葉 蕓，李蘇亮

(西安醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院輸血科，陜西西安710077)

腦卒中包括缺血性腦卒中和出血性腦卒中，是全球范圍內(nèi)流行最廣的心腦血管疾病之一，死亡率占心腦血管疾病死亡的首位[1]。由于腦梗死與腦出血的發(fā)病機(jī)制不同，不同類型腦卒中治療原則及預(yù)后存在差異，尋找客觀指標(biāo)預(yù)測(cè)腦卒中發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)和及早鑒別腦卒中類型有著重要的臨床意義。脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(1ipoprotein-associated phospholipase A2，Lp-PLA2)是磷脂酶A2超家族的一個(gè)亞型，主要由巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞產(chǎn)生，具有促進(jìn)冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的作用[2-3]。近年來研究證實(shí)Lp-PLA2在缺血性腦血管病發(fā)病過程中起著重要的促進(jìn)作用[4]，但對(duì)于Lp-PLA2鑒別缺血性和出血性腦卒中方面的作用缺乏系統(tǒng)研究。我們通過對(duì)腦卒中患者血漿Lp-PLA2檢測(cè)，系統(tǒng)評(píng)價(jià)Lp-PLA2在診斷缺血性腦卒中的價(jià)值及與臨床病情的相關(guān)性。

材料和方法

一、對(duì)象

選取2009年1月至2011年12月在西安醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院住院的腦卒中患者345例，均為發(fā)病3 d之內(nèi)的急性腦卒中患者。其中缺血性腦卒中180例，男110例，女70例，年齡48～65歲;出血性腦卒中165例，男100例，女65例，年齡45～68歲。缺血性腦卒中患者與出血性腦卒中患者的性別構(gòu)成、年齡差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。對(duì)腦卒中患者按美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究所中風(fēng)量表(NIHSS)進(jìn)行神經(jīng)功能缺損程度評(píng)分。腦梗死體積分型按Pullicino公式[核磁共振(MRI)掃描陽性層數(shù)÷2]計(jì)算，將其分為小梗死組(≤4 cm3)、中梗死組(＞4～ ＜10 cm3)、大梗死組(≥10 cm3)。腦卒中患者納入標(biāo)準(zhǔn):符合第4屆全國(guó)腦血管病學(xué)術(shù)會(huì)議制定的腦卒中診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]。排除標(biāo)準(zhǔn):嚴(yán)重心、肝、腎及血液系統(tǒng)疾病，自身免疫性疾病。同時(shí)隨機(jī)選取同期西安醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院體檢中心正常體檢者105名作為正常對(duì)照組，男65名，女40名，年齡46～68歲，其年齡及性別構(gòu)成均與病例組匹配。

二、方法

1.主要試劑與儀器 人血漿脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(Lp-PLA2)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)試劑盒購(gòu)自上海朗頓公司(美國(guó)進(jìn)口)。血脂[總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)]及葡萄糖(Glu)檢測(cè)采用日本奧林巴斯AU640全自動(dòng)生化分析儀及原裝配套試劑。FIB采用美國(guó)Beckman ACL-9000全自動(dòng)血凝儀檢測(cè)。

2.Lp-PLA2測(cè)定 采用ELISA雙抗體夾心法測(cè)定Lp-PLA2水平。所有對(duì)象均于清晨空腹用乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝管采集肘靜脈血3 mL，混合10～20 min后在2～8℃下1 200×g離心20 min，分離上清液，置于Ep管。統(tǒng)一編號(hào)后置－80℃保存。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 11.5軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。各組年齡、體重指數(shù)等呈正態(tài)分布的連續(xù)變量均以±s表示，兩樣本比較采用兩樣本t檢驗(yàn);多樣本比較采用 one-way ANOVA 檢驗(yàn)。TC、TG、HDL-C、LDLC、Glu、FIB、Lp-PLA2 呈偏態(tài)分布，用中位數(shù)(四分位數(shù))表示，多組間比較用Kruskal-Wallis秩和檢驗(yàn)判斷各組間差異;然后采用Mann-Whitney U檢驗(yàn)進(jìn)一步做兩兩比較。性別非參數(shù)資料用Person χ2檢驗(yàn)進(jìn)行分析;Lp-PLA2與神經(jīng)功能缺損程度評(píng)分之間的關(guān)系采用Spearman相關(guān)分析;診斷效能用受試者工作特征(ROC)曲線評(píng)價(jià)，總體診斷效能用ROC曲線下面積為(AUC)及95%可信區(qū)間(CI)表示。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

一、3組之間相關(guān)指標(biāo)的比較

缺血性腦卒中組、出血性腦卒中組和正常對(duì)照組年齡、體重及性別構(gòu)成差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F 值分別為 1.902、1.08，χ2=0.05，P 均 ＞0.05)。缺血性腦卒中組和出血性腦卒中組的NIHSS評(píng)分差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=－1.602，P＞0.05);出血性腦卒中組中的高血壓病例數(shù)明顯多于缺血性腦卒中組(χ2=147.6，P ＜0.05)。

缺血性腦卒中組、出血性腦卒中組和正常對(duì)照組之間 Lp-PLA2、TC、HDL-C、LDL-C、FIB 水平差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均＜0.05);缺血性腦卒中組與出血性腦卒中組之間TG和Glu水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P 值分別為0.133、0.067)，但與正常對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均＜0.05)。見表1。

二、Lp-PLA2對(duì)缺血性腦卒中的診斷效能

Lp-PLA2診斷缺血性腦卒中的AUC為0.905(95%CI:0.772 ～ 1.038)，最佳臨界值為42.35 μg/L，敏感性為 81.5%，特異性為 80.0%。見圖1。

表1 缺血性腦卒中組、出血性腦卒中組和正常對(duì)照組一般資料比較

圖1 Lp-PLA2診斷缺血性腦卒中的ROC曲線

三、血漿Lp-PLA2水平與腦梗死體積的關(guān)系

血漿Lp-PLA2水平隨腦梗死體積增加而呈遞增趨勢(shì)，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見表2。

表2 血漿Lp-PLA2水平與腦梗死體積的關(guān)系

四、不同類型腦卒中患者血漿Lp-PLA2與神經(jīng)功能缺損程度評(píng)分的相關(guān)性分析

缺血性腦卒中患者血漿Lp-PLA2與神經(jīng)功能缺損程度評(píng)分密切相關(guān)(r=0.837，P ＜0.05)。見圖2。出血性腦卒中患者血漿Lp－PLA2與神經(jīng)功能缺損程度評(píng)分無相關(guān)性(r=0.276，P=0.127)，見圖 3。

圖2 缺血性腦卒中患者血漿Lp-PLA2與神經(jīng)功能缺損程度評(píng)分的相關(guān)性分析

圖3 出血性腦卒中患者血漿Lp-PLA2與神經(jīng)功能缺損程度評(píng)分的相關(guān)性分析

討 論

缺血性腦卒中的基本病因是動(dòng)脈粥樣硬化，近年來的研究表明動(dòng)脈粥樣硬化本質(zhì)上是一種慢性炎癥反應(yīng)過程[6]。Lp-PLA2作為一種炎性標(biāo)志物與動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生和缺血性腦卒中的發(fā)病密切相關(guān)[7]。Ninio等[8]發(fā)現(xiàn)在動(dòng)脈粥樣硬化的斑塊中Lp-PLA2的活性及其mRNA表達(dá)都顯著增高，并從單核苷酸多態(tài)性的角度證明了Lp-PLA2具有促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化的作用。Serruys等[9]提出Lp-PLA2通過與炎性細(xì)胞的正反饋?zhàn)饔么龠M(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化的形成，并進(jìn)一步導(dǎo)致血栓形成及缺血性事件的發(fā)生。一些流行病學(xué)研究更進(jìn)一步證明Lp-PLA2是動(dòng)脈硬化性腦梗死的1個(gè)獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)因子[10-11]。目前，國(guó)內(nèi)外關(guān)于Lp-PLA2水平的研究主要側(cè)重于心血管疾病[12]，在腦血管疾病方面的研究相對(duì)較少，且對(duì)于應(yīng)用Lp-PLA2預(yù)測(cè)和診斷缺血性腦卒中的作用缺乏系統(tǒng)研究，有待于進(jìn)一步深入研究。

本研究結(jié)果顯示缺血性腦卒中組、出血性腦卒中組和正常對(duì)照組之間血漿Lp-PLA2水平差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均＜0.05)。血漿Lp-PLA2水平隨腦梗死體積增加呈遞增趨勢(shì)，但差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。提示血漿Lp-PLA2水平不能作為預(yù)測(cè)腦梗死體積大小的指標(biāo)。Spearman相關(guān)分析表明，缺血性腦卒中患者血漿Lp-PLA2水平與神經(jīng)功能缺損程度呈正相關(guān)(r=0.837，P＜0.05)，而出血性腦卒中患者血漿Lp-PLA2與神經(jīng)功能缺損程度無相關(guān)性(r=0.276，P=0.127)。由此可見，Lp-PLA2可促進(jìn)缺血性腦卒中的發(fā)生、發(fā)展且可作為病情嚴(yán)重程度的判定指標(biāo)。同時(shí)，本研究結(jié)果還顯示出血性腦卒中患者中高血壓病例數(shù)明顯多于缺血性腦卒中，進(jìn)一步說明高血壓是出血性腦卒中的重要發(fā)病因素。

國(guó)外有研究顯示，循環(huán)中Lp-PLA2的活性和水平升高與血管性事件的發(fā)生密切相關(guān)。Lp-PLA2作為1種炎癥介質(zhì)，可以獨(dú)立預(yù)測(cè)缺血性心腦血管病的發(fā)生[13]。本研究結(jié)果也進(jìn)一步證實(shí)了這一點(diǎn)。本研究根據(jù)缺血性腦卒中和出血性腦卒中血清Lp-PLA2水平制作的ROC曲線顯示，血清Lp-PLA2水平診斷缺血性腦卒中的AUC為0.905;當(dāng) Lp-PLA2 為42.35 μg/L 時(shí)，診斷缺血性腦卒中的敏感性為81.5%，特異性為80.0%。由此可見血清Lp-PLA2具有良好的診斷效能，將對(duì)早期缺血性腦卒中患者的診斷鑒別具有重要意義。

許多研究均發(fā)現(xiàn)缺血性腦卒中患者Lp-PLA2明顯升高，本研究結(jié)果也進(jìn)一步證實(shí)了這一點(diǎn)。Lp-PLA2對(duì)預(yù)測(cè)缺血性腦卒中發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)、發(fā)展、預(yù)后有重要的臨床價(jià)值，而且對(duì)臨床早期診斷缺血性腦卒中有重要意義，可作為缺血性腦卒中的預(yù)測(cè)指標(biāo)和評(píng)價(jià)病情嚴(yán)重程度以及治療療效觀察的重要指標(biāo)。

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