云富斌

云南省第一人民醫(yī)院輸血科，云南昆明 650032

自身免疫性溶血性貧血，簡(jiǎn)稱AIHA，是由于B 淋巴細(xì)胞功能出現(xiàn)異常、亢進(jìn)現(xiàn)象，以致影響免疫功能，導(dǎo)致其出現(xiàn)紊亂并出現(xiàn)自身紅細(xì)胞抗體，加速紅細(xì)胞破壞而引發(fā)的一種貧血現(xiàn)象[1]。該病癥的臨床表現(xiàn)較多，如發(fā)熱、畏寒、腰背酸痛、黃疸等癥狀，且易于反復(fù)發(fā)作，難以控制。研究表明，自身免疫性溶血性貧血的發(fā)病率與白血病的發(fā)病率接近，約為2.62/（10 萬(wàn)人·年），且有45%以上患者的病程超過(guò)2年，血紅蛋白通常為55～65g/L[2]。一般情況下不主張對(duì)自身免疫性溶血性貧血患者進(jìn)行輸血治療，但若患者出現(xiàn)嚴(yán)重貧血時(shí)，則需采取輸血治療。不過(guò)反復(fù)輸血會(huì)對(duì)后期的治療帶來(lái)很大阻礙，因?yàn)榉磸?fù)輸血會(huì)產(chǎn)生不規(guī)則抗體，受免疫血型血清學(xué)特點(diǎn)的影響，這些不規(guī)則抗體極易被自身抗體所掩飾，因此，極易出現(xiàn)漏檢不規(guī)則抗體的情況，進(jìn)而導(dǎo)致溶血性輸血反應(yīng)。這也決定了對(duì)自身免疫性溶血性貧血患者進(jìn)行不規(guī)則抗體篩選、血型鑒定以及相容性配血試驗(yàn)的必要性?，F(xiàn)對(duì)我院64例自身免疫性溶血性貧血患者的實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)、輸血的效果情況進(jìn)行回顧性分析，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2012年1月—2013年1月我院64例自身免疫性溶血性貧血患者作為研究對(duì)象，所有患者均在輸血前進(jìn)行實(shí)驗(yàn)檢測(cè)?；颊咧校?8例女性、26例男性；年齡42～78 歲，平均年齡（64.3±5.4）歲；病程2～8年，平均病程（5.2±1.1）年。其中，有10例采取輸血治療。

1.2 方法

1.2.1 試劑和儀器的選擇 篩選譜細(xì)胞、紅細(xì)胞、抗-D 血清、ABO標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞由某生物醫(yī)藥制品公司提供。多特異性抗體、標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞（已知Rh 血型）、抗C3d、試劑、抗-lgG 試劑則由某血液生物醫(yī)藥公司提供[3]。

1.2.2 檢測(cè)方法 進(jìn)行的Rh 血型鑒定、直接/間接抗人球蛋白試驗(yàn)、氯喹放散試驗(yàn)、自身抗體特異性鑒定、乙醚放散試驗(yàn)、冷（熱）抗體溶血檢測(cè)等均嚴(yán)格按照國(guó)家臨床檢驗(yàn)操作規(guī)范進(jìn)行。

2 結(jié)果

2.1 檢測(cè)情況

進(jìn)行直接抗人球蛋白試驗(yàn)，64例患者均檢測(cè)為陽(yáng)性，特異性分布情況可見(jiàn)表1。另外，進(jìn)行血清不規(guī)則抗體篩選也均呈陽(yáng)性，行間接抗人球蛋白試驗(yàn)檢測(cè)則有21例呈陽(yáng)性。進(jìn)行吸收試驗(yàn)和不規(guī)則抗體篩選后，發(fā)現(xiàn)有6例呈陽(yáng)性，且均為重復(fù)輸血的貧血患者。然后進(jìn)行的譜細(xì)胞抗體鑒定，結(jié)果顯示有2例抗-C、3例抗-E，1例抗-E、C，未檢測(cè)到其他抗體。將患者紅細(xì)胞經(jīng)乙醚放散得到的放散液體和已知的Rh 血型、O 型的紅細(xì)胞進(jìn)行抗人球蛋白試驗(yàn)，顯示間接抗人球蛋白試驗(yàn)檢測(cè)到的21例陽(yáng)性患者中，有6例發(fā)現(xiàn)為血型特異性抗體，包括4例抗-E、2例抗-C。而在間接抗人球蛋白試驗(yàn)檢測(cè)出的陰性患者中，卻未發(fā)現(xiàn)抗體。

表1 直接抗人球蛋白試驗(yàn)的分布情況（總例數(shù)：n=64例）

2.2 輸血療效

對(duì)于10例采取輸血治療的患者，有針對(duì)性地選擇洗滌紅細(xì)胞并進(jìn)行配血（主側(cè)交叉）。給予間接抗人球蛋白試驗(yàn)檢測(cè)出的陽(yáng)性患者進(jìn)行交叉配血時(shí)，所選擇的血清是經(jīng)反復(fù)吸-收放散法去除了抗體后的血清?；颊呓?jīng)輸血后，并未發(fā)現(xiàn)不良反應(yīng)，10例輸血患者的臨床癥狀并得到有效改善。

3 討論

與一般輸血不同，對(duì)患有自身免疫性溶血性貧血（AIHA）的患者進(jìn)行輸血的風(fēng)險(xiǎn)很大。研究發(fā)現(xiàn)有超過(guò)1/3 的AIHA 患者中存在不規(guī)則抗體，有些患者血清中的自身抗體存在特異性。另外，輸血時(shí)本身也會(huì)加重溶血現(xiàn)象。血清中存在的非特異性自身抗體會(huì)與紅細(xì)胞產(chǎn)生一定的凝集作用，這會(huì)給AIHA 患者的輸血工作造成很大困擾。加上AIHA 的病程一般比較長(zhǎng)（超過(guò)2年），若反復(fù)輸血?jiǎng)t會(huì)產(chǎn)生其他抗體（ABO 以外抗體）[4]。因此，要保證AIHA患者輸血時(shí)的安全可靠性，避免不良的輸血反應(yīng)，就必須在輸血前對(duì)患者機(jī)體內(nèi)的不規(guī)則抗體以及血型進(jìn)行檢測(cè)和分析，以提升輸血的療效。

目前，AIHA 檢測(cè)的方法多種多樣，比較常用是溫抗體溶血檢測(cè)方法，主要包括直接抗人球蛋白試驗(yàn)、間接抗人球蛋白試驗(yàn)、酶處理紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)等?，F(xiàn)簡(jiǎn)要介紹一下這幾種常用的檢測(cè)方法。①直接抗人球蛋白試驗(yàn)。溫抗體型是AIHA 中最為常見(jiàn)的類型。而直接抗人球蛋白試驗(yàn)則是檢測(cè)這一類型中WAIHA 的重要手段。一般在37～38℃的情況下，溫抗體的作用是最為活躍的，IgG是其主要的抗體。這一抗體可與相關(guān)抗原紅細(xì)胞相結(jié)合，而不出現(xiàn)凝集現(xiàn)象。當(dāng)加入抗人球蛋白血清之后則會(huì)與附著在紅細(xì)胞上的IgG 相結(jié)合，并發(fā)生凝集反應(yīng)，也就是直接抗人球蛋白試驗(yàn)的陽(yáng)性反應(yīng)。但試驗(yàn)的結(jié)果并不能反應(yīng)溶血的嚴(yán)重程度，表現(xiàn)在有些患者在溶血緩解后仍會(huì)呈陽(yáng)性表現(xiàn)，而有些具有較重溶血現(xiàn)象的患者檢測(cè)結(jié)果則呈弱陽(yáng)性[5]。②間接抗人球蛋白試驗(yàn)。這是檢測(cè)游離抗體的主要方法。這一檢測(cè)方法中所選用的標(biāo)準(zhǔn)試劑是正常人Rh 基因型的O 型紅細(xì)胞，然后將與患者的血清進(jìn)行孵育，再進(jìn)行試驗(yàn)[6]。若檢測(cè)呈陽(yáng)性，則說(shuō)明患者的血清中含有補(bǔ)體或者游離抗體，同時(shí)也說(shuō)明患者存在較為嚴(yán)重的溶血癥狀，這類患者，輸血的風(fēng)險(xiǎn)更大。一般來(lái)說(shuō)，直接抗人球蛋白試驗(yàn)?zāi)転槊庖咝匀苎峁└鼮槊鞔_的依據(jù)。但間接抗人球蛋白試驗(yàn)則在明確血清抗體能否與正常的紅細(xì)胞有效結(jié)合方面發(fā)揮更大作用[7]。③酶處理紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)。這也是用來(lái)檢測(cè)血清中游離自身抗體的重要方法。試驗(yàn)將木瓜蛋白酶、胰蛋白酶等酶處理了的O 型紅細(xì)胞（Rh 基因型）分別與血清進(jìn)行孵育[8]。若產(chǎn)生凝集反應(yīng)則呈陽(yáng)性，反之則呈陰性。通過(guò)這一試驗(yàn)可有效提高不完全抗體致敏細(xì)胞的凝集敏感度。

除以上比較常用的檢測(cè)方法之外，還有氯喹放散試驗(yàn)、乙醚放散試驗(yàn)等。在進(jìn)行不規(guī)則抗體鑒定之前，應(yīng)首先將自身的抗體除去。最為理想的方法是將已經(jīng)放散了自身抗體的紅細(xì)胞來(lái)吸收自身的抗體。目前，放散試驗(yàn)的辦法比較多,而使用氯喹放散法能保證抗原活性紅細(xì)膜的完整性。氯喹放散試驗(yàn)?zāi)苋コ颊咦陨淼目贵w，使正反定型相一致。另外，由于有部分患者的自身抗體存在血型特異性特點(diǎn)，且以Rh 血型最為常見(jiàn)。此時(shí)，可使用乙醚放散液來(lái)替代血清，可避免由于患者自身抗體濃度過(guò)低造成漏檢的現(xiàn)象。另外，為使輸血更為安全，不應(yīng)選擇含對(duì)應(yīng)血型抗原的紅細(xì)胞，并在輸注前進(jìn)行洗滌。綜上所述，對(duì)應(yīng)AIHA 患者建議盡量不采取輸血治療，若一定要進(jìn)行，在輸血前則必須對(duì)AIHA 患者進(jìn)行不規(guī)則抗體及血型檢測(cè)，同時(shí)，必須取得家屬的同意，這對(duì)保證輸血的安全、有效性具有重要意義。

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