摘要：目的 檢測COX-2蛋白、PTEN蛋白在子宮內(nèi)膜樣腺癌中的表達，探討二者與組織分級和臨床分期的關系以及在子宮內(nèi)膜樣腺癌轉移浸潤中的意義。方法 用免疫組織化學技術和圖像分析法檢測150例子宮內(nèi)膜樣腺癌、150例正常子宮內(nèi)膜組織中COX-2蛋白和PTEN蛋白表達。結果 PTEN蛋自在子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中的陽性表達率為32.7%，與正常子宮內(nèi)膜組織（86.0%）比較差異顯著（P<0.05）；COX-2蛋白在子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中的陽性表達率為74.7%，與正常子宮內(nèi)膜組織（27.3%）相比差異顯著（P<0.05）；PTEN蛋白與子宮內(nèi)膜樣腺癌的組織學分級及肌層浸潤深度有關（P<0.05）；COX-2蛋白與子宮內(nèi)膜樣腺癌的組織學分級及淋巴轉移度有關（P<0.05）。COX-2蛋白陽性表達與COX-2蛋白陽性表達呈負相關（r=-0.742，P<0.01）。結論 COX-2蛋白、PTEN蛋白在子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中均異常表達，結合臨床病理參數(shù)可作為預測子宮內(nèi)膜樣腺癌惡性程度及預后判定的客觀指標。

關鍵詞：子宮內(nèi)膜樣腺癌；COX-2；PTEN；免疫組織化學

環(huán)氧化酶-2（cyclooxygenase-2，COX-2）是花生四烯酸轉化成前列腺素過程中的重要限速酶。研究表明COX-2在包括惡性血液病在內(nèi)的多種腫瘤中表達增加，并認為其與腫瘤細胞的增殖、黏附及腫瘤的浸潤和轉移密切相關[1]。PTEN基因位于染色體10q23.3，是迄今發(fā)現(xiàn)的第一個具有磷酸酶活性的抑癌基因。目前研究發(fā)現(xiàn)PTEN參與了細胞增殖、周期進程和信號傳導通路的調(diào)控，在腫瘤發(fā)生和轉移中起非常重要的作用[2]。子宮內(nèi)膜癌是發(fā)生于子宮內(nèi)膜的上皮性惡性腫瘤，以來源于子宮內(nèi)膜腺體的腺癌最常見，其致癌機制與癌基因、抑癌基因和DNA損傷修復基因的異常表達有關。近年來有關COX-2、PTEN在某些腫瘤發(fā)生發(fā)展中起到的作用已引起人們注意，但在子宮內(nèi)膜癌中研究較少。本研究檢測COX-2、PTEN在子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中的表達情況，分析其與臨床病理指標的相關性，探討兩者表達狀況與病情進展及預后等的相關性。

1 資料與方法

1.1一般資料 150例子宮內(nèi)膜樣腺癌組織來自 本院2008年1月～2010年12月進行手術治療并經(jīng)病理組織學檢查確診的手術標本。參照國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟分期標準：I期69例，Ⅱ期35例，Ⅲ期46例；其中高分化（G1）48例，中分化（G2）53例，低分化（G3）49例。所有標本均為原發(fā)性腫瘤，術前未接受放化療或激素治療?；颊吣挲g29.4～65.1歲，平均53.9歲。同時選取本院經(jīng)手術切除的病理診斷為子宮內(nèi)膜單純性增生的30例子宮內(nèi)膜組織進行對照研究。

1.2免疫組織化學染色 組織蠟塊行4μm厚連續(xù)切片，石蠟切片常規(guī)脫蠟。采用鏈霉素抗生素蛋白-過氧化物酶（SP）法檢測COX-2及PTEN蛋白表達，以PBS代替一抗作為陰性對照。按照說明書進行操作。采用雙盲閱片法進行結果判定。

1.3統(tǒng)計學分析 統(tǒng)計學方法應用SPSSl 8.0統(tǒng)計分析軟件進行分析。各組間計數(shù)資料采用χ2檢驗，不滿足χ2檢驗應用條件的采用Fisher精確概率計算法。計量資料兩組比較采用t檢驗，多組比較采用方差分析，兩兩比較采用snk-q檢驗。相關分析采用Spearman等級相關分析。

2 結果

2.1 COX-2和 PTEN蛋白在不同子宮內(nèi)膜組織中表達 COX-2蛋白在正常子宮內(nèi)膜及子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中陽性表達率分別為27.3%（41/150）、74.7%（112/150），呈下降趨勢，兩組間差異顯著（P<0.05）。PTEN蛋白在正常子宮內(nèi)膜及子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中陽性表達率分別為86.0%（129/150）、32.7%（39/150），呈升高趨勢，兩組間差異顯著（P<0.05）。

2.2 COX-2和PTEN蛋白表達與子宮內(nèi)膜樣腺癌臨床病理特征的關系 COX-2蛋白與子宮內(nèi)膜樣腺癌的手術-病理分期、組織學分級及淋巴結轉移有關（P<0.05）；PTEN蛋白與子宮內(nèi)膜樣腺癌的手術一病理分期、組織學分級及肌層浸潤深度有關（P<0.05），

2.3 COX2和PTEN蛋白在子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中表達的相關性 在150例子宮內(nèi)膜樣腺癌組織中COX2蛋白陽性表達率為74.7%，而PTEN陽性表達率為32.7%，COX2蛋白陽性表達而PTEN陽性表達者占21例，二者同為陽性表達者占4例，二者同為陰性表達者占4例。經(jīng)非參數(shù)Spearman等級相關分析表明，二者呈負相關（r= -0.742，P<0.05）。

3 討論

PTEN作為抑癌基因，其編碼的蛋白具有脂質(zhì)磷酸酶和蛋白磷酸酶活性，發(fā)揮腫瘤抑制功能[3]，PTEN蛋白表達降低及缺失會影響其抑制腫瘤生長的功能。包括子宮內(nèi)膜樣腺癌在內(nèi)的多種腫瘤中PTEN基因存在不同程度的突變、缺失，導致PTEN蛋白的表達減低。

本研究結果顯示，子宮內(nèi)膜樣腺癌患者中PTEN陽性表達明顯低于正常增殖期子宮內(nèi)膜中的表達，且病理分級越高PTEN表達越低。PTEN在淺肌層中的表達也明顯高于深肌層表達，預示可能與子宮內(nèi)膜樣腺癌進展及預后不良密切相關。

COX-2作為一種誘導型酶，在包括子宮內(nèi)膜樣腺癌在內(nèi)的多種腫瘤中表達增加，具有如下作用：①刺激腫瘤細胞的增殖、抑制腫瘤細胞凋亡。COX-2過表達可上調(diào)細胞內(nèi)抗凋亡蛋白Bcl-2及Bcl-xL的表達，降低凋亡蛋白caspase-3/9活性；②促進腫瘤內(nèi)血管形成；③促黏附和轉移：COX-2過表達可促進金屬基質(zhì)蛋白酶-2表達增加，提高細胞與細胞外基質(zhì)蛋白黏附能力，增加腫瘤細胞的侵襲力[4]。

本研究結果表明，子宮內(nèi)膜樣腺癌患者中COX-2陽性表達明顯高于正常增殖期子宮內(nèi)膜中的表達，且COX-2陽性表達與子宮內(nèi)膜樣腺癌患者病理分級及是否轉移相關。病理分級越高，有淋巴轉移的患者COX-2表達明顯增加。

有關COX-2蛋白和 PTEN蛋白在腫瘤組織中表達的相關性已有文獻對其進行報道。研究發(fā)現(xiàn)大腸癌細胞中COX-2蛋白表達與PTEN蛋白表達呈負相關。成志勇等[6]對白血病相關特異基因的研究顯示PTEN可能通過抑制COX-2表達從而抑制白血病細胞增殖、黏附功能。COX-2蛋白陽性表達與PTEN蛋白陽性表達呈負相關。本研究結果提示兩者與子宮內(nèi)膜樣腺癌的發(fā)生、發(fā)展轉移過程有關。其可能機制如下：①腫瘤發(fā)展依靠血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）促進腫瘤新生血管生成，COX-2原癌基因的激活能促進腫瘤細胞分泌VEGF[5]， PTEN則通過血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）、成纖維細胞因子（bFGF）抑制腫瘤生成血管。② PTEN蛋白通過其細胞表面作用靶點（PIP3/FAK）表達特性可直接作用于COX-2蛋白受體，阻斷COX-2蛋白的信號轉導，減少VEGF釋放。③COX-2蛋白擴增和過度表達會導致正常細胞的惡性轉化，PTEN蛋白抑制腫瘤細胞侵襲和轉移，調(diào)節(jié)細胞對促凋亡因子的敏感性。因此，聯(lián)合檢測COX-2蛋白和 PTEN蛋白可作為預測子宮內(nèi)膜樣腺癌的惡性程度的指標。

參考文獻：

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[3]任玉蘭，王華英.子宮內(nèi)膜癌的分子靶向治療新進展[J].中國癌癥雜志，2010，20（5）

[4]廖化梅，劉建.環(huán)氧化酶-2與雌，孕激素受體在子宮內(nèi)膜癌中的表達及相關性研究[J].重慶醫(yī)學，2011，40（24）：2395-2397.

[5]Li C J， Chang J K， Wang G J， et al. Constitutively expressed COX-2 in osteoblasts positively regulates Akt signal transduction via suppression of PTEN activity[J]. Bone，2011，48（2）：286-297.

[6]成志勇，張昕，王哲，等.PTEN和COX-2在髓系白血病中的表達及作用機制探討[J].中華檢驗醫(yī)學雜志，2012，35（2）：165-169.

編輯/王敏