張燕麗，孟凡佳，左冬冬

(1．黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150040;2．黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院，黑龍江 哈爾濱 150040)

復(fù)方是中醫(yī)遣方用藥的主要形式，配伍是復(fù)方精華之所在。如何更科學(xué)更有效的闡明復(fù)方配伍機(jī)理是中藥現(xiàn)代化的主要內(nèi)容之一。但是，復(fù)方配伍后的復(fù)雜物質(zhì)變化是現(xiàn)代中藥研究的瓶頸之一。藥對(duì)作為復(fù)方配伍的最小單位，是個(gè)可以作為復(fù)方配伍研究的很好的切入點(diǎn)。丹參與丹皮作為雙丹配伍，史載與《施今墨對(duì)藥》，現(xiàn)已被收錄至2010版中國藥典［1］。兩者功效相須為用，是清熱活血的經(jīng)典配伍。用來治療心血瘀阻所引起的胸痹心痛等癥狀，臨床上多用于冠心病和心絞痛的治療［2］。除此之外，雙丹配伍還可以治療過敏性紫癜、糖尿病、子宮內(nèi)膜異位癥、盆腔炎、風(fēng)濕熱等疾病，是臨床當(dāng)中使用非常廣泛的藥對(duì)之一。目前市面上常見的劑型為雙丹膠囊、雙丹口服液和雙丹顆粒。

1 丹參和丹皮的化學(xué)成分和藥理作用

1．1 丹參的化學(xué)成分和藥理作用

迄今為止，丹參中已得到50多種化學(xué)成分，主要是脂溶性成分和水溶性成分兩大類。脂溶性成分多數(shù)是二萜類化合物，包括多種菲醌衍生物(Phenanthraquinone)，如丹參酮Ⅰ、丹參酮ⅡA、丹參酮ⅡB、隱丹參酮、二氫丹參酮Ⅰ、異丹參酮、異丹參酮Ⅱ、異隱丹參酮、丹參新酮等。水溶性成分多為原兒茶醛(Protocatechuicaldehyde)及丹參素(Danshensu)［β－(3、4－二羥基苯基)乳酸］等。此外，尚含有β－谷甾醇等化學(xué)成分［3］。

中醫(yī)學(xué)理論認(rèn)為，丹參具有活血化瘀、清熱解毒、除煩、鎮(zhèn)痛、通經(jīng)、鎮(zhèn)靜安神、涼血消腫等功效［1］?，F(xiàn)代藥理研究認(rèn)為，丹參具有擴(kuò)張冠脈、增加冠脈流量、防止心肌缺血和心肌梗塞、改善微循環(huán)、保護(hù)心臟的作用，能抑制凝血、激活纖溶、穩(wěn)定紅細(xì)胞膜、提高機(jī)體耐缺氧能力、抗脂質(zhì)過氧化和清除自由基，增加肝臟血流量、保護(hù)肝損傷細(xì)胞、抗肌纖維化、抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)及消炎抗菌等作用［4］。

1．2 丹皮的化學(xué)成分和藥理作用

牡丹根及根皮中含有丹皮酚(Paeonol)、丹皮酚苷(Paeonoside)、丹皮酚原苷丹皮酚新苷(Apiopaeonoside)、芍藥苷(Paeoniflorin)、苯甲酰芍藥苷(Benzoylpaeoniflorin)、氧化芍藥苷(Oxypaeoniflorin)、2，3－二羥基－4－甲氧基苯乙酮、2，5－二羥基－4－甲氧基苯乙酮、3－羥基－4－甲氧基苯乙酮、Paeonilide、揮發(fā)油及植物甾醇等［5］。此外，牡丹皮還含有豐富的微量元素。

中醫(yī)學(xué)理論認(rèn)為，丹皮具有清熱涼血和活血化瘀等功效。現(xiàn)代臨床研究證實(shí)，牡丹皮具有抗病原微生物作用、抗心肌缺血作用［6］。另外，還具有抗炎作用、保護(hù)肝臟及降血糖、增強(qiáng)機(jī)體免疫力的作用［7］。

2 雙丹配伍后的化學(xué)成分及含量變化

胡興江［8］等建立了一種HPLC－MS分析方法，將丹參和丹皮配伍，用水煎液提取，進(jìn)行主要化學(xué)成分的鑒定和歸屬，并且對(duì)配伍前后化學(xué)成分的含量變化也做了初步的總結(jié)和歸納。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，雙丹配伍的水煎液中共有19中成分，其中有11個(gè)是來自中藥丹參的化學(xué)成分，8種來自丹皮的化學(xué)成分。兩者配伍后化學(xué)成分的含量高于單煎，其中鞣質(zhì)類化合物的含量有所降低。

張會(huì)亮［9］等利用新興的活性指導(dǎo)藥物成分篩選的方法對(duì)雙丹配伍后的活性成分進(jìn)行了篩選，實(shí)驗(yàn)選擇LDH(LDH是細(xì)胞內(nèi)源性酶)作為檢測指標(biāo)，對(duì)丹參和丹皮共51個(gè)組分進(jìn)行篩選。結(jié)果顯示，丹參中有2個(gè)脂溶性成分，1個(gè)水溶性成分，丹皮有4個(gè)脂溶性成分2個(gè)水溶性成分對(duì)乳鼠心肌細(xì)胞缺氧復(fù)氧損傷有保護(hù)作用。后經(jīng)LC/MS/MS/MS進(jìn)一步分析鑒定。帶到的這些成分是丹參醛類、丹參酮類、丹參醇類以及醌類物質(zhì)，如丹參醛、丹參酮醇B、二氫丹參新酮、二氫新隱丹參酮等。

3 雙丹配伍后的藥理作用研究

袁穎［10］對(duì)雙丹配伍后的清熱活血作用進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究。以大腸桿菌內(nèi)毒素所致熱毒血瘀證模型家兔為研究對(duì)象，選用發(fā)熱效應(yīng)、血液黏度、紅細(xì)胞壓積、血沉以及血液凝集作為觀察指標(biāo)，對(duì)單味藥組、配伍組分別進(jìn)行了觀察。結(jié)果表明，雙丹合煎可以抑制家兔模型的體溫上升，能明顯抑制紅細(xì)胞壓積減少及抑制血沉增快，對(duì)全血黏度、血漿黏度的有改善作用，對(duì)KPTT、PT的縮短均有對(duì)抗作用，能明顯抑制Fg的增加。實(shí)驗(yàn)說明雙丹合煎具有優(yōu)于單味藥的清熱活血作用。

4 雙丹方入血成分分析及藥代動(dòng)力學(xué)影響

潘堅(jiān)揚(yáng)［11］等以灌服雙丹顆粒的大鼠血漿樣品作為分析對(duì)象，采用液相色譜/串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用方法進(jìn)行分析，鑒定出了雙丹顆粒入血后的16中成分。并且通過實(shí)驗(yàn)證實(shí)了其中5中代謝產(chǎn)物來自丹皮酚，并且推測和驗(yàn)證了他們的化學(xué)結(jié)構(gòu)。

付志玲［12］等使用反相高效液相色譜法，4－羥基苯甲酸為內(nèi)標(biāo)，對(duì)從血漿中提取的丹參素的血藥濃度進(jìn)行檢測。結(jié)果表明，雙丹配伍后給藥使得丹參中的丹參素藥動(dòng)學(xué)參數(shù)T1/2α、AUC(0～∞)、Cmax比單獨(dú)使用丹參給藥時(shí)明顯增大，得到了雙丹配伍可以促進(jìn)丹參素的吸收利用，使作用時(shí)間延長，生物利用度提高。

劉春芝等［13］采用GC分析法，以正常家兔為對(duì)象，研究雙丹配伍后家兔體內(nèi)丹參對(duì)丹皮藥代動(dòng)力學(xué)影響。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，配伍后，丹皮酚吸收入血速度加快，消除基本不變，作用時(shí)間也有所延長。同時(shí)檢測和推測了血漿中產(chǎn)生代謝的新物質(zhì)，為丹皮酚的代謝物3，4－二羥基苯乙酮。

5 分析與展望

“藥有個(gè)性之所長，方有合群之妙用”。復(fù)方配伍是中醫(yī)潛方用藥的靈魂之所在。藥對(duì)作為復(fù)方的最小單位在復(fù)方配伍研究中有其獨(dú)特的地位和優(yōu)勢(shì)。丹參和丹皮作為藥對(duì)相須使用的經(jīng)典配伍，在單方與配伍的研究過程中，通過藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和藥理作用的變化比較，可以有利的闡明丹參與丹皮配伍后其化學(xué)成分的含量高于單煎，其清熱活血的功效也會(huì)增強(qiáng)。這樣的實(shí)驗(yàn)結(jié)論可以有力的佐證方劑配伍理論的增效機(jī)制。除此之外，丹參與丹皮配伍后，通過藥代動(dòng)力學(xué)的研究，丹參素和丹皮酚的生物利用度都有所提高，充分證明了復(fù)方配伍使有效成分增溶，助溶的相互作用的發(fā)生。

在丹參與丹皮的配伍研究中，為了更好的反應(yīng)兩者配伍后的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和藥理學(xué)作用變化，應(yīng)該從合理的處理樣品開始，定量的控制處理?xiàng)l件，減少偶然誤差，以使配伍前后的變化更具具有可比性。另外，對(duì)分析方法而言，丹參和丹皮配伍后，同一類型成分的變化，微量成分的變化，這些都需要一個(gè)高分離強(qiáng)度、高分離容量、高靈敏度和強(qiáng)定性能力的方法和技術(shù)。液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)應(yīng)用在雙丹配伍的分析中，有其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。

“中醫(yī)秘而不傳在劑量”。復(fù)方配伍的研究除了定性還要定量。丹參和丹皮的配伍比例變化對(duì)藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和體內(nèi)活性成分代謝的影響也是研究雙丹配伍機(jī)理的不可或缺的研究內(nèi)容，這需要依靠更多更科學(xué)的內(nèi)容和數(shù)據(jù)的積累，是雙丹配伍今后的研究方向。

［1］ 中華人民共和國藥典委員會(huì)．中華人民共和國藥典(一部)［S］．北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2000．

［2］ 高風(fēng)英，王洪慧．雙丹顆粒治療冠心病心絞痛102例臨床觀察［J］．黑龍江醫(yī)學(xué)，2005，29(9):722．

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［8］ 胡興江．HPLC－MS研究丹參與丹皮配伍的化學(xué)成分［J］．藥物分析雜志，2007，27(5):621－624．

［9］ 張會(huì)亮．復(fù)方雙丹活性組分篩選及骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)研究［D］．濟(jì)南:山東師范大學(xué)，2006．

［10］ 袁穎．丹皮、丹參藥對(duì)清熱活血作用的實(shí)驗(yàn)研究［J］．上海中醫(yī)藥雜志，2005，39(1):54－55．

［11］ 潘堅(jiān)揚(yáng)．雙丹方入血成分分析及藥物動(dòng)力學(xué)研究［D］．杭州:浙江大學(xué)，2006．

［12］ 付志玲，劉春芝，房敏峰，等．雙丹方中丹皮對(duì)丹參藥代動(dòng)力學(xué)的影響［J］．中成藥，2010，32(1):62－64．

［13］ 劉春芝．雙丹方中丹參對(duì)丹皮藥代動(dòng)力學(xué)影響研究［D］．西安:西北大學(xué)，2009．