陳有文 魏有梅

共和縣布魯氏菌病的血清學(xué)調(diào)查

陳有文 魏有梅

（青海省海南州畜牧獸醫(yī)站 813000） （青海省共和縣畜牧獸醫(yī)站）

2008~2013年間，應(yīng)用虎紅平板凝集試驗(yàn)(RBT)和試管凝集試驗(yàn)(SAT)對(duì)共和縣奶牛累計(jì)檢測布魯氏菌病的血清7004份，檢出陽性血清15份，陽性率0.21%，結(jié)果表明共和地區(qū)奶牛布魯氏病得到有效控制。

布魯氏菌病(簡稱布病)，是由布氏桿菌感染引起的慢性接觸性人畜共患的傳染病，其特征是妊娠母畜發(fā)生流產(chǎn)，公畜呈現(xiàn)睪丸炎。該病可造成奶牛不同程度流產(chǎn)，生產(chǎn)性能下降，不但對(duì)畜牧業(yè)生產(chǎn)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失，還嚴(yán)重威脅著畜產(chǎn)品質(zhì)量衛(wèi)生安全和人類健康。為全面掌握共和縣奶牛布魯氏菌病疫情動(dòng)態(tài)和流行規(guī)律，及時(shí)發(fā)現(xiàn)和處理疫情，預(yù)測和分析發(fā)病特點(diǎn)及風(fēng)險(xiǎn)因素，制定科學(xué)防控措施，筆者于2008~1013年對(duì)共和縣飼養(yǎng)的奶牛布病進(jìn)行血清學(xué)檢測調(diào)查，現(xiàn)將檢查結(jié)果報(bào)告如下：

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 診斷液 每年所用虎紅平板抗原；標(biāo)準(zhǔn)陰性、陽性血清；試管凝集抗原均由青海省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心提供。

1.1.2 稀釋液 0.5%石碳酸生理鹽水。

1.1.3 被檢血清 來源于全縣養(yǎng)殖奶牛的4個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)，共7004份血清。

1.2 方法

每年首先用虎紅平板凝集試驗(yàn)(RBT)對(duì)被檢奶牛血清進(jìn)行初篩，檢出的陽性和可疑血清再用試管凝集試驗(yàn)(SAT)進(jìn)行復(fù)檢，以試管凝集試驗(yàn)做為檢測的最終判定結(jié)果。操作及判定標(biāo)準(zhǔn)按照GB/18646-2002進(jìn)行。

1.2.1 虎紅平板凝集試驗(yàn)步驟 在潔凈的玻璃板上劃分成數(shù)個(gè)4㎝2的方格，編號(hào)，用加樣器滴加相應(yīng)的血清0.03ml，在被檢血清旁滴加抗原0.03ml，用牙簽攪動(dòng)血清和使之混合。每次設(shè)立陰、陽性血清對(duì)照。

1.2.2 試管凝集試驗(yàn)步驟 準(zhǔn)備4支玻璃試管，將每份被檢血清分別按1:50、1:100、1:200、1:400四個(gè)稀釋度稀釋，即第一管加2.4ml稀釋液，第2-4管各加入0.5ml稀釋液，然后用吸管吸取0.5ml被檢血清加入第1管，反復(fù)吹打3次，吸取混合液1.5ml棄之，再吸取0.5ml混合液沿管壁加入到第2管中，用該吸管如前述方法混勻，再吸取第2管混合液0.5ml至第3管，如此倍比稀釋至第4管，從第4管棄去混合液0.5ml。稀釋完畢，將0.5ml20倍稀釋的抗原加入已稀釋好的各血清管中并振搖均勻。作陰性、陽性和抗原對(duì)照，并配置比濁管，將全部試管、對(duì)照管及比濁管充分振蕩后置37℃溫箱中培養(yǎng)20~22h，取出后置室溫2h，然后以比濁管為標(biāo)準(zhǔn)判定結(jié)果。

1.3 結(jié)果判定

1.3.1 虎紅平板凝集試驗(yàn) 在陰、陽性血清對(duì)照成立的條件下，被檢血清在4 min內(nèi)出現(xiàn)肉眼可見凝集現(xiàn)象者判為陽性，無凝集現(xiàn)象，呈均勻粉紅色者判為陰性。

1.3.2 試管凝集反應(yīng) 在陰陽性對(duì)照成立的前提下，被檢血清在1:100稀釋度出現(xiàn)“﹢﹢”以上的凝集現(xiàn)象時(shí)，判為陽性；1:50稀釋度出現(xiàn)“﹢﹢”以上的凝集現(xiàn)象時(shí)，可判為可疑，可疑反應(yīng)的牛經(jīng)過3~4周后重新采血檢驗(yàn)，如果仍可疑，可判定為陽性。

2 檢測結(jié)果

見附表和附圖。

附表 連續(xù)6年布病檢測結(jié)果

年份200820092010201120122013合計(jì) 檢測數(shù)(頭)50050015042500100010007004 陽性數(shù)(頭)07620015 陽性率(%)01.40.40.08000.21

附圖 歷年布魯氏菌病檢測結(jié)果曲線圖

3 討論

（1）通過對(duì)共和縣4個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)7004份奶牛血清連續(xù)6年進(jìn)行布魯氏菌病檢測，共檢出陽性血清15份，平均陽性率為0.21%，說明共和縣奶牛布病感染率并不高，在有效控制范圍內(nèi)，但也在不同年份檢出陽性差異顯著，特別是2009年陽性率高達(dá)1.4%。這與2008年由于實(shí)施扶貧開發(fā)項(xiàng)目，從外境引進(jìn)的奶牛數(shù)量大，檢疫工作把關(guān)不嚴(yán)，甚至從布病感染率高的地區(qū)調(diào)運(yùn)奶牛等有關(guān)。（2）共和縣采取以監(jiān)測、檢疫、隔離、陽性畜撲殺、消毒和無害化處理等綜合措施，特別是加大了陽性畜撲殺和調(diào)運(yùn)奶牛的檢疫監(jiān)督力度，切斷傳染源和傳播途徑，使奶牛陽性率從2009年的1.4%下降到2010年和2011年的0.4%和0.08%，且2012~2013年連續(xù)兩年未檢出陽性血清，這進(jìn)一步說明布病防治措施的科學(xué)性和有效性。（3）為了鞏固布病防治效果，防治疫情回升，還要繼續(xù)加強(qiáng)監(jiān)測工作，隨時(shí)掌握疫情動(dòng)態(tài)，制定合理的綜合防治規(guī)劃。加強(qiáng)牲畜飼養(yǎng)和衛(wèi)生管理，嚴(yán)格撲殺陽性畜及污染物的無害化處理。加強(qiáng)檢疫監(jiān)督，嚴(yán)把檢疫關(guān)，引進(jìn)種畜和調(diào)運(yùn)畜群時(shí)，嚴(yán)格按規(guī)范要求檢疫。同時(shí)要加強(qiáng)布病防治知識(shí)的宣傳力度，提高養(yǎng)殖戶對(duì)布病危害的認(rèn)識(shí)，增強(qiáng)防治意識(shí)。

（2014–02–28）

S852.61+4

A

1007-1733(2014)05-0076-02