亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        長沙青皮竹葉中黃酮類化合物的提取工藝條件

        2014-01-22 01:21:21賈可敬李湘洲
        經(jīng)濟林研究 2014年2期
        關(guān)鍵詞:竹葉黃酮類長沙

        賈可敬,李湘洲,殷 凱

        (中南林業(yè)科技大學 材料科學與工程學院,湖南 長沙 410004)

        竹葉中的黃酮類化合物具有抑制脂質(zhì)過氧化、抗菌[1]、免疫調(diào)節(jié)[2-3]、保護心腦血管[4]、降血脂[5]、保護肝臟[6]和清除自由基等功能[7-9]。隨著人類對自身保健和養(yǎng)生方面的關(guān)注度越來越高,以天然黃酮為主打或者作為添加劑的產(chǎn)品將會倍受人們的青睞。

        長沙青皮竹Bambusa textilisvar.persistens.B.M.Yang是一種生長在湖南長沙的青皮竹變種[10],目前對其的研究報道僅限于作為觀賞竹種的植物學分類方面,其他方面的研究報道卻極少,而有關(guān)竹葉提取物的研究卻已成為當今熱門的相關(guān)研究領域。因此,對長沙青皮竹葉提取物中活性成分的研究具有一定的現(xiàn)實意義。

        目前,黃酮或竹葉黃酮的提取方法有水提法、醇提法、微波輔助提取、超聲輔助提取、酶法、超臨界萃取和其他新方法[11-19]。為了給長沙青皮竹葉中黃酮類化合物的進一步研究提供參考依據(jù),文中采用正交試驗設計法,就乙醇濃度、提取次數(shù)、提取時間和固液比例等提取工藝條件對黃酮得率的影響情況進行了試驗研究,并采用紫外分光光度法對黃酮類化合物進行了量化分析,以期為長沙青皮竹的加工利用提供必要的技術(shù)支持。

        1 材料與方法

        1.1 材料與試劑

        供試的長沙青皮竹、毛竹、假毛竹、斑竹、水竹和琴絲竹葉均于2012年10月采自中南林業(yè)科技大學竹園,經(jīng)晾干、粉碎,過60目篩,密封以備用。對照品蘆丁購自湖南省食品藥品鑒定研究院。

        亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉、95%乙醇、石油醚(30~60℃)等試劑均為分析純。

        1.2 儀器與設備

        721N型紫外可見分光光度計,上海精密科學儀器有限公司;AUY220型電子分析天平,日本島津;HH-S1s型恒溫水浴鍋,金壇市大地自動化儀器廠;SHZ-D(Ⅲ)型真空泵,鞏義市予華儀器有限責任公司;旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,鄭州長城科工貿(mào)有限公司。

        1.3 方 法

        1.3.1 蘆丁標準曲線

        參照文獻[20]中的方法并稍加改進,取10.8mg的蘆丁溶于100mL的30%乙醇溶液中,得到質(zhì)量濃度為108mg?L-1的蘆丁標準液。分別取 0.0、1.0、2.0、4.0、6.0和8.0mL的蘆丁標準液置于6個25mL的容量瓶中,用30%的乙醇溶液稀釋至8mL;加入濃度為50g?L-1的NaNO2溶液1mL,靜置6min,再加入濃度為100g?L-1的Al(NO3)3溶液1mL,靜置6min后再加入40g?L-1的NaOH溶液10mL,最后用30%的乙醇溶液定容,靜置10min,在510nm波長處測定吸光度。得到如下蘆丁標準方程:

        式中:A為吸光度,C為質(zhì)量濃度(mg?L-1);R2為0.999 9。蘆丁乙醇溶液在0.00~34.56mg?L-1的范圍內(nèi)其線性關(guān)系良好。

        1.3.2 單因素試驗方法

        采用乙醇為提取劑,以竹葉黃酮得率為指標,考察了乙醇濃度、提取時間、固液比例和提取次數(shù)對黃酮得率的影響情況。提取液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至無醇味,以石油醚多次萃取葉綠素至石油醚無色,取下層液定容。移取一定體積溶液,按照“1.3.1”中說明的方法測定黃酮濃度,計算黃酮得率。各因素平行試驗5次,取其平均值。

        1.3.3 黃酮濃度及得率的計算

        黃酮濃度的計算公式為:

        黃酮提取率的計算公式為:

        式(1)中:A為吸光度,C表示黃酮的質(zhì)量濃度(mg?L-1)。式(2)中:C亦為黃酮的質(zhì)量濃度(mg?L-1),M竹葉為竹葉的質(zhì)量(mg),V總為粗提液的定容體積,V取為移取用于測定黃酮濃度的粗提液的體積,0.025表示25mL容量瓶的體積(單位為L)。

        1.3.4 正交試驗設計

        在單因素試驗基礎上,選取乙醇濃度(A)、提取時間(B)、提取次數(shù)(C)和固液比(D)作為試驗因素,按照如表1的四因素三水平的正交試驗方案進行長沙青皮竹葉黃酮提取工藝的優(yōu)化試驗。采用統(tǒng)計分析軟件SPSS v19.0對試驗結(jié)果進行分析,以確定最佳提取工藝。

        表1 試驗因素與試驗水平Table 1 Test factors and levels

        1.3.5 6種竹葉中黃酮含量的比較分析

        根據(jù)正交試驗結(jié)果,采用優(yōu)化工藝,對長沙青皮竹、毛竹、假毛竹、斑竹、水竹和琴絲竹這6種竹竹葉中的黃酮類化合物進行提取,測定其中的黃酮濃度,計算并比較竹葉中的黃酮含量,每種竹葉平行測定5次,取其平均值。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 單因素試驗結(jié)果及分析

        2.1.1 乙醇濃度對黃酮得率的影響

        乙醇濃度對黃酮得率的影響結(jié)果見表2。由表2可知,黃酮得率隨著乙醇濃度的增加而逐漸增大。當乙醇濃度為70%時,黃酮得率達到最大值;但當乙醇濃度再增大時,黃酮類化合物的提取率反而減小。其原因可能是,乙醇溶液濃度低時,竹葉中醇溶性黃酮分子未被充分提取,故隨著乙醇濃度增加所得黃酮得率上升。

        2.1.2 料液比對黃酮得率的影響

        料液比對黃酮得率的影響結(jié)果見表3。當料液比較低時,物料內(nèi)的黃酮無法被溶劑完全提取,而料液比較高時,雜質(zhì)含量也會提高,提取劑又不能得到最有效的利用,所以選擇適當?shù)牧弦罕葘?jié)約資源具有重要意義。由表3可知,當料液比為35∶1時,黃酮得率最大(1.76%);繼續(xù)增大料液比,黃酮得率卻不再繼續(xù)增加。

        表2 乙醇濃度對黃酮提取率的影響(n=5)Table 2 Effect of ethanol concentration on extraction rate of flavonoids(n=5) %

        表3 料液比對黃酮提取率的影響(n=5)Table 3 Effect of solid-liquid ratio on extraction rate of flavonoids(n=5) %

        2.1.3 提取次數(shù)對黃酮得率的影響

        提取次數(shù)對黃酮得率的影響結(jié)果見表4。在溶液中提取黃酮時,有時需要兩次或多次提取才能達到較好的提取效果。由表4可知,提取3次和提取2次的黃酮得率基本不變,說明提取2次時已經(jīng)達到較好的效果了。這是由于提取1次時,黃酮分子在提取液中基本達到飽和,此時物料與溶液中的黃酮分子達到擴散平衡,物料中的剩余黃酮分子無法被提取完全,故需要提取2次甚至多次。

        表4 提取次數(shù)對黃酮提取率的影響(n=5)Table 4 Effect of extraction times on extraction rate of flavonoids(n=5)

        2.1.4 提取時間對黃酮得率的影響

        若提取時間不夠,則黃酮可能未被完全浸出。提取時間對黃酮得率的影響結(jié)果見表5。由表5可知,提取時間對黃酮提取率的影響不大。當提取時間為1.5h時,提取率為1.54%;繼續(xù)延長提取時間,黃酮得率略有下降;但總體結(jié)果顯示,提取時間對黃酮得率的影響不明顯。其原因可能是,當固液比較大時,固液接觸面的黃酮濃度差大,根據(jù)擴散原理,黃酮分子擴散的推動力大,擴散速率快,提取時間則縮短。

        表5 提取時間對黃酮提取率的影響(n=5)Table 5 Effect of extracting time on extraction rate of flavonoids(n=5)

        2.2 正交試驗結(jié)果與分析

        表6為正交試驗結(jié)果。

        表6 正交試驗結(jié)果?Table 6 Result of the orthogonal test

        從表6中的極差分析結(jié)果可以看出:各因素對黃酮提取率的影響有差異,因素A對總黃酮提取率的影響最大,其次為因素C,因素B和D的影響程度基本相同。對試驗結(jié)果進行方差分析,結(jié)果見表7。

        從表7的方差分析結(jié)果中可以看出,在影響竹葉黃酮提取率的各因素中,因素A具有顯著性(F>F0.05),因素B、C和D無顯著意義(F<F0.05)。綜合考慮單因素的試驗效果、方差分析的顯著性水平與實際生產(chǎn)時的能源優(yōu)化,可以得出,提取長沙青皮竹葉中黃酮的最優(yōu)工藝條件組合為A3B2C1D1,即70%乙醇,按1∶25(g∶mL)的固液比提取3次,每次提取時間為1.5h。在此工藝條件下,平行試驗5次,長沙青皮竹葉黃酮的得率為1.85%。

        表7 方差分析結(jié)果?Table 7 Result of variance analysis

        2.3 6種竹葉中黃酮含量的比較分析

        根據(jù)正交優(yōu)化結(jié)果,采用優(yōu)化了的工藝條件,對長沙青皮竹、毛竹、假毛竹、斑竹、水竹和琴絲竹6種竹竹葉中的黃酮類化合物進行了提取,并測定了所得黃酮的濃度,計算了竹葉中的黃酮含量,并進行了比較分析。每種竹葉平行測定5次,取其平均值,測定結(jié)果見表8。由表8可知,在該工藝條件下所得長沙青皮竹葉的黃酮含量比其他5種竹葉中的黃酮含量要高,說明長沙青皮竹是一種可用以開發(fā)竹葉黃酮類產(chǎn)品的潛在原材料。

        表8 6種竹葉中的黃酮含量(n=5)Table 8 Flavonoids content in leaves of six bamboo species(n=5)

        3 結(jié) 論

        文中以黃酮得率為考察指標,通過考察乙醇濃度、提取次數(shù)、提取時間和固液比例等因素對黃酮得率的影響情況,在單因素試驗的基礎上,設計了四因素三水平的正交優(yōu)化試驗,最后得到的最佳提取工藝條件為:乙醇的體積分數(shù)為70%,固液比為1∶25,提取3次,每次提取時間為1.5h,在此條件下黃酮的得率為1.85%。各因素對提取率的影響程度的大小順序為:乙醇濃度>提取次數(shù)>提取時間≈固液比例。

        在上述最佳提取工藝條件下,對6種竹葉中的黃酮進行了提取,測定了其黃酮含量。結(jié)果顯示,6種竹葉中的黃酮含量為9.1~18.5mg?g-1。長沙青皮竹竹葉的黃酮含量比同時間同地點采摘的毛竹、假毛竹、斑竹、琴絲竹和水竹都要高,比文獻[21]中報道的其他竹葉的黃酮含量也要高,說明長沙青皮竹葉作為竹葉黃酮的生產(chǎn)原料具有一定的開發(fā)價值。

        本試驗采用硝酸鋁-亞硝酸鈉顯色法,利用紫外分光廣度法在510nm處測定吸光度以確定黃酮含量,其含量與用高效液相色譜法測定的結(jié)果具有一定的偏差[22],偏差主要來自非黃酮類物質(zhì)的顯色,但對于酚酸類含量較少的竹葉提取物來說,也不失為一種簡單、快捷的黃酮含量的測定方法,這種測定方法適用于工業(yè)生產(chǎn)之中[23]。

        [1] Ni Q X,Xu G Z,Wang Z Q,et al.Seasonal variations of the antioxidant composition in ground bambooSasa argenteastriatusleaves[J].Int J Mol Sci,2012,13(2):2249-2262.

        [2] 唐浩國,魏曉霞,李 葉,等.竹葉黃酮對小鼠脾細胞免疫的分子機制研究[J].食品科學,2007,28(9):523-525.

        [3] Chun H,Zhang Y,David D Kitts.Evaluation of antioxidant and prooxidant activities of bambooPhyllostachys nigravar.henonisLeaf extract in vitro [J].J Agric Food Chem,2000,48(8): 3170-3176.

        [4] 陸柏益,張 英,吳曉琴.竹葉黃酮的抗氧化性及其心腦血管藥理活性研究進展[J].林產(chǎn)化學與工業(yè),2005,25(3):120-124.

        [5] 黎繼烈,王 衛(wèi),曾超珍,等.金橘黃酮提取物對大鼠降血脂功能的影響[J].中南林業(yè)科技大學學報,2008,28(5): 89-92.

        [6] 陳秋勇,陳炳華,黃志堅.虎尾輪根黃酮類化合物對小鼠肝臟功能的影響[J].生物災害科學,2012,35(4):385-391.

        [7] 羅宇倩,郭 輝,胡林福,等.竹葉黃酮的抗氧化活性研究[J].食品科技,2011,36(7):201-203.

        [8] 江慧華,劉俊劭,陳培珍,等.竹葉中黃酮提取分離及抗氧化活性研究[J].湖北農(nóng)業(yè)科學,2012,51(23):51-55.

        [9] 李姣娟,周盡花,戴 瑜,等.川桂葉總黃酮清除DPPH·自由基作用的研究[J].中南林業(yè)科技大學學報,2010,30(10):125-128.

        [10] 羅健夫.湖南觀賞竹類植物的園林應用現(xiàn)狀及對策[J].世界竹藤通訊,2010,8(1):27-29.

        [11] 王婧杰,馬鳳鳴,穆立薔.用響應面法優(yōu)化超聲輔助提取紫椴皮中的黃酮[J].經(jīng)濟林研究,2012,30(4):113-118.

        [12] 魏玉鳳,陳 瑋,方 菊,等.纖維素酶法提取竹葉黃酮的傳質(zhì)動力學[J].高?;瘜W工程學報,2013,27(5):780-783.

        [13] 張珊珊,王喜平,趙曉紅,等.不同濃度乙醇作為夾帶劑對超臨界CO2提取竹葉黃酮得率的影響[J].食品研究與開發(fā),2011,32(1):57-60.

        [14] 孫業(yè)良,姜明杉,陳 暄,等.基于響應面分析法對綠茶中黃酮提取工藝的研究[J].經(jīng)濟林研究,2009,27(3):33-37.

        [15] 王純榮,鄭國棟,顏賢仔.表面活性劑協(xié)同微波提取大豆莢黃酮的研究[J].江西農(nóng)業(yè)大學學報,2011,33(1):151-156.

        [16] 龔燕飛,陳建華,吳耀輝.佛肚竹黃酮類物質(zhì)提取工藝的研究[J].中南林業(yè)科技大學學報,2010,30(6):119-122.

        [17] 吳耀輝,陳建華,龔燕飛.粉單竹竹葉黃酮提取工藝的初步研究[J].中南林業(yè)科技大學學報,2010,30(6):123-126.

        [18] 劉巧利,王柳云,嚴建業(yè),等.山楂中總黃酮和多糖的提取工藝研究[J].中南林業(yè)科技大學學報,2010,30(9):162-165.

        [19] 曲芬霞,韓彥良.田口方法在竹葉黃酮提取中的應用研究[J].林產(chǎn)工業(yè),2012(2):57-58.

        [20] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部):[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010: 120.

        [21] 陳文英,葉建中,王成章,等.高品質(zhì)竹葉黃酮的篩選及測定方法的比較[J].現(xiàn)代化工, 2008,28(增刊2):355-358.

        [22] 郭雪峰.毛竹(Phyllostachys pubescens)與鋪地竹(Pleioblastus argenteastriatus)葉黃酮類化學成分及其生物活性的研究[D].北京:中國林業(yè)科學研究院,2007.

        [23] 曠春桃,李湘洲,汪玉霞,等.大葉冬青葉中總黃酮測定方法和提取工藝[J].食品科學,2009,30(6):49-51.

        猜你喜歡
        竹葉黃酮類長沙
        Redefinition of the Odorrana versabilis Group,with a New Species from China (Anura,Ranidae, Odorrana)
        長沙之旅
        MS-DAIL聯(lián)合MS-FINDER鑒定中藥黃酮類化合物
        衛(wèi)竹葉老師輔導的日記畫
        HPLC法同時測定白梅花中6種黃酮類成分
        中成藥(2018年9期)2018-10-09 07:18:46
        我眼中的長沙
        竹葉溝懷古
        多姿多彩的“長沙窯”
        大眾考古(2014年10期)2014-06-21 07:12:14
        黃酮類化合物抗心肌缺血再灌注損傷研究進展
        中成藥(2014年10期)2014-02-28 22:29:33
        牛大力中黃酮類成分
        中成藥(2014年10期)2014-02-28 22:29:25
        日本熟妇人妻xxxx| 日韩精品成人一区二区三区久久久 | 人妻少妇中文字幕在线| 亚洲欧美综合区自拍另类| 国内精品大秀视频日韩精品| 日韩精品视频免费福利在线观看 | 精品国产乱码久久久久久影片| 国产偷v国产偷v亚洲偷v| 久久精品av一区二区免费| 日本成人中文字幕亚洲一区| 一本色道久久hezyo无码| 福利体验试看120秒| 国产av日韩a∨亚洲av电影| 久久精品韩国日本国产| 亚洲精品98中文字幕| 伦伦影院午夜理论片| 精品亚洲成a人7777在线观看| 国产一级淫片免费播放电影| 色婷婷久久综合中文久久一本| 2018天天躁夜夜躁狠狠躁| 国产成人无码免费网站| 欧美亚洲尤物久久综合精品| 日韩国产精品一区二区三区| 人禽交 欧美 网站| 亚洲区在线| 久久婷婷夜色精品国产| 在线观看一级黄片天堂| 国产福利视频一区二区| 成人三级在线| 精品一区二区亚洲一二三区| 欧美国产激情18| 亚洲av男人的天堂在线观看| 亚洲最稳定资源在线观看| 人妻夜夜爽天天爽三区麻豆av| 三个男吃我奶头一边一个视频| 国产中文欧美日韩在线| 91爱爱视频| 蜜桃国产精品视频网站| 插我一区二区在线观看| 亚洲夜夜骑| 日韩精品中文字幕综合|