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        耐氧突變株對中藥射干中鳶尾黃素的生物轉(zhuǎn)化

        2014-01-09 07:38:16郭常亮王秀伶劉明月
        關(guān)鍵詞:中藥

        郭常亮,王秀伶,劉明月,陳 靜

        河北農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,保定 071000

        射干[Belamcanda chinensis (L.)DC]是鳶尾科射干屬植物射干的干燥根莖,具有清熱解毒、消痰、利咽等功效。中藥射干含黃酮類、酚類、萜類、甾體類等多種化學(xué)成分,其中鳶尾苷、野鳶尾苷等異黃酮是中藥射干的主要活性成分。馬林等于1996 年利用高效液相色譜技術(shù)對不同產(chǎn)地射干中的鳶尾苷、野鳶尾苷、鳶尾苷元、野鳶尾黃素和次野鳶尾黃素進(jìn)行了分離和定量分析[1];2006 年邱鷹昆等從射干的根莖中檢測到異野鳶尾苷、鳶尾黃素、野鳶尾黃素、野鳶尾苷等異黃酮[2]。藥理學(xué)研究結(jié)果表明,射干異黃酮類化合物具有明顯的抗菌、抗炎、清除自由基、護(hù)肝、防治糖尿病、抗腫瘤以及類似雌激素[3,4]等作用。目前有關(guān)射干化學(xué)成分分析及藥理作用的報(bào)道較多,而有關(guān)射干在體內(nèi)代謝及其藥代動(dòng)力學(xué)研究報(bào)道則較少。已有研究表明,鳶尾苷(tectoridin)在動(dòng)物腸道微生物菌群產(chǎn)生的葡萄糖苷酶作用下可被水解生成鳶尾黃素[5],而有關(guān)鳶尾黃素在腸道菌群作用下能否被進(jìn)一步代謝為新的代謝產(chǎn)物則報(bào)道極少。從可查找的文獻(xiàn)中目前僅發(fā)現(xiàn)一篇,即2008 年Chen 等報(bào)道在灌喂鳶尾苷的大鼠尿液中檢測到鳶尾黃素(tectorigenin)和二氫鳶尾黃素(dihydrotectorigenin)等鳶尾苷的代謝產(chǎn)物[6]。鳶尾黃素在C-2 和C-3 位被加氫還原后即得二氫鳶尾黃素(圖1)。迄今二氫鳶尾黃素在天然射干提取物中從未被檢測報(bào)道,故推測是大鼠腸道微生物菌群將鳶尾苷轉(zhuǎn)化為二氫鳶尾黃素。事實(shí)上,迄今尚未見從自然界中分離和人工合成二氫鳶尾黃素的報(bào)道,也未見將鳶尾黃素轉(zhuǎn)化為二氫鳶尾黃素的單一微生物菌株的報(bào)道。由于二氫鳶尾黃素資源匱乏,有關(guān)其生理和藥理活性方面迄今未見任何報(bào)道。

        圖1 鳶尾黃素及二氫鳶尾黃素的化學(xué)結(jié)構(gòu)Fig.1 Chemical structures of tectorigenin and dihydrotectorigenin

        菌株Niu-O16(AY263505)是我們從牛瘤胃胃液中分離的一株能將大豆異黃酮黃豆苷元和染料木素高效轉(zhuǎn)化為二氫黃豆苷元(dihydrodaidzein)和二氫染料木素(dihydrogenistein)的革蘭氏陽性嚴(yán)格厭氧細(xì)菌菌株[7]。為提高轉(zhuǎn)化菌株的耐氧特性,我們對厭氧牛瘤胃細(xì)菌菌株Niu-O16 進(jìn)行了耐氧馴化嘗試,菌株Aeroto-Niu-O16 是我們對厭氧菌株Niu-O16進(jìn)行長期耐氧馴化后成功獲得的一株耐氧突變株。與野生菌株Niu-O16 相比,耐氧突變株Aeroto-Niu-O16 的16S rRNA 基因序列發(fā)生兩個(gè)點(diǎn)突變,即G398A 和G438A[8]。需指出的是,我們于2005 年將菌株Niu-O16 從牛瘤胃胃液中分離并對其16S rRNA 基因序列進(jìn)行測定,通過BLAST 比對,當(dāng)時(shí)發(fā)現(xiàn)菌株Niu-O16 的16S rRNA 基因序列與未培養(yǎng)細(xì)菌Uncultured bacterium OTU-46 的相似性最高(98.1%),其次與乳桿菌屬菌株Lactobacillus vitulinus(91.5%)和Lactobacillus catenaformis(91.4%)的相似性較高;然而,目前通過BLAST 比對則發(fā)現(xiàn),野生菌株Niu-O16 及其耐氧突變株Aeroto-Niu-O16 與2008 年新命名的Sharpea 屬菌株相似性極高,菌株Niu-O16 及其耐氧突變株Aeroto-Niu-O16 與菌株Sharpea azabuensis strain JCM 14210、Sharpea azabuensis strain HM250 和 Sharpea azabuensis strain HM244 的相似性均高達(dá)99%。因此,我們將菌株Niu-O16 及其耐氧突變株Aeroto-Niu-O16 重新歸屬為Sharpea 屬菌株,即Sharpea sp.Niu-O16 和Sharpea sp.Aeroto-Niu-O16。

        通過本研究發(fā)現(xiàn),耐氧突變株Sharpea sp.Aeroto-Niu-O16 能將中藥射干甲醇提取物的酸水解產(chǎn)物中的鳶尾黃素轉(zhuǎn)化為二氫鳶尾黃素。以微生物菌株為生物酶源,將鳶尾黃素轉(zhuǎn)化為二氫鳶尾黃素尚屬國內(nèi)外首次。

        1 儀器與試劑

        1.1 儀器

        Waters 高效液相色譜系統(tǒng)(含Waters 1525 泵,Waters 2487 雙通道紫外檢測器,Breeze 色譜工作站,美國Waters 公司);Finnigan LCQ Advantage 離子阱質(zhì)譜儀,ESI 離子源(美國Thermo Finnigan 公司);Bruker AVANCE 400 型超導(dǎo)核磁共振波譜儀(美國Bruker 公司);DU-650 可見-紫外分光光度計(jì)(美國Beckmen 公司);HH-S4 型電熱恒溫水浴鍋(北京科偉永興儀器有限公司);Centrifuge 5417R 型低溫高速離心機(jī)(Eppendorf);AS10200BT 超聲波清洗器(天津奧特賽恩儀器有限公司);DK-VC010-IR 真空離心濃縮儀(韓國DAIKI 公司);SHZ-Ⅲ型循環(huán)水真空泵(上海亞榮生化儀器廠);RE-2000B 型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(上海亞榮生化儀器廠);DHP-2000 型電熱恒溫培養(yǎng)箱(天津市華北實(shí)驗(yàn)儀器有限公司)。

        1.2 試劑

        乙腈、甲醇和乙酸乙酯均為色譜純(美國Fisher公司)。實(shí)驗(yàn)藥材射干(Belamcanda Chinensis)購于保定市華興大藥房,鳶尾黃素標(biāo)準(zhǔn)品購自南京森貝伽生物科技有限公司;腦心浸液(BHI)培養(yǎng)基(美國Difco 公司)。

        2 實(shí)驗(yàn)方法

        2.1 色譜條件

        分析液相色譜條件:Kromasil C18色譜柱(250 mm × 4.6 mm,5 μm);流動(dòng)相:A 為10% 乙腈-0.1%冰乙酸水溶液,B 為90%乙腈-0.1%冰乙酸水溶液。洗脫方法:A∶B=65∶35(v/v);流速:1 mL/min;進(jìn)樣量:20 μL。由于底物鳶尾黃素的最大紫外吸收波長為265 nm,經(jīng)檢測產(chǎn)物二氫鳶尾黃素的最大紫外吸收波長為292 nm,因而,本研究選取280 nm 作為同時(shí)檢測底物鳶尾黃素和產(chǎn)物二氫鳶尾黃素的檢測波長。

        制備液相色譜條件:Kromasil C18制備柱(250 mm × 10 mm,5 μm);流速:2.0 mL/min;檢測波長292 nm,其余同分析檢測轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的液相色譜條件。

        2.2 底物鳶尾黃素粗品的制備

        鳶尾黃素粗品的制備方法:稱取射干粉末10 g于250 mL 三角瓶中,加入純甲醇100 mL 在室溫下超聲提取2 次,每次超聲30 min,過濾,合并濾液,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮蒸干,再按30 mL/g 加入6%鹽酸,在80 ℃水浴鍋中保溫3 h 進(jìn)行酸水解。水解結(jié)束后,待水解液冷卻至室溫,用8 mol/L NaOH 溶液中和。然后按體積比1∶1 加入乙酸乙酯進(jìn)行萃取。乙酸乙酯蒸干,加入適量體積的100%甲醇溶液,得到40~60 mmol/L 的鳶尾黃素粗品溶液,4 ℃冰箱密閉保存?zhèn)溆谩4制分续S尾黃素的濃度,根據(jù)粗品中鳶尾黃素的峰面積及鳶尾黃素標(biāo)準(zhǔn)品的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得到。

        2.3 代謝產(chǎn)物的分離純化

        將10 mL 菌株Aeroto-Niu-O16 的培養(yǎng)液接種于盛有100 mL 新鮮BHI 液體培養(yǎng)基的250 mL 三角瓶中,并加入4 mL 濃度為20 mmol/L 底物鳶尾黃素母液,在37 ℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)48 h。用等量乙酸乙酯萃取發(fā)酵液,蒸干后溶于100%甲醇溶液,并過0.45 μm 有機(jī)膜,用制備色譜柱進(jìn)行分離,收集代謝產(chǎn)物峰,并用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸干,4 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

        2.4 代謝產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)鑒定

        對分離純化后的代謝產(chǎn)物的紫外吸收圖譜、質(zhì)譜、核磁共振氫譜(1H NMR)和碳譜(13C NMR)等進(jìn)行測定,根據(jù)圖譜分析結(jié)果對代謝產(chǎn)物的化學(xué)結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定。

        2.5 菌株對底物鳶尾黃素的轉(zhuǎn)化動(dòng)態(tài)

        制備新鮮BHI 培養(yǎng)基,以10%接種量將菌株Aeroto-Niu-O16 培養(yǎng)液接種到新鮮BHI 液體培養(yǎng)基中,同時(shí)加入終濃度為0.4 mmol/L 的底物鳶尾黃素,置于37 ℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng),分別在加入底物后6、12、18、24、36、48 和72 h 取樣進(jìn)行高效液相色譜檢測,每個(gè)樣品三次重復(fù),記錄數(shù)據(jù),繪制轉(zhuǎn)化動(dòng)態(tài)曲線。

        2.6 菌株最大轉(zhuǎn)化濃度測定

        將菌株Aeroto-Niu-O16 培養(yǎng)液按10%接種量接種到新鮮BHI 液體培養(yǎng)基中,同時(shí)分別加入終濃度為0.4、0.6、0.8、1.0 和1.2 mmol/L 的底物鳶尾黃素,在37 ℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)48 h,用高效液相色譜檢測底物被轉(zhuǎn)化情況。

        2.7 不同還原劑對轉(zhuǎn)化活性的影響

        將菌株Aeroto-Niu-O16 培養(yǎng)液按10%接種量接種到新鮮BHI 培養(yǎng)基中,加入終濃度為0.8 mmol/L的底物鳶尾黃素,再分別加入不同濃度[0.05%、0.1%和0.15%(m/v)]的抗壞血酸、L-半胱氨酸和硫代硫酸鈉,培養(yǎng)和檢測條件同上所述,用HPLC 檢測不同還原劑對菌株轉(zhuǎn)化活性的影響。

        3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

        3.1 底物鳶尾黃素的分離制備

        底物鳶尾黃素是中藥射干甲醇提取物經(jīng)酸水解后制得。中藥射干的甲醇提取物在保留時(shí)間3.4 min 處出現(xiàn)一主要物質(zhì)峰(峰1,圖2),推測其為中藥射干主要活性成分鳶尾苷。中藥射干甲醇提取物經(jīng)酸水解后,原來出現(xiàn)在保留時(shí)間3.4 min 處的主要物質(zhì)峰完全消失,而在保留時(shí)間13.1 min 處出現(xiàn)一主要物質(zhì)峰(峰2,圖2),該主要物質(zhì)峰在265 nm有最大紫外吸收,這恰好與文獻(xiàn)中報(bào)道的鳶尾黃素[9]的最大紫外吸收相吻合。通過負(fù)離子模式質(zhì)譜分析(ESI-MS)發(fā)現(xiàn)其[M-H]-為299,因而,圖2中峰2 的相對分子量應(yīng)該為300,這恰好與鳶尾黃素(C16H12O6)的分子量吻合。根據(jù)酸水解出現(xiàn)的主要物質(zhì)峰的最大紫外吸收圖譜、相同條件下鳶尾黃素標(biāo)準(zhǔn)品在高效液相色譜上的保留時(shí)間(圖2)以及質(zhì)譜測定結(jié)果,將酸水解后出現(xiàn)的主要物質(zhì)峰(即峰2)鑒定為鳶尾黃素。

        圖2 射干粗提物洗脫色譜圖(實(shí)線)及射干粗提物水解后的洗脫色譜圖(虛線)Fig.2 HPLC elution profiles of the crude extract of Belamcanda chinensis (regular line)and the hydrolyzate of the crude extract of Belamcanda chinensis (dashed line)

        3.2 代謝產(chǎn)物的分離制備與結(jié)構(gòu)鑒定

        底物鳶尾黃素與耐氧菌株Sharpea sp.Aeroto-Niu-O16 共培養(yǎng)后,用高效液相色譜除檢測到部分未被轉(zhuǎn)化的底物鳶尾黃素(峰2,保留時(shí)間13.1 min)外,在保留時(shí)間11.2 min 處檢測到一新物質(zhì)峰(峰3),該新物質(zhì)峰隨底物鳶尾黃素的減少而成比例增加,因而確定峰3 為底物鳶尾黃素被菌株Aeroto-Niu-O16 轉(zhuǎn)化后生成的代謝產(chǎn)物峰(圖3),該代謝產(chǎn)物峰在292 nm 有最大紫外吸收。

        圖3 鳶尾黃素與耐氧突變株Sharpea sp.Aeroto-Niu-O16 共培養(yǎng)2 d 后的洗脫色譜圖Fig.3 HPLC elution profiles of tectorigenin after 2 days incubation with the oxygen-tolerant mutant strain Sharpea sp.Aeroto-Niu-O16

        為鑒定代謝產(chǎn)物的化學(xué)結(jié)構(gòu),我們將代謝產(chǎn)物分離純化后進(jìn)行負(fù)離子模式質(zhì)譜分析(ESI-MS),測定結(jié)果為:ESI(-):m/z 301 ([M-H]-);MS/MS(rel.int.%):m/z 180 (15),195 (75),286 (100)。根據(jù)質(zhì)譜測定結(jié)果可知,該代謝產(chǎn)物峰的分子量應(yīng)該為302,這恰好與二氫鳶尾黃素(C16H14O6)的分子量吻合。為進(jìn)一步準(zhǔn)確鑒定代謝產(chǎn)物的化學(xué)結(jié)構(gòu),我們對純化后產(chǎn)物又分別進(jìn)行了核磁共振氫譜(1H NMR)和碳譜(13C NMR)分析,測定結(jié)果如下:1H NMR (400 MHz,DMSO-d6)δ:12.23 (1H,s,5-OH),10.70 (1H,s,7-OH),9.40 (1H,s,4'-OH),7.08 (2H,d,J=8.4 Hz,H-2',6'),6.72 (2H,d,J=8.4 Hz,H-3',5'),5.98 (1H,s,H-8),4.51 (2H,d,J=6.6 Hz,H-2),4.00 (1H,t,J=6.6 Hz,H-3),3.66(3H,s,6-OCH3);13C NMR (100 MHz,DMSO-d6)δ:198.1 (C-4),160.0 (C-4'),158.5 (C-7),157.2(C-9),156.0 (C-5),130.1 (C-2',6'),129.6 (C-6),126.1 (C-1'),115.8 (C-3',5'),102.3 (C-10),95.2 (C-8),71.4 (C-2),60.4 (6-OCH3),49.8 (C-3)。根據(jù)質(zhì)譜、核磁共振氫譜和碳譜等分析結(jié)果,將菌株Aeroto-Niu-O16 代謝底物鳶尾黃素生成的代謝產(chǎn)物鑒定為二氫鳶尾黃素。

        3.3 菌株Aeroto-Niu-O16 對底物鳶尾黃素的轉(zhuǎn)化動(dòng)態(tài)

        為確定菌株Aeroto-Niu-O16 對底物鳶尾黃素的最佳轉(zhuǎn)化時(shí)間,分別在不同時(shí)間對轉(zhuǎn)化菌與底物的培養(yǎng)物進(jìn)行取樣測定。由圖4 可以看出,菌株Aeroto-Niu-O16 在與底物鳶尾黃素共培養(yǎng)的前12 h 內(nèi),隨底物濃度的急劇降低產(chǎn)物二氫鳶尾黃素濃度迅速增加;當(dāng)培養(yǎng)時(shí)間延長至36 h 時(shí),菌體對底物鳶尾黃素的轉(zhuǎn)化率達(dá)到最大;此后,隨培養(yǎng)時(shí)間延長,產(chǎn)物濃度稍有降低。因此確定菌株Aeroto-Niu-O16 對底物鳶尾黃素的最佳轉(zhuǎn)化時(shí)間為36~48 h。

        圖4 耐氧突變株Sharpea sp.Aeroto-Niu-O16 在液體BHI培養(yǎng)基中對底物鳶尾黃素的轉(zhuǎn)化動(dòng)態(tài)圖Fig.4 Biotransformation kinetics of tectorigenin by the oxygen-tolerant mutant strain Sharpea sp.Aeroto-Niu-O16 in BHI liquid medium

        3.4 耐氧突變株Aeroto-Niu-O16 對不同濃度底物鳶尾黃素最大轉(zhuǎn)化能力測定

        當(dāng)?shù)孜秫S尾黃素粗品中鳶尾黃素濃度為0.4、0.6 和0.8 mmol/L 時(shí),菌株Aeroto-Niu-O16 對底物鳶尾黃素的平均轉(zhuǎn)化率分別為42.7%、43.1% 和41.2%;當(dāng)?shù)孜秫S尾黃素粗品中鳶尾黃素濃度增至1.0 和1.2 mmol/L 時(shí),菌株Aeroto-Niu-O16 對底物鳶尾黃素的平均轉(zhuǎn)化率急劇下降為28.7%和23.3%(圖5)。此外,本研究還發(fā)現(xiàn),菌株Aeroto-Niu-O16 對相同濃度鳶尾黃素純品轉(zhuǎn)化能力與粗品中的鳶尾黃素?zé)o顯著差異,但無論是對鳶尾黃素純品還是對粗品中的鳶尾黃素的轉(zhuǎn)化率均較低。

        圖5 耐氧突變株Sharpea sp.Aeroto-Niu-O16 對不同濃度底物鳶尾黃素的轉(zhuǎn)化能力圖Fig.5 Bioconversion capacity of the strain Sharpea sp.Aeroto-Niu-O16 after being incubated with different concentrations of the substrate tectorigenin

        3.5 不同還原劑對菌株Aeroto-Niu-O16 轉(zhuǎn)化活性的影響

        為提高菌株轉(zhuǎn)化效率,實(shí)驗(yàn)以濃度為0.8 mmol/L 的鳶尾黃素粗品為底物,分別測定了不同還原劑對菌株Aeroto-Niu-O16 轉(zhuǎn)化底物鳶尾黃素的影響。結(jié)果表明,向培養(yǎng)基中添加0.15%(m/v)的L-半胱氨酸能顯著提高菌株對底物鳶尾黃素的轉(zhuǎn)化率,而添加相同濃度的抗壞血酸和硫代硫酸鈉則作用不顯著。添加0.15%(m/v)的L-半胱氨酸可將平均轉(zhuǎn)化率從40.1%提高到50.7%(P <0.05)。

        4 討論

        本研究所用轉(zhuǎn)化菌株Sharpia sp.Aeroto-Niu-O16 為牛瘤胃細(xì)菌菌株Sharpia sp.Niu-O16 的耐氧突變株,該耐氧突變株能在有空氣氧條件下分別將底物大豆異黃酮黃豆苷元和染料木素進(jìn)行加氫還原[8]。此前,我們曾以耐氧突變株Aeroto-Niu-O16為生物酶源對中藥甘草主要活性成分甘草素進(jìn)行轉(zhuǎn)化嘗試,結(jié)果發(fā)現(xiàn),耐氧突變株Aeroto-Niu-O16 能在有氧條件下將底物甘草素開環(huán)轉(zhuǎn)化為達(dá)維莢蒾苷元[10]。通過本研究發(fā)現(xiàn),耐氧突變株Aeroto-Niu-O16 能將中藥射干主要活性成分鳶尾黃素進(jìn)行加氫還原。天然產(chǎn)物鳶尾黃素和黃豆苷元及染料木素均屬異黃酮類化合物,而底物甘草素則為黃酮類化合物,因而,我們推測耐氧突變株Aeroto-Niu-O16 對異黃酮類化合物進(jìn)行的是加氫還原轉(zhuǎn)化,而對黃酮類化合物則進(jìn)行開環(huán)轉(zhuǎn)化。然而,值得一提的是,我們曾以耐氧突變株Aeroto-Niu-O16 為生物酶源,對包括銀杏葉、黃芩、金蓮花、密蒙花、蘆丁、葛根、淫羊藿等在內(nèi)的多種中藥活性成分進(jìn)行轉(zhuǎn)化嘗試,但結(jié)果均未能轉(zhuǎn)化,這表明耐氧突變株Aeroto-Niu-O16 產(chǎn)生的轉(zhuǎn)化酶具有較強(qiáng)的底物選擇性。目前我國中藥種類上萬種,但從現(xiàn)有中藥資源中挖掘結(jié)構(gòu)新穎的有效成分難度越來越大。將微生物轉(zhuǎn)化技術(shù)引入中藥是增加天然化合物多樣性的有效方法,對發(fā)掘具有自主知識產(chǎn)權(quán)的新高效活性先導(dǎo)化合物將具有開創(chuàng)性意義。對目前已確定生理和藥理活性的中藥主要活性成分進(jìn)行微生物轉(zhuǎn)化主要有兩個(gè)途徑:一是用菌種保藏機(jī)構(gòu)、或其它機(jī)構(gòu)或個(gè)人實(shí)驗(yàn)室分離保藏的菌種去嘗試篩選能夠被轉(zhuǎn)化的中藥種類及活性成分,這種篩選方法相對簡單,但因微生物酶對底物具有專一性,通常不易找到可被轉(zhuǎn)化的中藥活性成分;途徑二就是固定所要轉(zhuǎn)化的中藥活性成分,從環(huán)境微生物菌群(如動(dòng)物腸道、植物內(nèi)生菌等)中去篩選轉(zhuǎn)化菌株。這種篩選方法工作量較大,但篩選目的性強(qiáng),往往能分離得到具有轉(zhuǎn)化某一中藥活性成分的功能菌株,一旦應(yīng)用于生產(chǎn),更有利于實(shí)現(xiàn)傳統(tǒng)中藥的現(xiàn)代化和國際化。

        但通過本研究發(fā)現(xiàn),無論是以鳶尾黃素純品為底物還是以射干甲醇提取物酸水解產(chǎn)物中的鳶尾黃素為底物,耐氧突變株Sharpea sp.Aeroto-Niu-O16對底物鳶尾黃素轉(zhuǎn)化率均較低,在添加L-半胱氨酸、抗壞血酸和硫代硫酸鈉等不同還原劑后,只有添加L-半胱氨酸能使轉(zhuǎn)化率有明顯提高,但在添加L-半胱氨酸后的轉(zhuǎn)化率也只有50%左右。此外,我們還嘗試使用未馴化的野生菌株Niu-O16 以及耐氧突變株Aeroto-Niu-O16 在嚴(yán)厭工作站內(nèi)轉(zhuǎn)化底物鳶尾黃素,但轉(zhuǎn)化率均在60%~70%之間,因此,要實(shí)現(xiàn)二氫鳶尾黃素的高效微生物合成還需進(jìn)一步提高耐氧突變株Aeroto-Niu-O16 的轉(zhuǎn)化效率或重新從微生物菌群中分離能將鳶尾黃素高效轉(zhuǎn)化為二氫鳶尾黃素的單一微生物菌株??傊?,我國射干和鳶尾資源豐富,便于底物鳶尾黃素的分離提取,隨著對代謝產(chǎn)物二氫鳶尾黃素的藥理活性及作用機(jī)制研究的不斷深入,二氫鳶尾黃素有望研發(fā)成一種可以治療多種疾病的新型藥物。

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