蒼楓 郝鵬 張立華 曹玉梅 張慧芳 李敏 董俊余 張永峰 熊德晶 劉國(guó)英 范秀麗/金宇保靈生物藥品有限公司

口蹄疫滅活疫苗中完整病毒146 S粒子的含量是影響疫苗免疫效果的關(guān)鍵因素，生產(chǎn)過(guò)程中采用合理的保存溫度和濃度，有助于延長(zhǎng)病毒的保存期和維持較高的抗原水平，對(duì)生產(chǎn)過(guò)程中科學(xué)地指導(dǎo)的抗原的保存有重要意義。本文針對(duì)不同保存溫度和濃度對(duì)口蹄疫滅活抗原146 S含量的降解率進(jìn)行了測(cè)定。

（一）材料

1.口蹄疫病毒抗原。O型O/GX/09-7株滅活抗原，由金宇保靈公司生產(chǎn)部提供。

2.乳化佐劑。206佐劑，購(gòu)自賽比克公司。

3.儀器設(shè)備。超速冷凍離心機(jī)，紫外分光光度計(jì)，生物安全柜，玻璃容器，移液器等。

（二）方法

1.樣品抽取。隨機(jī)抽取本公司生產(chǎn)部O型/GX/09-7株滅活抗原液及其相應(yīng)批號(hào)的10倍濃縮純化液，分別取樣進(jìn)行初始樣品146 S含量的測(cè)定。

2.樣品分裝。將原液樣和10倍濃縮后樣分別分裝，20 ml/瓶。每組樣品不少于20個(gè)。

表1 不同溫度和濃度對(duì)滅活抗原完整病毒146 S影響的檢測(cè)結(jié)果

表2 原液樣品和10倍濃縮后樣1～7個(gè)月內(nèi)146 S變化曲線

3.樣品保存。每種樣品分2組，分別在-20℃和4℃冰箱中保存7個(gè)月。

4.定期檢測(cè)。每月定期各取出1個(gè)樣品分別進(jìn)行146 S的測(cè)定。

5.146 S測(cè)定。按照我公司內(nèi)部使用的蔗糖密度梯度紫外光定量法，檢測(cè)146S抗原的含量。

（三）結(jié)果（見(jiàn)表1、2）

（四）討論

口蹄疫O/GX/09-7株滅活病毒在4℃和-20℃保存的7個(gè)月中，完整病毒146 S粒子的含量均有所下降。4℃保存條件下，原液樣和濃后樣完整病毒146 S粒子的降解率分別為27.5%、12.3 %；-20℃保存條件下，其降解率分別為87.5%、92.4%。本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示：4℃比-20℃保存條件更有利于抗原的保存；濃度對(duì)其影響不顯著。建議在FMD生產(chǎn)過(guò)程中，滅活抗原在6個(gè)月的保存期內(nèi)采用4℃條件存放。

當(dāng)然，口蹄疫完整病毒146 S粒子的穩(wěn)定性受很多因素的影響，如溶液的PH值、滲透壓、凍融次數(shù)等，最佳保存條件將綜合考慮各種因素對(duì)其的影響，進(jìn)一步科學(xué)的結(jié)論有待于更多實(shí)驗(yàn)的驗(yàn)證和數(shù)據(jù)的積累。

（略）