楊楊，石超，郭旭生，3*

(1．蘭州大學(xué)草地農(nóng)業(yè)科技學(xué)院草地農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，甘肅蘭州730020;2．蘭州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院草地農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，甘肅蘭州730000;3．蘭州大學(xué)青藏高原生態(tài)系統(tǒng)管理國(guó)際中心，甘肅蘭州730000)

草地畜牧業(yè)作為青藏高原傳統(tǒng)的基礎(chǔ)產(chǎn)業(yè)在其經(jīng)濟(jì)發(fā)展中具有重要的地位，也是青藏高原今后經(jīng)濟(jì)發(fā)展的支柱產(chǎn)業(yè)之一。但是，長(zhǎng)期以來(lái)天然草地飼草料供給的季節(jié)性不平衡，嚴(yán)重制約著青藏高原草地畜牧業(yè)的高效發(fā)展，加之長(zhǎng)期的超載過(guò)牧，草地退化，使草畜矛盾日益突出［1-3］。通過(guò)人工種草和天然草地打草來(lái)制作青貯飼料，將是解決高寒草地畜牧業(yè)冬春季節(jié)飼草料嚴(yán)重不足的有效措施之一。乳酸菌在飼料工業(yè)中，尤其在青貯飼料的制備領(lǐng)域中有著重要的作用。在很多國(guó)家特別是歐美等發(fā)達(dá)國(guó)家已經(jīng)對(duì)乳酸菌在青貯飼料制備中的應(yīng)用進(jìn)行了大量而深入的研究。其研究?jī)?nèi)容主要包括性狀優(yōu)良乳酸菌的篩選，乳酸菌對(duì)青貯飼料發(fā)酵品質(zhì)的影響，添加乳酸菌的青貯飼料對(duì)奶牛采食量的影響以及乳酸菌對(duì)青貯飼料二次發(fā)酵的抑制作用等［4］。而在用于飼料青貯的乳酸菌的篩選及其對(duì)青貯飼料發(fā)酵品質(zhì)影響的基礎(chǔ)應(yīng)用研究、產(chǎn)品開發(fā)等方面日本和歐美國(guó)家處于領(lǐng)先地位，但我國(guó)乳酸菌在青貯飼料中的研究主要是利用國(guó)外商品化的乳酸菌制劑進(jìn)行試驗(yàn)［5-6］，對(duì)具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的乳酸菌制劑的研究與開發(fā)很少。然而，我國(guó)青藏高原地區(qū)的極端氣候環(huán)境，使得傳統(tǒng)商品化乳酸菌在該地區(qū)的應(yīng)用受到了限制，因?yàn)樯唐坊樗峋苿┑倪m宜生長(zhǎng)溫度通常為20～25℃。因此，發(fā)掘利用高寒地區(qū)鄉(xiāng)土乳酸菌種質(zhì)資源，對(duì)于在該地區(qū)制作青貯飼料具有重要的意義。

近幾年，有關(guān)青藏高原乳酸菌的多樣性與種質(zhì)資源的研究，逐漸引起了國(guó)內(nèi)外學(xué)者的關(guān)注，這方面的研究主要涉及食品學(xué)科并集中于高原傳統(tǒng)發(fā)酵乳制品中乳酸菌的分離與鑒定［7-13］。國(guó)內(nèi)有關(guān)牧草中天然附著乳酸菌分離鑒定及其在青貯飼料中的篩選研究與應(yīng)用方面起步較晚，最近幾年才開始有報(bào)道［4，14-16］，而且關(guān)于青藏高原高寒地區(qū)牧草中附著乳酸菌的研究還無(wú)人涉及，只有相關(guān)研究表明，在我國(guó)高寒地區(qū)高海拔、低溫和缺氧的極端環(huán)境中進(jìn)行牧草青貯時(shí)能夠得到優(yōu)質(zhì)的青貯飼料。青貯飼料色綠，酸香味濃，適口性好，幾乎沒有二次發(fā)酵的現(xiàn)象［17-18］。這說(shuō)明在我國(guó)青藏高原高寒地區(qū)依然存在著能夠在極端環(huán)境中發(fā)酵飼料的特殊乳酸菌菌群。在西藏高寒地區(qū)，以藏北嵩草(Kobresia littledalei)為優(yōu)勢(shì)種的草地型是全區(qū)高寒沼澤化草甸亞類草地中分布范圍廣、面積大、牧草飼用價(jià)值較高的草地型［19-20］。因此，本試驗(yàn)以藏北嵩草為原料，對(duì)其附著乳酸菌進(jìn)行分離、鑒定和生物學(xué)特性研究，為篩選青藏高原青貯飼料用優(yōu)良乳酸菌種質(zhì)資源提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1．1 樣品采集

用于分離乳酸菌的試驗(yàn)樣品藏北嵩草于2010年7月初分別采自西藏納木錯(cuò)高寒草甸草地(海拔5100 m;東經(jīng)90°42'，北緯 29°58');那曲古露鎮(zhèn)高寒草甸(海拔 4582 m;東經(jīng) 91°37'，北緯 30°50');堆龍德慶的高寒草甸(海拔3980 m;東經(jīng)90°49'，北緯29°57')。樣品采集地點(diǎn)的氣候?qū)儆诟呱絹喓畮О敫珊导撅L(fēng)氣候。試驗(yàn)地堆龍德慶鄉(xiāng)年均降雨量為444 mm，年均氣溫7℃，年平均日照時(shí)數(shù)3000 h;納木錯(cuò)采樣區(qū)年平均溫度－0．6℃，年降雨量456．8 mm，年最高溫在7月份，為14．6℃，該地區(qū)日照時(shí)數(shù)2880 h;樣品采集點(diǎn)古露鎮(zhèn)年平均氣溫－1．3℃，年內(nèi)最高溫度在7月份，為9．1℃，年平均降雨量為421．9 mm，該地區(qū)年平均日照時(shí)數(shù)為2846 h。樣品采集地點(diǎn)牧草生長(zhǎng)期為5月中旬至9月底，土壤類型均為高山草甸土。每個(gè)采樣點(diǎn)設(shè)置10個(gè)1 m×1 m樣本框分別進(jìn)行采樣。

牧草樣品剪取后，裝入塑料袋，冰盒中冷藏，帶回實(shí)驗(yàn)室，－20℃保存，以備附著微生物檢測(cè)。

1．2 培養(yǎng)基

試驗(yàn)用培養(yǎng)基參考凌代文［21］的方法配制。

葡萄糖酵母蛋白胨(GYP)培養(yǎng)基:蛋白胨2 g，酵母提取物5 g，葡萄糖10 g，吐溫－80 0．25 g，MgSO4·7H2O 0．1 g，MnSO40．1 g，F(xiàn)eSO40．1 g，NaCl 5 g，CaCO35 g，加蒸餾水至 1000 mL，調(diào) pH 6．8，121℃滅菌 15 min。

MRS培養(yǎng)基:蛋白胨10 g，牛肉膏10 g，酵母提取物5 g，葡萄糖20 g，K2HPO45 g，檸檬酸銨2 g，乙酸鈉5 g，MgSO4·7H2O 0．58 g，吐溫 －80 1 mL，MnSO40．25 g，CaCO320 g，瓊脂粉20 g，加蒸餾水至1000 mL，調(diào) pH 6．2 ～6．4，121℃滅菌15 min。不加瓊脂粉即可得到MRS培養(yǎng)液。

PYG培養(yǎng)基:PY基礎(chǔ)培養(yǎng)液內(nèi)加入1．0 g葡萄糖。PY基礎(chǔ)培養(yǎng)基為蛋白胨0．5 g，胰酶解酪朊0．5 g，酵母提取物 1．0 g，鹽溶液 4．0 mL，蒸餾水 100 mL。其中鹽溶液為無(wú)水氯化鈣 0．2 g，MgSO4·7H2O 0．48 g，磷酸氫二鉀 1．0 g，磷酸二氫鉀 1．0 g，碳酸氫鈉 10．0 g，氯化鈉 2．0 g，蒸餾水 1000 mL。

1．3 乳酸菌的分離與純化

在無(wú)菌室中，將嵩草樣品剪成1 cm左右的短段，并稱取10 g分別置裝有90 mL滅菌生理鹽水的三角瓶中，常溫?fù)u床4～6 h。用已滅菌的生理鹽水適當(dāng)稀釋，選2個(gè)稀釋度，每個(gè)稀釋度取0．1 mL菌種稀釋液滴到GYP(含有碳酸鈣)平板上，用涂布棒將其涂布均勻后，將平板在37℃厭氧培養(yǎng)48 h。之后，根據(jù)菌落的顏色、大小、光澤、透明程度等，挑取有透明圈的單菌落，進(jìn)行革蘭氏染色、油鏡鏡檢和過(guò)氧化氫酶試驗(yàn)，凡是革蘭氏染色陽(yáng)性、過(guò)氧化氫酶陰性的菌株疑似其為乳酸菌并以劃線的方式在MRS培養(yǎng)基上繼續(xù)分離純化培養(yǎng)2次。將純化后的菌株接種到MRS斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)后，在4℃條件下保存?zhèn)溆谩?/p>

1．4 菌種鑒定

1．4．1 屬的鑒定 按照凌代文［21］、楊潔彬等［22］、東秀珠和蔡妙英［23］介紹的方法，將所有革蘭氏陽(yáng)性，過(guò)氧化氫酶試驗(yàn)陰性的分離菌株初步鑒定為乳酸菌。之后根據(jù)菌種的形態(tài)學(xué)特征將其分為桿菌和球菌，并根據(jù)凌代文［21］的方法進(jìn)行乳酸菌屬的初步鑒定試驗(yàn)。

1．4．2 種的鑒定 乳酸菌種的鑒定參考凌代文［21］的方法。通過(guò)糖發(fā)酵試驗(yàn)進(jìn)行乳酸菌種的鑒定，采用杭州天和生化有限公司提供的糖發(fā)酵試劑盒。具體方法按照試劑盒的說(shuō)明進(jìn)行。

1．4．3 乳酸菌的16S rRNA序列測(cè)定 分離的乳酸菌在MRS培養(yǎng)基中培養(yǎng)8 h后進(jìn)一步純化并進(jìn)行菌株DNA的提取。DNA提取試劑盒由天根生化試劑(北京)有限公司提供。DNA的提取及純化按照試劑盒使用方法進(jìn)行。分離單菌DNA做模板，采用引物57 F:5'-AGTTTGATCCTGGCTCAG-3'和205 R:5'-CTTGTTACGACTTCACCC-3'進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增;反應(yīng)系為(50 μL):DNA 模板2 μL，57 F 1 μL，205 R 1 μL，2×Master Mix 25 μL，ddH2O 21 μL。反應(yīng)程序?yàn)?94℃ 30 min;94℃ 30 s，60 ～50℃，30 s(每個(gè)循環(huán)降 1℃)，72℃ 1．5 min，10 個(gè)循環(huán);94℃30 s，50℃30 s，72℃1．5 min，30個(gè)循環(huán);72℃5 min。PCR純化產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序(北京博邁德科技發(fā)展有限公司)。

1．5 生長(zhǎng)特性檢測(cè)

1．5．1 乳酸菌生長(zhǎng)速率的測(cè)定 用待測(cè)菌株的培養(yǎng)液，以相同的接種量(0．1 mL)接入MRS液體培養(yǎng)基中，于30℃厭氧培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，每隔2 h取樣品，用紫外可見分光光度計(jì)(日立，U-2910)以培養(yǎng)基為空白，在波長(zhǎng)620 nm下立即測(cè)定樣品的吸光度值，并按照下列公式計(jì)算菌株的生長(zhǎng)速率。

菌株的生長(zhǎng)速率=液體培養(yǎng)基各時(shí)間點(diǎn)的OD值－液體培養(yǎng)基的起始OD值。

1．5．2 乳酸菌產(chǎn)酸速率測(cè)定 將待測(cè)菌液分別接種于MRS液體培養(yǎng)基中，于30℃厭氧培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，每隔2 h取樣品，用pH計(jì)(上海精科，PHS-3C)檢測(cè)培養(yǎng)液pH值，并按照下列公式計(jì)算菌株的產(chǎn)酸速率。

產(chǎn)酸速率=培養(yǎng)基中起始pH－各時(shí)間點(diǎn)pH。

1．5．3 不同溫度條件下生長(zhǎng)特性 將配制好的MRS培養(yǎng)液以5 mL量分裝試管，121℃高壓滅菌15 min，將試驗(yàn)菌株以相同的接種量(0．1 mL)接入培養(yǎng)液中，搖勻，塞子封口，各設(shè)2個(gè)重復(fù)，溫度為4℃放在冰箱中，10，15，25，30℃放在恒溫培養(yǎng)箱中，40，50，60℃的放在水浴鍋中分別培養(yǎng)，其中4℃培養(yǎng)14 d，40，50和60℃培養(yǎng)7 d，其余培養(yǎng)2 d，觀察菌株的生長(zhǎng)情況。

本節(jié)將驗(yàn)證PUs與SUs同時(shí)存在于CRN時(shí)，幾種頻譜資源分配算法性能對(duì)比.在網(wǎng)絡(luò)中部署4個(gè)PUs，分別位于(30,30)(30,70)(70,30)和(75,30)處，干擾半徑均為30m，以概率θ分別對(duì)信道1、2、3和1獨(dú)占使用，則信道空閑概率為μ=1-θ.

1．5．4 不同pH條件下生長(zhǎng)特性 所用培養(yǎng)基是將MRS培養(yǎng)液用鹽酸或氫氧化鈉調(diào)pH至所需酸堿度，即pH分別為3，4，4．5，5，6，7，8，9，9．5 的 9 種 MRS 液體培養(yǎng)基，同上步驟，將試驗(yàn)菌株的培養(yǎng)液，以相同的接種量(0．1 mL)接入裝有已滅菌培養(yǎng)基中，各設(shè)2個(gè)重復(fù)，置于37℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)2 d后，觀察菌株的耐酸堿能力。

1．6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

不同乳酸菌菌株生長(zhǎng)速率及產(chǎn)酸速率利用SPSS 19．0進(jìn)行單因素方差分析和多重比較。根據(jù)乳酸菌的16S rDNA序列，在Genbank中進(jìn)行比對(duì)，分析相似性。乳酸菌16S rRNA序列用MEGA 5．0中的Clustal W對(duì)最近類群的序列進(jìn)行多重比較分析，并通過(guò)該軟件的鄰近法(Neighbor-Joining)構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹，分支聚類的穩(wěn)定性用Bootstrap方法進(jìn)行100次隨機(jī)重復(fù)取樣評(píng)價(jià)［13］。

2 結(jié)果與分析

2．1 藏北嵩草分離魏斯氏乳酸菌的16S rRNA基因序列分析

采用16S rRNA測(cè)序結(jié)果表明(表1)，從西藏德慶、那曲古露和納木錯(cuò)高寒草甸藏北嵩草中共分離出17株魏斯氏乳酸菌。其中從德慶、那曲古露及納木錯(cuò)藏北嵩草中各分離出9，3及5株菌。這些菌種屬于魏斯氏乳酸菌的2個(gè)種，即食竇魏斯氏乳酸菌(Weissella cibaria)和融合魏斯氏乳酸菌(Weissella confusa);而且有10個(gè)菌株與Genbank中的標(biāo)準(zhǔn)菌株食竇魏斯氏菌II-I-59(W．cibaria II-I-59)和融合魏斯氏菌JCM 1093(W．confusa JCM 1093)的相似率均為99%。通過(guò)進(jìn)一步對(duì)2種魏斯氏乳酸菌菌種相似菌株的16S rRNA基因序列進(jìn)行多重比較分析和系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建(圖1)，鑒定出所分離的17株魏斯氏乳酸菌菌株有6株為食竇魏斯氏乳酸菌，11株為融合魏斯氏乳酸菌菌株。

2．2 藏北嵩草分離魏斯氏乳酸菌的生長(zhǎng)特性

不同海拔地區(qū)藏北嵩草附著魏斯氏乳酸菌的生長(zhǎng)特征見表2。從分離菌株在不同溫度的生長(zhǎng)情況來(lái)看，這些菌株均能夠在4和10℃生長(zhǎng)。在不同pH值條件下的生長(zhǎng)情況表明，菌株D7，D9和N2，N3，N4能在pH值為3的條件下生長(zhǎng)，而且大多數(shù)菌株能在pH值為4～9．5的范圍內(nèi)生長(zhǎng)。

分離乳酸菌的糖發(fā)酵試驗(yàn)結(jié)果見表3。從表3看出，除了菌株N2外，所有的菌株都發(fā)酵阿拉伯糖。發(fā)酵半乳糖的結(jié)果表明，有15個(gè)魏斯氏菌株可發(fā)酵利用半乳糖，而菌株D2和D7為可變的反應(yīng)。所有的菌株均能利用纖維二糖，麥芽糖，果糖，蜜二糖和蔗糖。菌株D4，G3，以及N2～N5均能發(fā)酵核糖，而菌株D1，D2和D9不利用核糖，其余菌株為可變的反應(yīng);從利用棉籽糖的情況來(lái)看，菌株D6，N1，N2，N3不發(fā)酵棉籽糖。根據(jù)魏斯氏乳酸菌的糖發(fā)酵鑒定方法，食竇魏斯氏乳酸菌發(fā)酵阿拉伯糖，不發(fā)酵半乳糖和木糖。但本試驗(yàn)中所分離菌株的糖發(fā)酵試驗(yàn)結(jié)果表明，只有菌株D7利用半乳糖為可變反應(yīng)，其余5株食竇魏斯氏乳酸菌(D3，D8，D9，N1，N3，N4)均能發(fā)酵利用半乳糖。而16S rRNA序列分析結(jié)果表明，菌株D2，D4，D5，D6及G1，G2和N2，N3與融合魏斯氏乳酸菌的相似性均為100%，并結(jié)合系統(tǒng)發(fā)育分析結(jié)果(圖1)，菌株D1，D8和G2均為融合魏斯氏乳酸菌。

表1 藏北嵩草附著魏斯氏乳酸菌菌株的16S rRNA基因序列分析結(jié)果Table 1 Results of 16S rRNA gene sequences of strain isolated from K．littledalei

2．3 藏北嵩草分離魏斯氏乳酸菌的產(chǎn)酸及生長(zhǎng)特性

藏北嵩草附著魏斯氏乳酸菌的產(chǎn)酸速率見表4。17株魏斯氏乳酸菌培養(yǎng)6 h后，菌株D4的產(chǎn)酸速率最快，其培養(yǎng)基中pH比起始培養(yǎng)基的pH下降了1．38，且顯著高于其他菌株的產(chǎn)酸速率(P＜0．05)。培養(yǎng)12 h后，菌株G1培養(yǎng)基中的pH最低，比起始pH降低了2．09，且顯著高于其他菌株的產(chǎn)酸速率(P＜0．05)。培養(yǎng)18 h后，菌株N1培養(yǎng)基中的pH最低，顯著高于其他菌株的產(chǎn)酸速率(P＜0．05)，且比起始pH降低2．46。同時(shí)，該菌株在培養(yǎng)24 h后，其產(chǎn)酸速率也最大。

圖1 藏北嵩草分離魏斯氏乳酸菌的系統(tǒng)發(fā)育分析Fig．1 The phylogenetic analysis of the Weissella lactic acid bacteria isolated from K．littledalei

3 討論

魏斯菌屬(Weissella)是1993年Collins等提議建立的一個(gè)新菌屬，目前至少由12個(gè)菌種組成［24］。該乳酸菌不形成芽孢，無(wú)動(dòng)力的革蘭陽(yáng)性球菌或球桿菌，呈單個(gè)、成雙或短鏈狀排列。這類乳酸菌廣泛分布于發(fā)酵食物(如臘腸、泡菜)、土壤等，多數(shù)菌種在植物發(fā)酵中起重要作用［24］。在青貯飼料中報(bào)道的魏斯氏菌主要為類腸膜魏斯菌(W．paramesenteroides)，并在青貯飼料發(fā)酵初期起重要作用，但研究表明這類乳酸菌在提高青貯飼料品質(zhì)方面作用較?。?5］。

表2 藏北嵩草附著魏斯氏乳酸菌在不同溫度和pH條件下的生長(zhǎng)特性Table 2 G row th profiles of Weissella strains isolated from K．littledalei at different tem perature and pH

表3 藏北嵩草附著魏斯氏乳酸菌的糖發(fā)酵特性Table 3 Sugar fermentation profiles of Weissella strains isolated from K．littledalei

魏斯菌屬細(xì)菌可分離于多種來(lái)源。但在高寒極端環(huán)境中分離的魏斯氏乳酸菌還未見報(bào)道。本研究從高寒地區(qū)藏嵩草中分離的魏斯氏乳酸菌，通過(guò)16S rRNA序列分析表明，主要為食竇魏斯氏乳酸菌和融合魏斯氏乳酸菌。從目前的研究資料來(lái)看，僅見這2種菌分離于人類或其他動(dòng)物的報(bào)道［26-27］。研究表明，這2種菌很難從形態(tài)特征及菌落特征方面區(qū)別;食竇魏斯氏菌發(fā)酵阿拉伯糖，不發(fā)酵半乳糖和木糖，可區(qū)別于融合魏斯氏菌［24］，因?yàn)槿诤衔核故暇话l(fā)酵阿拉伯糖、蜜二糖和棉籽糖，但發(fā)酵半乳糖、纖維二糖、麥芽糖、核糖等［21］。但本試驗(yàn)的研究結(jié)果表明，從藏嵩草中分離的融合魏斯氏菌除了菌株N2外，其他菌株菌發(fā)酵阿拉伯糖，而且分離鑒定的食竇魏斯氏乳酸菌均能利用半乳糖。這可能是高寒環(huán)境中魏斯氏乳酸菌對(duì)碳源的利用比其他環(huán)境中分離出的菌種更具有廣泛性。

由于青藏高原高寒環(huán)境的特殊性，從藏嵩草中分離的乳酸菌能夠在4℃的條件下生長(zhǎng)，而且在10℃時(shí)生長(zhǎng)活力旺盛，體現(xiàn)出高寒環(huán)境中分離出的乳酸菌對(duì)低溫的適應(yīng)特性。這對(duì)高寒低溫條件下，應(yīng)用分離出的耐低溫乳酸菌進(jìn)行青貯飼料的發(fā)酵提供了保障和科學(xué)依據(jù)，對(duì)于低溫環(huán)境中青貯飼料的調(diào)制具有重要的意義。另外，本試驗(yàn)結(jié)果表明，菌株D7，D9和N2，N3，N4能在pH為3的條件下生長(zhǎng)，體現(xiàn)出這些菌株具有強(qiáng)的耐酸性能力。從本試驗(yàn)分離出的17株融合魏斯氏乳酸菌的生長(zhǎng)特性及產(chǎn)酸能力來(lái)看，菌株D4和G1分別在培養(yǎng)6和12 h時(shí)，產(chǎn)酸

速率顯著高于其他菌株，可作為飼料青貯時(shí)，青貯飼料發(fā)酵啟動(dòng)菌株的備選菌株。而菌株N1在培養(yǎng)18至24 h后，其產(chǎn)酸速率均顯著高于其他菌株。這一特性將對(duì)青貯飼料后續(xù)發(fā)酵起到重要的作用。上述菌株的產(chǎn)酸速率特性，可為青貯飼料發(fā)酵菌株的科學(xué)合理配伍提供依據(jù)。而從生長(zhǎng)速率來(lái)看，所分離的菌株與其產(chǎn)酸能力并不對(duì)應(yīng)。說(shuō)明生長(zhǎng)速率快的菌株，其產(chǎn)酸能力不一定強(qiáng)。為此，在篩選飼料青貯用乳酸菌菌株時(shí)，應(yīng)以產(chǎn)酸速率為依據(jù)。

表4 藏北嵩草附著魏斯氏乳酸菌的產(chǎn)酸速率Table 4 Acid production rate of Weissella strains isolated from K．littledalei

表5 藏北嵩草附著魏斯氏乳酸菌的生長(zhǎng)速率Table 5 Grow th rate of Weissella strains isolated from K．littledalei

4 結(jié)論

本試驗(yàn)首次報(bào)道了從牧草(高寒藏北嵩草)中分離出魏斯氏乳酸菌。分離出的融合魏斯氏乳酸菌菌株具有耐低溫，耐酸性強(qiáng)，發(fā)酵碳源廣泛的特征。這一結(jié)果對(duì)于今后在我國(guó)青藏高原高寒環(huán)境中分離具有特殊發(fā)酵性能的乳酸菌以及利用這些乳酸菌菌株進(jìn)行低溫環(huán)境中青貯飼料的調(diào)制提供了重要的科學(xué)依據(jù)。本試驗(yàn)分離魏斯氏乳酸菌菌株對(duì)青貯飼料發(fā)酵模式及品質(zhì)的影響將做進(jìn)一步研究。

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