大疾病之一，ICVD具有高發(fā)病率與高死亡率等特點(diǎn)。目前臨床研究發(fā)現(xiàn)，頸動(dòng)脈粥樣硬化是ICVD的主要危險(xiǎn)因素之一，其主要病生基礎(chǔ)為血管損傷后內(nèi)膜增生和內(nèi)皮功能不全〔7〕。

EPCs是一類(lèi)能增殖、分化為血管內(nèi)皮細(xì)胞的血管前體細(xì)胞，正常人外周血中EPCs水平有限，僅占單個(gè)核細(xì)胞數(shù)量的0.002%，目前國(guó)內(nèi)外研究證實(shí)生長(zhǎng)因子、趨化因子、致炎細(xì)胞因子、其他如雌激素、他汀類(lèi)藥物等因素可促進(jìn)循環(huán)EPCs的增殖〔8〕。國(guó)內(nèi)外研究證明EPCs參與血管內(nèi)皮損傷后的修復(fù)過(guò)程：ICVD時(shí)，EPCs可從骨髓動(dòng)員釋放入外周血循環(huán)，進(jìn)而遷移到缺血部位促進(jìn)新血管的形成，最終可導(dǎo)致腦缺血區(qū)毛細(xì)血管密度增高，梗死病灶體積縮小，患者的神經(jīng)功能得到改善〔9，10〕。

本研究說(shuō)明ICVD可導(dǎo)致EPCs水平下降，可能的原因?yàn)镮CVD病患者體內(nèi)持續(xù)的內(nèi)皮功能障礙和損傷引起EPCs耗竭，或疾病過(guò)程中某些因素(如吸煙、飲酒等)引起細(xì)胞因子的產(chǎn)生減少?gòu)亩鴮?dǎo)致骨髓中EPCs增殖減少等。另外對(duì)不同疾病而言，頸動(dòng)脈硬化患者的降低幅度高于急性腦梗死與短暫性腦缺血發(fā)作者，說(shuō)明腦血管損傷對(duì)骨髓EPCs的增殖刺激作用高于外周血管損傷的刺激。EPCs水平可反映患者的頸動(dòng)脈粥樣硬化程度。

4 參考文獻(xiàn)

1喬趙娜，黃傳江，韓玉亮，等.細(xì)胞自噬在缺血性腦血管病中的作用研究進(jìn)展〔J〕.中國(guó)老年學(xué)雜志，2013；33(16)：4093-5.

2余傳慶，張 梅，朱 蕾，等.缺血性腦血管病患者腦動(dòng)脈狹窄與血壓變異性的相關(guān)性〔J〕.中華神經(jīng)醫(yī)學(xué)雜志，2012；11(6)：613-8.

3杜 利，劉亢丁.內(nèi)皮祖細(xì)胞生物學(xué)特征及其臨床應(yīng)用〔J〕.中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù)，2011；15(40)：7581-4.

4劉珍才，李建煒，林潔中，等.國(guó)際疾病分類(lèi)(第二版)部分ICD-10編碼改變剖析〔J〕.現(xiàn)代醫(yī)院，2012；12(6)：4-6.

5徐嗣正.64排螺旋 CT 對(duì)冠脈血管狹窄程度診斷的敏感性和特異性研究〔J〕.河北醫(yī)學(xué)，2014；20(3)：495-7.

6中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)病學(xué)分會(huì)腦血管病學(xué)組缺血性腦血管病血管內(nèi)介入診療指南撰寫(xiě)組.中國(guó)缺血性腦血管病血管內(nèi)介入診療指南〔J〕.中華神經(jīng)科雜志，2011；44(12)：863-9.

7林 虹，陳華慧，吳多智，等.炎癥、頸動(dòng)脈不穩(wěn)定斑塊與缺血性腦血管病的關(guān)系及相關(guān)護(hù)理〔J〕.實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2013；29(22)：3766-8.

8池麗芬，易興陽(yáng)，邵敏潔，等.急性腦梗死患者循環(huán)內(nèi)皮祖細(xì)胞動(dòng)態(tài)變化及意義〔J〕.中國(guó)神經(jīng)免疫學(xué)和神經(jīng)病學(xué)雜志，2013；20(1)：44-7.

9鄒 楠，王 碩.內(nèi)皮祖細(xì)胞在缺血性腦血管病中的轉(zhuǎn)化研究〔J〕.中國(guó)卒中雜志，2013；8(5)：412-6.

10陸 冰.缺血性腦血管病氧化應(yīng)激對(duì)內(nèi)皮祖細(xì)胞的影響〔J〕.中國(guó)實(shí)用神經(jīng)疾病雜志，2013；16(2)：86-9.