晏 琛 邵江華

原發(fā)性肝細胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC，以下簡稱肝癌）是世界上最常見的惡性腫瘤之一，死亡率在惡性腫瘤中位居第三。我國每年肝癌的死亡人數(shù)約11萬人，占全世界肝癌死亡人數(shù)的45%［1-2］。研究表明，肝癌具有多種誘發(fā)因素，如肝硬化、乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）和丙型肝炎病毒（hepatitis C virus，HCV）感染、糖尿病以及黃曲霉毒素等［2］。肝癌發(fā)生、發(fā)展的分子生物學(xué)機制非常復(fù)雜，至今仍不明確。近年來有大量的研究表明類泛素蛋白（Ubiquitin-like proteins，UBLs）功能失調(diào)在人類惡性腫瘤包括肝癌的發(fā)生、發(fā)展過程中發(fā)揮了重要作用，并且可能成為一個新的腫瘤防治靶點［3］。類泛素蛋白發(fā)揮功能的重要方式是類泛素化修飾，它們通過對底物蛋白進行翻譯后修飾參與到蛋白質(zhì)降解、蛋白質(zhì)功能調(diào)節(jié)以及基因損傷修復(fù)等生理過程中［4-5］。因此，闡明類泛素蛋白在肝癌發(fā)生發(fā)展過程中的作用機制將有助于為臨床治療提供理論基礎(chǔ)，制定合理有效的治療方案。本綜述就以下幾種類泛素蛋白與肝癌的關(guān)系做一闡述。

1 類泛素蛋白的結(jié)構(gòu)及其酶修飾系統(tǒng)

類泛素蛋白是一類蛋白質(zhì)序列和空間結(jié)構(gòu)與泛素類似的蛋白［6］。它們具有一個或多個泛素樣結(jié)構(gòu)域，即三維核心結(jié)構(gòu)-β-抓握折疊和C端甘氨酸-甘氨酸模體，這一結(jié)構(gòu)域是類泛素蛋白結(jié)合底物的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)［6］。本文中介紹的類泛素蛋白結(jié)構(gòu)［6-7］見圖1，表1。

大多數(shù)類泛素蛋白可以通過級聯(lián)酶催化與底物蛋白進行結(jié)合，并且其酶修飾系統(tǒng)的成員與泛素化酶修飾系統(tǒng)存在交叉，一般包括4類修飾酶，分別是泛素激活酶E1、泛素綴合酶E2、泛素連接酶E3和解聚酶［6-8］。類泛素化修飾過程以類泛素蛋白C端甘氨酸被E1激活酶激活為開端，隨后將類泛素蛋白的一部分鏈接在E1激活酶的半胱氨酸的巰基上［8］。類泛素蛋白E1激活酶復(fù)合物接著與E2酶相互作用，類泛素蛋白被轉(zhuǎn)移到E2綴合酶的特定半胱氨酸上。最后在E3連接酶幫助下，類泛素蛋白選擇性的結(jié)合底物蛋白或其他大分子。同時現(xiàn)在大部分類泛素化修飾過程中存在解聚酶，它可以將類泛素蛋白與底物蛋白分離，從而使類泛素化修飾成為一個可逆的過程［8］。

圖1 SUMO，NEDD8，F(xiàn)AT10，ISG15與泛素的差異Figure 1 Difference between SUMO，NEDD8，F(xiàn)AT10，ISG15，and Ubiquitin

表1 SUMO，NEDD8，F(xiàn)AT10，ISG15與泛素的差異Table 1 Difference between SUMO,NEDD8,FAT10,ISG15,and Ubiquitin

2 類泛素蛋白在肝癌發(fā)生、發(fā)展中的作用

我國肝癌高發(fā)率與HBV病毒感染率高密切相關(guān)，同時肝癌細胞擁有很高的增殖和抗凋亡能力，而且肝癌對現(xiàn)有的化療藥物普遍不敏感，使得肝癌治療更加棘手［9-11］。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，類泛素蛋白主要參與病毒性肝炎向肝癌的轉(zhuǎn)化、肝癌增殖能力的調(diào)節(jié)、肝癌新生血管的生成以及化療敏感性等過程（圖2），其中主要有泛素相關(guān)小修飾蛋白（Small Ubiquitin-like Modifier，SUMO），神經(jīng)前體細胞表達發(fā)育調(diào)控蛋白8（neural precursor cell expressed developmentally down-regulated 8，NEDD8），雙泛素（HLA-F adjacent transcript 10，F(xiàn)AT10），干擾素刺激基因15（interferon-stimulated gene 15，ISG15）。

圖2 類泛素蛋白在肝癌中的主要作用模式圖Figure 2 Primary role of ubiquitin-like proteins in hepatocellular carcinoma

2.1 SUMO蛋白與肝癌的關(guān)系

SUMO蛋白由一個泛素樣結(jié)構(gòu)域組成，哺乳動物中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)四種SUMO蛋白亞型：SUMO1、SUMO2、SUMO3 和 SUMO4［12-13］。SUMO 結(jié) 合底物蛋白需要SUMO E1酶 SAE1/SAE2（SUMO-activating enzyme 1/SUMO-activating enzyme 2，SAE1/SAE2）復(fù)合體，特異的E2酶Ubc9以及多種E3酶［13］?，F(xiàn)在已知6種SUMO解聚酶可以使SUMO蛋白與底物蛋白分離［13］。SUMO蛋白在細胞生理過程中主要參與穩(wěn)定蛋白，核質(zhì)轉(zhuǎn)運，轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)等功能［13］。

在Guo等［14］研究中首次發(fā)現(xiàn)在肝癌臨床組織標本和肝癌細胞系中SUMO1表達水平普遍升高，并且干擾SUMO1表達可以抑制肝癌SMMC-7721細胞的增殖能力，表明SUMO1可能成為肝癌的潛在治療靶點。研究者們還發(fā)現(xiàn)，肝癌中SUMO化修飾水平普遍增高，并促進肝癌的發(fā)生、發(fā)展［15］。Shen等［16］的研究中發(fā)現(xiàn)，β-連環(huán)蛋白的SUMO化修飾增強可以促進肝癌Hep-G2細胞的增殖能力。上述研究表明：SUMO及SUMO化水平在肝癌的增殖中起到促進作用，干擾SUMO可以降低肝癌的增殖能力，為肝癌的治療提供新的作用靶點。

2.2 NEDD8蛋白與肝癌的關(guān)系

NEDD8蛋白由一個泛素樣結(jié)構(gòu)域組成，它結(jié)合底物蛋白的過程需要NEDD8 E1激活酶（NEDD8-activating enzyme，NAE），特異的E2酶Ubc12、Ube2f以及多種E3酶［17］。NEDD化修飾是一個可逆的過程，現(xiàn)在已知7種NEDD8解聚酶可以使NEDD8蛋白與底物蛋白分離［17］。NEDD8蛋白在細胞生理過程中主要參與穩(wěn)定蛋白，調(diào)節(jié)底物蛋白活性以及轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)等功能［17］。

NEDD8的靶蛋白目前發(fā)現(xiàn)有p53、鼠雙微體基因（murine double mimute2，MDM2）、希佩爾林道基因（Von Hippel-l indau，VHL）和 Cullin家 族（Cullin-Ring E3 ligases，CRLs），通過調(diào)控這些靶蛋白從而影響腫瘤的發(fā)生和增殖［17-19］。在肝癌細胞中，NEDD8通過對靶蛋白MDM2調(diào)控從而影響肝癌細胞的增殖［20］。HuR蛋白（Hu antigen R，HuR）是一個RNA結(jié)合蛋白，主要起到調(diào)節(jié)細胞分化、增殖和存活的作用［21］。Embade等［20］研究發(fā)現(xiàn)NEDD8可以通過MDM2結(jié)合HuR蛋白從而抑制HuR降解，使肝癌細胞內(nèi)HuR蛋白增多，進而促進肝癌細胞的增殖，這表明NEDD8/MDM2/HuR通路可以調(diào)節(jié)肝癌細胞的增殖能力。

2.3 FAT10蛋白與肝癌的關(guān)系

FAT10蛋白由兩個泛素樣結(jié)構(gòu)域組成，F(xiàn)AT10具有兩個E1激活酶UBE1、UBA6，特異的E2酶USE1，但其E3酶以及解聚酶并未見報道［22］。近年來研究表明，F(xiàn)AT10在腫瘤中涉及免疫炎性介導(dǎo)、核質(zhì)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、染色體穩(wěn)定和細胞周期調(diào)控等功能［22-23］。

研究發(fā)現(xiàn)，在90%的肝癌患者中發(fā)現(xiàn)FAT10高表達［24］。有研究在藥物誘導(dǎo)小鼠肝癌模型中發(fā)現(xiàn)高表達FAT10可以促進癌前病變和腫瘤的形成［25-26］，并且下調(diào)FAT10可以抑制馬洛里小體的生成進而抑制肝癌形成。在中國漢族人群中，F(xiàn)AT10基因遺傳變異與肝癌的易感性和不良預(yù)后密切相關(guān)［27］。在進一步研究中發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)AT10與eEF1A1發(fā)生相互作用，通過調(diào)節(jié)eEF1A1的表達參與到肝癌的發(fā)生、發(fā)展過程中［28］。HBV病毒感染作為肝癌最常見的危險因素，肝癌合并慢性HBV感染的患者比例在總患者占50%以上［10-11］，在Liu等［29］的研究中發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)AT10高表達在肝癌合并慢性HBV感染的患者中提示預(yù)后不良，并且FAT10的表達與肝癌復(fù)發(fā)和侵襲轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)。綜上所述，研究FAT10在肝癌中的作用有助于明確肝癌的發(fā)病機制，并為預(yù)測肝癌預(yù)后提供潛在的標志物。

2.4 ISG15蛋白與肝癌的關(guān)系

ISG15蛋白由兩個泛素樣結(jié)構(gòu)域組成，ISG15結(jié)合底物過程主要涉及4種修飾酶，分別是E1激活酶Ube1L、E2綴合酶UBCH8、E3連接酶Herc5和解聚酶UBP43［30］。ISG15在腫瘤免疫、腫瘤微環(huán)境和腫瘤化療敏感性中都發(fā)揮著重要作用［31-33］。

Kim等［34］發(fā)現(xiàn)，ISG15酶修飾系統(tǒng)可以調(diào)節(jié)HBV病毒的復(fù)制過程，進而影響慢性乙型肝炎患者向肝癌的發(fā)展。同時HCV病毒感染也是肝癌誘發(fā)因素之一［35］。Broering等［36］研究發(fā)現(xiàn)，ISG15可以作為HCV的前病毒因子，在HCV復(fù)制過程中起重要作用，抑制ISG15的功能可以為傳統(tǒng)治療無效的HCV病毒感染提供新的治療途徑。研究還發(fā)現(xiàn)ISG15的表達和HCV病毒感染有密切關(guān)系［37］。MicroRNA-130a可以抑制HCV病毒復(fù)制，其中可能是通過調(diào)節(jié)ISG15的表達發(fā)揮作用［38］。這些研究表明：ISG15蛋白在HBV及HCV病毒感染中的作用很有可能是病毒相關(guān)性肝癌的發(fā)生機制之一，這可能為病毒相關(guān)性肝癌的治療提供一個新的靶點。

3 類泛素蛋白與肝癌治療

由于早期肝癌臨床癥狀相對不明顯并且缺乏有效的診斷方法，很多患者診斷時就處于晚期，從而喪失了根治性手術(shù)治療的最佳時機［39］?；熥鳛閻盒阅[瘤治療的一個主要手段，但在肝癌的治療中并沒有顯著效果，這主要歸因于肝癌對化療敏感性差，且化療藥物治療劑量較大、毒副作用明顯。以上因素使得肝癌患者的治療手段受到限制，直到今天都沒有系統(tǒng)的治療方案［40-42］。為了改善肝癌患者的治療效果，提高肝癌化療敏感性是一個關(guān)鍵性的問題［43］。索拉非尼作為近年來肝癌靶向治療的突破，雖然一定程度延長了晚期肝癌患者的生存時間，但是它仍然有很多不足，因此肝癌迫切需要更多有效的治療手段［39，41］。

Qin等［44］研究發(fā)現(xiàn)，SUMO化修飾水平升高與肝癌化療敏感性差密切相關(guān)。Li等［45］的研究發(fā)現(xiàn)，E3連接酶多梳蛋白4可以通過改變SUMO化修飾水平，參與到肝癌細胞血管生成過程中。Qian等［46］研究發(fā)現(xiàn)，抑制SUMO特異性解聚酶6可以降低肝癌細胞中的SUMO化水平，從而增強肝癌細胞的放療敏感性。這顯示降低SUMO化水平可以抑制肝癌的生長，提高肝癌的治療效果，為肝癌分子靶向治療提供了新的靶標。

MLN4924作為一個NEDD8修飾系統(tǒng)的抑制劑在多種惡性腫瘤中已經(jīng)開始了Ⅰ期臨床藥物試驗，并且已經(jīng)取得了顯著的治療效果［47-48］。MLN4924主要通過抑制NEDD8的E1激活酶NAE活性，降低NEDD8類泛素化修飾水平，進而通過調(diào)節(jié)靶蛋白降解和基因損傷修復(fù)等功能參與到抗腫瘤作用中［47-48］。MLN4924在肝癌中治療尚未開展，但Luo等［49］的研究發(fā)現(xiàn)MLN4924可以促進肝癌細胞的自噬和凋亡發(fā)生，為MLN4924的肝癌臨床治療提供理論依據(jù)。

Liu等［29］研究發(fā)現(xiàn)，干擾FAT10表達可以提高5-氟尿嘧啶對肝癌細胞的殺傷作用，這說明FAT10蛋白異常高表達在肝癌化療不敏感中起到了重要作用。干擾FAT10的表達可以作為提高肝癌化療敏感性的特異靶點。

4 展望

類泛素蛋白在細胞的正常生命活動中充當(dāng)著重要的角色，然而隨著研究的不斷深入，類泛素蛋白功能與肝癌的聯(lián)系已漸漸進入了研究者們的視線。類泛素蛋白不僅可以促進慢性病毒性肝炎患者向肝癌的惡性轉(zhuǎn)化，而且還直接或間接參與肝癌的增殖、凋亡等過程中，這些功能都可以直接影響到肝癌患者的診治和預(yù)后；同時類泛素蛋白與肝癌放化療敏感性的關(guān)系以及在血管新生過程中的作用又使類泛素蛋白可能成為肝癌治療的新靶點。然而，類泛素蛋白在肝癌增殖、凋亡等過程中的具體機制尚不明確，更多類泛素蛋白在肝癌發(fā)生和發(fā)展中作用機制的研究可以使其成為一個肝癌防治新靶點提供更多的理論基礎(chǔ)。

1 Chung KY,Cheng IK,Ching AK,et al.Block of proliferation 1(BOP1)plays an oncogenic role in hepatocellular carcinoma by promoting epithelial-to-mesenchymal transition[J].Hepatology,2011,54(1):307-318.

2 Marrero JA.Multidisciplinary management of hepatocellular carcinoma:where are we today?[J].Semin Liver Dis,2013,33(Suppl 1):S3-S10.

3 Da SS,Paiva SL,Lukkarila JL,et al.Exploring a new frontier in cancer treatment:targeting the ubiquitin and ubiquitin-like activating enzymes[J].J Med Chem,2013,56(6):2165-2177.

4 Herrmann J,Lerman LO,Lerman A.Ubiquitin and ubiquitin-like proteins in protein regulation[J].Circ Res,2007,100(9):1276-1291.

5 Zhao Y,Brickner JR,Majid MC,et al.Crosstalk between ubiquitin and other post-translational modifications on chromatin during double-strand break repair[J].Trends Cell Biol,2014,24(7):426-434.

6 van der Veen AG,Ploegh HL.Ubiquitin-like proteins[J].Annu Rev Biochem,2012,81:323-357.

7 Hochstrasser M.Origin and function of ubiquitin-like proteins[J].Nature,2009,458(7237):422-429.

8 Vertegaal AC.Uncovering ubiquitin and ubiquitin-like signaling networks[J].Chem Rev,2011,111(12):7923-7940.

9 Forner A,Llovet JM,Bruix J.Hepatocellular carcinoma[J].Lancet,2012,379(9822):1245-1255.

10 Yuen MF,Hou JL,Chutaputti A.Hepatocellular carcinoma in the Asia pacific region[J].J Gastroenterol Hepatol,2009,24(3):346-353.

11 Sherman M.Hepatocellular carcinoma:epidemiology,surveillance,and diagnosis[J].Semin Liver Dis,2010,30(1):3-16.

12 Wilkinson KA,Henley JM.Mechanisms,regulation and consequences of protein SUMOylation[J].Biochem J,2010,428(2):133-145.

13 Cubenas-Potts C,Matunis MJ.SUMO:a multifaceted modifier of chromatin structure and function[J].Dev Cell,2013,24(1):1-12.

14 Guo WH,Yuan LH,Xiao ZH,et al.Overexpression of SUMO-1 in hepatocellular carcinoma:a latent target for diagnosis and therapy of hepatoma[J].J Cancer Res Clin Oncol,2011,137(3):533-541.

15 Tomasi ML,Tomasi I,Ramani K,et al.S-adenosyl methionine regulates ubiquitin-conjugating enzyme 9 protein expression and sumoylation in murine liver and human cancers[J].Hepatology,2012,56(3):982-993.

16 Shen HJ,Zhu HY,Yang C,et al.SENP2 regulates hepatocellular carcinoma cell growth by modulating the stability of beta-catenin[J].Asian Pac J Cancer Prev,2012,13(8):3583-3587.

17 Watson IR,Irwin MS,Ohh M.NEDD8 pathways in cancer,Sine Quibus Non[J].Cancer Cell,2011,19(2):168-176.

18 Russell RC,Ohh M.NEDD8 acts as a'molecular switch'defining the functional selectivity of VHL[J].EMBO Rep,2008,9(5):486-491.

19 Xirodimas DP,Saville MK,Bourdon JC,et al.Mdm2-mediated NEDD8 conjugation of p53 inhibits its transcriptional activity[J].Cell,2004,118(1):83-97.

20 Embade N,Fernandez-Ramos D,Varela-Rey M,et al.Murine double minute 2 regulates Hu antigen R stability in human liver and colon cancer through NEDDylation[J].Hepatology,2012,55(4):1237-1248.

21 Wang H,Zeng F,Liu Q,et al.The structure of the ARE-binding domains of Hu antigen R(HuR)undergoes conformational changes during RNA binding[J].Acta Crystallogr D Biol Crystallogr,2013,69(Pt 3):373-380.

22 Schmidtke G,Aichem A,Groettrup M.FAT10ylation as a signal for proteasomal degradation[J].Biochim Biophys Acta,2014,1843(1):97-102.

23 Ren J,Wang Y,Gao Y,et al.FAT10 mediates the effect of TNF-alpha in inducing chromosomal instability[J].J Cell Sci,2011,124(Pt 21):3665-3675.

24 Lee CG,Ren J,Cheong IS,et al.Expression of the FAT10 gene is highly upregulated in hepatocellular carcinoma and other gastrointestinal and gynecological cancers[J].Oncogene,2003,22(17):2592-2603.

25 Bardag-Gorce F,Oliva J,Li J,et al.SAMe prevents the induction of the immunoproteasome and preserves the 26S proteasome in the DDC-induced MDB mouse model[J].Exp Mol Pathol,2010,88(3):353-362.

26 Oliva J,Bardag-Gorce F,French BA,et al.Fat10 is an epigenetic marker for liver preneoplasia in a drug-primed mouse model of tumorigenesis[J].Exp Mol Pathol,2008,84(2):102-112.

27 Yuan R,Jiang C,Hong K,et al.Genetic variation in the Fat10 gene is associated with risk of hepatocellular carcinoma in a Chinese population[J].Asian Pac J Cancer Prev,2011,12(8):2117-2122.

28 Yu X,Liu X,Liu T,et al.Identification of a novel binding protein of FAT10:eukaryotic translation elongation factor 1A1[J].Dig Dis Sci,2012,57(9):2347-2354.

29 Liu L,Dong Z,Liang J,et al.As an independent prognostic factor,FAT10 promotes hepatitis B virus-related hepatocellular carcinoma progression via Akt/GSK3beta pathway[J].Oncogene,2014,33(7):909-920.

30 Sgorbissa A,Brancolini C.IFNs,ISGylation and cancer:Cui prodest[J].Cytokine Growth Factor Rev,2012,23(6):307-314.

31 Andersen JB,Hassel BA.The interferon regulated ubiquitin-like protein,ISG15,in tumorigenesis:friend or foe[J].Cytokine Growth Factor Rev,2006,17(6):411-421.

32 Jeon YJ,Jo MG,Yoo HM,et al.Chemosensitivity is controlled by p63 modification with ubiquitin-like protein ISG15[J].J Clin Invest,2012,122(7):2622-2636.

33 Tessema M,Yingling CM,Thomas CL,et al.SULF2 methylation is prognostic for lung cancer survival and increases sensitivity to topoisomerase-I inhibitors via induction of ISG15[J].Oncogene,2012,31(37):4107-4116.

34 Kim JH,Luo JK,Zhang DE.The level of hepatitis B virus replication is not affected by protein ISG15 modification but is reduced by inhibition of UBP43(USP18)expression[J].J Immunol,2008,181(9):6467-6472.

35 Kanwal F,Kramer JR,Ilyas J,et al.HCV Genotype 3 is Associated with an Increased Risk of Cirrhosis and Hepatocellular Cancer in a National Sample of U.S.Veterans with HCV[J].Hepatology,2014,60(1):98-105.

36 Broering R,Zhang X,Kottilil S,et al.The interferon stimulated gene 15 functions as a proviral factor for the hepatitis C virus and as a regulator of the IFN response[J].Gut,2010,59(8):1111-1119.

37 Konishi H,Shirabe K,Yoshiya S,et al.Hepatic interferon-gamma-induced protein-10 expression is more strongly associated with liver fibrosis than interleukin-28B single nucleotide polymorphisms in hepatocellular carcinoma resected patients with chronic hepatitis C[J].Hepatol Res,2013,43(11):1139-1147.

38 Li S,Duan X,Li Y,et al.MicroRNA-130a inhibits HCV replication by restoring the innate immune response[J].J Viral Hepat,2014,21(2):121-128.

39 Finn RS.Emerging targeted strategies in advanced hepatocellular carcinoma[J].Semin Liver Dis,2013,33(Suppl 1):S11-S19.

40 Asghar U,Meyer T.Are there opportunities for chemotherapy in the treatment of hepatocellular cancer[J].J Hepatol,2012,56(3):686-695.

41 Di Marco V,De Vita F,Koskinas J,et al.Sorafenib:from literature to clinical practice[J].Ann Oncol,2013,24(Suppl 2):i30-i37.

42 Duffy A,Wilkerson J,Greten TF.Hemorrhagic events in hepatocellular carcinoma patients treated with antiangiogenic therapies[J].Hepatology,2013,57(3):1068-1077.

43 Huikai Li,Qiang Li.Mechanisms of Multidrug-resistance in hepatocellular carcinoma[J].Chin J Clin Oncol,2013,(16):1008-1010.[李慧鍇,李 強.肝癌多藥耐藥機制研究進展[J].中國腫瘤臨床,2013,(16):1008-1010.]

44 Qin Y,Bao H,Pan Y,et al.SUMOylation alterations are associated with multidrug resistance in hepatocellular carcinoma[J].Mol Med Rep,2014,9(3):877-881.

45 Li J,Xu Y,Long XD,et al.Cbx4 governs HIF-1alpha to potentiate angiogenesis of hepatocellular carcinoma by its SUMO E3 ligase activity[J].Cancer Cell,2014,25(1):118-131.

46 Qian J,Luo Y,Gu X,et al.Inhibition of SENP6-induced radiosensitization of human hepatocellular carcinoma cells by blocking radiation-induced NF-kappaB activation[J].Cancer Biother Radiopharm,2013,28(3):196-200.

47 Blank JL,Liu XJ,Cosmopoulos K,et al.Novel DNA damage checkpoints mediating cell death induced by the NEDD8-activating enzyme inhibitor MLN4924[J].Cancer Res,2013,73(1):225-234.

48 Nawrocki ST,Griffin P,Kelly KR,et al.MLN4924:a novel first-in-class inhibitor of NEDD8-activating enzyme for cancer therapy[J].Expert Opin Investig Drugs,2012,21(10):1563-1573.

49 Luo Z,Yu G,Lee HW,et al.The Nedd8-activating enzyme inhibitor MLN4924 induces autophagy and apoptosis to suppress liver cancer cell growth[J].Cancer Res,2012,72(13):3360-3371.